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遗传性耳聋的修饰基因被引量：2: 2001年; 同一种疾病等位基因上另一位点的遗传型不同可引起个体间的表达差异 ,人们把这一部位称之为修饰基因。近几年来 ,人们对耳聋基因修饰基因的功能进行了一系列的研究 ,从而加深了对听觉发生的认识 ,并会在将来给耳聋提供合理的治疗方案。; 常青; 关键词：毛细胞遗传异质性

常染色体隐性非综合征性听力减退: 2001年; 已知所有的常染色体隐性非综合征耳聋 (ARNSHL)基因可致重度或极重度学语前耳聋。现在已知的 2 5个 ARNSHL基因多通过对单一的有血缘关系的家系分析而定位。 6个 ARNSHL基因已被克隆且翻译出很多蛋白质 ,包括离子通道 ,胞外基质 ,细胞骨架机构及突触囊泡传递必须的蛋白质。已知 1个 ARNSHL基因可致全世界约 5 0 %的重度或极重度的遗传性耳聋 ,另外 2个 ARNSHL基因可致综合征性或非综合征性耳聋。随着其它ARNSHL基因的确定及功能阐明 ,我们会在分子水平上加深对听力生理的理解。; 常青; 关键词：基因定位

豚鼠耳蜗部分外支持细胞的分离法: 2004年; 目的 :探讨豚鼠耳蜗部分外支持细胞 (Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞 )的分离方法 ,并建立细胞活性的鉴别标准。方法 :选取健康杂色豚鼠 5只 ,解剖出耳蜗基底膜 ,采用酶解加机械吹打法分离Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞。结果 :可以获得较多数量、活性良好、长短不一的Deiter细胞和Hensen细胞 ,8h内细胞活性较好 ;但外柱细胞数量较少 ,存活时间较短。评价Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞的活性标准 :①细胞膜无膨胀或扭曲 ;②细胞核无肿胀、移位 ;③在相差显微镜下细胞呈半透明状态 ,存在双折射现象 ;④细胞内无呈布朗运动的颗粒。结论 :熟悉耳蜗的解剖特性、分离出完整的基底膜 ,增加酶的浓度和加大机械吹打力度是获取活性良好的Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞的关键 ;评价外毛细胞活性的 4项标准同样可用于判断Deiter细胞。; 常青龚树生丁娟唐明Hescheler J; 关键词：耳蜗细胞分离

利诺吡啶对豚鼠耳蜗外毛细胞和支持细胞钾电流的影响被引量：1: 2003年; 目的　观察KCNQ家族钾通道特异性阻滞剂利诺吡啶 (linopirdine)对豚鼠耳蜗单离外毛细胞和Deiters细胞 (支持细胞 )总钾电流的影响 ,初步探讨KCNQ家族钾通道在耳蜗外毛细胞和Deiters细胞的分布。方法　运用膜片钳技术 ,在全细胞模式下记录正常细胞外液中 8个外毛细胞和5个Deiters细胞的总钾电流 ,并观察 10 0 μmol/L利诺吡啶对外毛细胞和Deiters细胞总钾电流的影响。结果　在正常细胞外液中 ,单离外毛细胞可记录到四乙基二乙胺敏感的外向性钾电流和静息膜电位附近激活的内向性钾电流 (theK+ currentactivatedatnegativepotential,IKn)两种钾电流 ,而单离Deiters细胞中只记录到外向整流性钾电流。加入 10 0 μmol/L利诺吡啶后 ,外毛细胞中的四乙基二乙胺敏感的钾电流减小 ,IKn被完全抑制 ;而Deiters细胞中的外向整流性钾电流大小无变化。结论KCNQ家族钾通道存在于豚鼠耳蜗外毛细胞 ,其介导的钾电流是四乙基二乙胺敏感的钾电流的组成部分 ,并构成全部的IKn;但KCNQ家族钾通道不存在于豚鼠耳蜗Deiters细胞。; 常青龚树生丁娟唐明Jürgen Hescheler; 关键词：耳蜗毛细胞钾离子通道膜片钳技术

胞外钙对豚鼠耳蜗Deiters细胞钾电流的调制: 2005年; 为观察胞外钙对豚鼠耳蜗单个离体Deiters细胞钾电流的调控作用并探讨其机制,实验记录了:Deiters细胞在正常细胞外液和无钙外液中的全细胞钾电流(whole cell K+ currents,Ik),并分析了其电生理学特性的改变。结果观察到,Deiters 细胞与在正常细胞外液中相比,在祛除细胞外液中的Ca2+后,IK电流幅值明显增加,弦电导值亦明显增加,但其平衡电位未明显改变。在无钙外液中,Ik电流的反转电位向超极化方向明显移位,更接近于按照Nernst方程得出的K+理论平衡电位;而且其稳态激活曲线亦向超极化方向明显移位,但其激活趋势与正常相比无明显改变。此外,观察了Deiters细胞中钙抑制性钾电流的电流-电压关系和电导-电压关系,发现两者均呈“S”形,提示此钙抑制性钾电流可能存在2种不同的钾电导成分。由此,推测可能有两种机制参与胞外钙对Deiters细胞钾电流的调控:(1)Deiters细胞中的IK通道可能存在一个Ca2+敏感结构域,胞外Ca2+可能通过改变此结构域而对IK电流产生调制;(2)Deiters细胞中可能存在一种新型的双相门控性钾通道或钾通道耦联型受体或是一种新型的钾通道亚型,祛除胞外Ca2+可激活此新型钾电导而对IK电流产生调制。由此推测,在听觉形成过程中,胞外钙浓度下降可以对Deiters细胞的全细胞钾电流产生调制,从而更有利于Deiters细胞内K+外流,进而有效地缓冲外毛细胞周围的K+浓度;而且还可以使Deiters细胞产生更快的复极化并有利于维持其静息状态。; 常青龚树生丁娟唐明JürgenHescheler; 关键词：耳蜗调制

P2嘌呤受体在内耳中的分布特性和功能被引量：3: 2005年; 在听觉系统中,外源性三磷酸腺苷(ATP)除作为耳蜗活性物质外,还可作为神经递质或调质,参与Corti器内感觉毛细胞及支持细胞的各种生理功能,从而产生一系列效应,调节耳蜗听觉生理功能;ATP的这种作用主要是通过P2嘌呤受体介导的信号传导完成的,现就P2嘌呤受体在内耳的分布特点及介导的信号传导在耳蜗听功能中的生物学作用作一综述。; 常青龚树生; 关键词：内耳 CORTI器听觉系统支持细胞受体介导听功能

IP和SP在自发性高血压大鼠耳蜗中的表达与意义被引量：1: 2004年; 目的　通过研究两种神经肽VIP(血管活性肠肽 )、SP(P物质 )在自发性高血压大鼠耳蜗中的表达 ,探讨VIP、SP在高血压性内耳疾病中的作用。方法　采用免疫组织化学SABC法 ,观察VIP、SP在自发性高血压大鼠耳蜗中的表达 ,并利用图象分析系统测量阳性表达区域平均光密度值 ,进行定量分析。结果　基底转螺旋神经节细胞数目高血压组明显少于正常组 (P <0 0 1) .螺旋神经节细胞胞浆中和血管纹处均有VIP和SP表达。在螺旋神经节细胞胞浆中 ,VIP和SP的含量两组间差异无显著性意义 (P >0 0 5 ) ;在血管纹中 ,VIP的表达高血压组高于正常组 (P <0 0 5 ) ,而SP的含量差异无显著性意义(P >0 0 5 )。结论　VIP和SP都是听觉传导通路的神经递质 ,而且VIP还参与耳蜗微循环的神经体液调节。; 丁娟龚树生常青; 关键词：耳蜗自发性高血压血管活性肠肽 SP 神经肽

新型钾通道KCNQ4在内耳的分布及功能: 2001年; ＫＣＮＱ４能够编码一种新型的钾通道，分布于内耳和听觉的中枢传导通道，突变可致ＤＦＮＡ２型耳聋。ＫＣＮＱ４通道电流是一种慢性激活的延迟钾电流，ＫＣＮＱ４的分子结构已经很清楚。本文重点从ＫＣＮＱ４的分子结构、钾通道的性质介绍其在内耳的功能。; 常青; 关键词：内耳钾通道老年性耳聋

利诺吡啶对豚鼠耳蜗外毛细胞和Deiters细胞钾电流的抑制(英文): 2004年; 为探讨KCNQ家族钾通道在耳蜗外毛细胞和Deiters细胞的功能性表达,我们观察并记录了 KCNQ家族钾通道阻滞剂利诺吡啶对豚鼠耳蜗单离外毛细胞(outer hair cells,OHCs)和Deiters细胞总钾电流的影响。采用酶孵育加机械分离法分离豚鼠耳蜗单个OHCs和Deiters细胞:运用膜片钳技术,在全细胞模式下记录正常细胞外液中8个外毛细胞和5个Deiters细胞的总钾电流,并观察100μmol/L和200μmol/L利诺吡啶对外毛细胞和Deiters细胞总钾电流的影响。结果观察到,在正常细胞外液中的单离外毛细胞,可记录到四乙基二乙胺敏感的外向性钾电流和静息膜电位附近激活的内向性钾电流(the K+ current activated at negativepotential,IKn)两种钾电流,而在单离Deiters细胞中只记录到外向整流性钾电流。在细胞外液中,加入100μmol/L利诺吡啶后,OHCs中的四乙基二乙胺敏感的钾电流峰电流成分被抑制,稳态电流幅值减小,且电流的失活时间常数明显延长;在细胞外液中加入100μmol/L和200μmol/L利诺吡啶后,OHCs的内向性钾电流IKn被完全抑制;而细胞外液中利诺吡啶终浓度为200μmol/L时,Deiters细胞的外向整流性钾电流幅值无明显变化。由此我们推测,KCNQ家族钾通道存在于豚鼠耳蜗外毛细胞,其介导的钾电流是四乙基二乙胺敏感的钾电流的组成部分。; 龚树生常青丁娟; 关键词：KCNQ 钾通道外毛细胞膜片钳技术

喉癌组织中环氧化酶-2(COX-2)基因表达的实时定量PCR研究(英文)被引量：3: 2006年; 目的:测定环氧化酶-2(COX-2)mRNA在喉鳞癌组织中的含量,并分析环氧化酶-2(COX-2)mRNA与喉鳞癌临床分期及组织分化程度的关系。方法:用序列特异性引物和荧光染料SYBRgreenⅠ聚合酶链式反应(PCR)方法,检测30例原发性喉鳞癌和癌旁组织中COX-2mRNA表达,采用GAPDH作对照。结果:30份标本的扩增产物经熔解曲线分析及DNA琼脂糖凝胶电泳,证实均为COX-2和GAPDH。COX-2mRNA在喉鳞癌中的阳性率是100%,而在癌旁级织为40%(30例中12例阳性),NCOX分别为16.54±13.27、9.24±6.91,两者之间差异显著(P<0.05),且喉癌组织中的COX-2mRNA表达水平与喉癌组织分化程度及临床分期密切相关。结论:应用荧光染料SYBRgreenⅠ的实时定量PCR技术能够对COX-2基因表达水平进行定量分析,COX-2基因表达的上调与喉癌的发生有关,且可以作为一种有效的喉癌分子标志。; 龚树生丁娟常青; 关键词：环氧化酶-2 喉肿瘤基因表达

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常青

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