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大鼠角膜缘上皮细胞的体外培养以及碱烧伤后β-连环蛋白表达的实验研究: 2010年; 目的探讨角膜缘上皮细胞的体外培养以及碱烧伤后β-连环蛋白(β-catenin)的表达规律。方法消化法培养大鼠角膜缘上皮细胞,并对其生物学特征[细胞形态、泛角质蛋白抗体(AE1/AE3)和细胞核增殖抗原(PCNA)]做初步鉴定;构建体外碱烧伤模型,利用实时定量聚合酶链反应和免疫荧光技术检测伤后各时相点β-catenin的表达。结果体外培养的角膜缘上皮细胞具典型的上皮细胞特点,大部分细胞分化程度较低且生活状态良好;核酸和蛋白水平均显示,伤后24小时β-catenin的表达有显著升高(P<0.05),至伤后48小时达到峰值(P<0.01)。结论在一定程度上可以利用角膜缘上皮细胞的研究结果来近似反映角膜干细胞的特点;Wnt经典信号途径参与了碱烧伤后的细胞修复过程。; 王海燕严军蒋建新龙在云张冲黄苏娜王正国; 关键词：上皮细胞碱烧伤 Β-连环蛋白角膜缘

小鼠XBP1基因RNA干扰慢病毒载体的构建及筛选被引量：2: 2009年; 目的:构建小鼠XBP1基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体,筛选具有较好干扰效率的小鼠XBP1 siRNA靶序列。方法:针对小鼠XBP1基因特异性序列,设计4个RNAi靶序列及1个阴性对照序列,合成含有正义和反义OligoDNA的互补DNA序列,退火形成双链DNA,并克隆到经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切后的pGCL-GFP载体连接产生短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,DNA测序鉴定。由病毒包装系统进行包装,经滴度测定后感染NIH3T3细胞,应用Real-timePCR鉴定干扰效率。结果:PCR鉴定与DNA测序证实合成的寡核苷酸链插入正确,293T细胞测定病毒滴度为1×108TU/ml。Real-timePCR证实XBP1-siRNA-3靶点的干扰效率最高,其干扰效率达到95%以上。结论:成功构建并筛选了小鼠XBP1基因RNAi慢病毒载体,为研究XBP1在巨噬细胞免疫功能调控中的作用奠定了基础。; 钟河江蒋建新王海燕杨策张冲严军刘庆黄苏娜; 关键词：RNA干扰慢病毒

珊瑚姜油对耐药菌的抑菌抗感染及急性毒性试验研究: 目的通过对珊瑚姜油对临床常见耐药菌杀抑作用及其急性毒性作用的研究,为珊瑚姜油的开发应用提供科学的实验数据和药理学依据,为临床控制和治疗耐药菌感染提供更安全敏感的'纯天然植物药物'。方法应用纸片法药敏实验,检测珊瑚姜油杀抑...; 周琳琳王海燕杨策张冲刘庆黄苏娜程英蒋建新

皮质酮诱导小鼠腹腔巨噬细胞发生内质网应激的作用被引量：2: 2009年; 目的:观察内源性糖皮质激素皮质酮对小鼠腹腔巨噬细胞内质网应激相关蛋白GRP78、XBP1-S及ATF6蛋白表达水平的影响,并探讨皮质酮诱导小鼠腹腔巨噬细胞内质网应激的作用。方法:分离成年雄性C57/BL6小鼠腹腔巨噬细胞,随机分为四组,分别以终浓度为0、10、50及1000ng/ml皮质酮处理小鼠腹腔巨噬细胞,时间为1h,提取细胞总蛋白,应用Westernblotting方法检测内质网分子伴侣GRP78蛋白及未折叠蛋白反应信号转导通路转录因子XBP1-S和ATF6蛋白质表达变化。结果:低浓度皮质酮(10、50ng/ml)处理小鼠腹腔巨噬细胞1h后,均可显著地增加内质网分子伴侣GRP78蛋白表达,以50ng/ml皮质酮组增加最明显,而当皮质酮浓度达1000ng/ml时,GRP78蛋白增加不显著。并且,低浓度皮质酮(10、50ng/ml)可显著增强未折叠蛋白反应两个重要转录因子XBP1-S和p50ATF6蛋白表达。结论:这些结果表明低浓度内源性糖皮质激素皮质酮可诱发小鼠腹腔巨噬细胞发生内质网应激,激活未折叠蛋白质反应信号转导通路,其可能与巨噬细胞免疫功能增强有关。; 钟河江蒋建新王海燕杨策张冲严军刘庆黄苏娜; 关键词：皮质酮巨噬细胞内质网应激

成人鼻腔鼻窦横纹肌肉瘤1例被引量：1: 2011年; 鼻腔鼻窦横纹肌肉瘤（rhabdomyosarcoma,RMS）比较少见,而发生于成人者则更为罕见。RMS恶性程度高,预后差,正确的诊断和恰当的治疗对提高患者生成率十分关键。RMS不具有特异性症状和体征,临床上诊断比较困难[1]。影像学检查,如CT和MRI,能准确显示病变的位置及其侵犯的范围,对于鼻腔鼻窦RMS的诊断具有较大价值。本院收治1例成人鼻腔鼻窦RMS,结合文献进行分析,报告如下。; 张冲王毅张伟国; 关键词：鼻腔鼻窦横纹肌肉瘤磁共振成像

皮质酮诱导小鼠腹腔巨噬细胞发生内质网应激的作用: 目的观察不同浓度皮质酮对小鼠腹腔巨噬细胞内质网应激相关蛋白——糖调节蛋白78(Glucose-regulated protein-78,GRP78)、X盒结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP...; 钟河江蒋建新王海燕杨策张冲严军刘庆黄苏娜

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张冲