张爽
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 异基因恒河猴胰岛骨髓腔内移植治疗1型糖尿病
- 王成世王莉李红霞李新丽程惊秋陆燕蓉杜晓炯何斯荣陈又南刘敬平田伯乐张爽麦刚赵久茗
- 恒河猴外周血调节性T淋巴细胞的分离纯化及鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的建立恒河猴外周血CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Tregs)快速有效的分离纯化方法。方法 4～5岁健康恒河猴10只,雌性4只,雄性6只,体重5～8 kg;于大隐静脉抽取外周血,每只抽取8 mL。密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),分别采用非人灵长类Tregs分离试剂盒的生物素标记的混合抗体和磁珠标记的抗生物素抗体阴性分选,以及大鼠抗人CD4-活化蛋白C(activatedprotein C,APC)和抗APC多选试剂盒中的磁珠标记的抗APC抗体阳性分选出CD4+T淋巴细胞,比较两种方法获得细胞的得率、活性及纯度;选择得率、活性和纯度较高的分选方法获得的CD4+T淋巴细胞,用磁珠标记的抗人CD25抗体进行阳性分选,获得CD4+CD25+Tregs,流式细胞仪检测纯度、活性及FoxP3表达水平,以及Tregs对刀豆蛋白(concanavalinA,ConA)刺激的自体CD4+CD25-效应性T淋巴细胞(effective T cells,Teffs)增殖的抑制功能。结果 CD4+T淋巴细胞阳性分选和阴性分选后,细胞活性均达95%左右,差异无统计学意义(P>0.05),但阳性分选后CD4+T淋巴细胞得率和纯度均显著高于阴性分选(P<0.05)。后续CD4+CD25+Tregs分选采用阳性分选法获得的CD4+T淋巴细胞。经双阳性分选收集的目的细胞中CD4+CD25+Tregs占76.2%±8.6%,活细胞比例为93.3%±4.7%,FoxP3阳性细胞比例为74.2%±6.9%。混合培养后Tregs均对ConA刺激的Teffs的增殖有抑制作用。结论免疫磁珠双阳性分选法能有效分选出恒河猴外周血中有功能的CD4+CD25+Tregs。
- 张爽金熙程汉佳何斯荣陈又南龙丹单娟曾力王成世程惊秋陆燕蓉
- 关键词：调节性T淋巴细胞免疫磁珠分选恒河猴
- 骨髓间充质干细胞对大鼠到小鼠胰岛移植的保护作用被引量：2
- 2011年
- 目的探讨同种异基因骨髓间充质干细胞(bone mesenchamal stem cells,BMSC)静脉输注对大鼠到小鼠胰岛移植物的功能保护和小鼠糖尿病状态改善。方法全骨髓培养法获得C57BL/6小鼠BMSC。不连续梯度离心法分离纯化Sprague-Dawley(SD)大鼠胰岛,将300胰岛当量的胰岛单独或与BMSC联合移植入链脲菌素诱导的糖尿病BALB/c小鼠肾包膜下,并通过尾静脉在移植后0、3和5d注射CM-DiI标记的BMSC 5×105/只,对照组给于磷酸盐缓冲溶液。移植后监测血糖,第9天处死小鼠,取肝、脾、胸腺、淋巴结和移植胰岛的肾脏,冰冻切片,荧光显微镜观察CM-DiI标记细胞的组织分布;免疫荧光法观察移植物中胰岛素和胰高血糖素表达,评价胰岛的功能。结果 BMSC静脉输注后主要分布于胸腺,其次是脾脏和淋巴结,肾和肝组织中未观察到BMSC;BMSC联合胰岛移植组血糖控制水平优于其他组,且在第7天的口服糖耐量实验优于单纯胰岛移植组。结论与胰岛联合移植的BMSC对受者免疫器官和组织有明显的趋向性,且对胰岛细胞的体内存活有一定保护作用。
- 曾力张爽魏玲玲田伯乐麦刚张杰李胜富陈又南陆燕蓉
- 关键词：骨髓间充质干细胞异种胰岛移植免疫调节
