岳磊
- 作品数:55 被引量:67H指数:4
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金:云南省重点新产品开发计划云南省科技计划项目云南省应用基础研究计划面上项目更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学理学更多>>
- EV-A71灭活疫苗长期稳定性考察及结果分析被引量:4
- 2017年
- 目的考察肠道病毒A组71型(EV-A71)灭活疫苗的长期稳定性。方法对中国医学科学院医学生物学研究所生产的,在2~8℃条件下保存54个月的Ⅲ期临床样品,进行全面检定以分析各质量指标的变化;用原倍疫苗样品以0、28d两剂腹腔免疫6~8周龄的Balb/c小鼠,检测其血清抗体效价,进行疫苗效力单位(EU)测定;用2倍系列稀释法稀释疫苗,取不同稀释度样品免疫6~8周龄的Balb/c小鼠,检测其血清抗体效价,进行半数有效量ED50测定。结果该样品在2~8℃保存54个月,所有指标均在质量标准的合格要求范围内,仅pH值7.4接近标准上限;抗原含量为180 U/ml,与原检测值相比,下降仅9.1%;半数有效量(ED50)为6.29U,与原检测结果4.90U保持了良好一致;疫苗初次免疫小鼠后28d抗体阳转率为100%,中和抗体效价为1∶16~1∶256,GMT值为1∶52,EU值为6.5;加强免疫后第7天,中和抗体效价为1∶1 024~1∶4 096,几何平均滴度GMT大幅度上升至1∶1 552.1,其EU值为194.0;疫苗样品稀释至45 U/ml的抗原量,仍能使免疫小鼠产生100%的抗体阳转,且GMT值达1∶27.9。结论 EV-A71灭活疫苗于2~8℃条件下保存54个月,其质量指标无明显变化。
- 何鑫谢天宏洪超李华宋霞罗芳宇王微岳磊杨婷熊增平谢忠平
- 关键词:疫苗免疫原性手足口病
- 一种稳定表达人源KREMEN1受体的Vero细胞及其应用
- 本发明提供了一种稳定表达人源KREMEN1受体的Vero细胞及其应用,本发明使用慢病毒技术,在非洲绿猴肾细胞(Vero)中过表达人KREMEN1基因,构建了稳定表达人源KREMEN1(hKREMEN1)受体的新型Vero...
- 岳磊谢忠平李华谢天宏杨婷向虹王杰高微捷严敏
- CA16疫苗候选株特异性免疫血清保护性的初步评价被引量:1
- 2016年
- 目的评价CA16 K168/8疫苗候选株免疫血清对不同CA16毒株的交叉中和能力及对致乳鼠麻痹CA16临床分离株的体内中和保护能力。方法将CA16 K168/8疫苗候选株病毒纯化液辅以弗氏佐剂经背部及侧腹部皮下多点注射免疫新西兰大白兔,制备高效价免疫血清。采用微量细胞病变法检测中和抗体效价;用中和抗体效价终浓度为32 U的特异性免疫血清对18株不同CA16临床分离毒株及15株EV71毒株进行交叉中和指数检测;选取中和抗体效价为16、32、64、128、256 U的特异性免疫血清对可致乳鼠产生明显麻痹作用的CA16 FY-18株进行体内中和保护水平检测。结果获得的兔抗CA16 K168/8血清对14株CA16毒株的中和效价为1∶1 024~1∶6 144,GMT值为1∶3 153;可于体外完全中和18株不同CA16毒株,中和指数为100~5 623.4,平均值为794.1,而对15株EV71临床分离株中和指数仅为0.32~5.62,平均值为2.2;体内中和保护水平随抗体效价升高而增加,呈量-效关系,当中和抗体效价达128 U时,可完全保护乳鼠不发生临床麻痹反应。结论 CA16 K168/8疫苗候选株特异性免疫血清体内、外试验结果表明其具有良好的免疫保护性。
- 谢忠平李华杨水芝谢天宏杨婷刘正玲岳磊宋霞
- 关键词:柯萨奇病毒A组16型免疫血清
- 一株可适用于人用疫苗细胞基质培养的柯萨奇病毒A组10型疫苗株及其应用
- 本发明提供了一株可适用于人用疫苗细胞基质培养的柯萨奇病毒A组10型疫苗株及其应用,属于生物制品技术领域。本发明基于全病毒疫苗的开发策略,获得一株YNKG1‑7病毒株可适应到人用疫苗细胞基质Vero上,并且具备良好的遗传稳...
- 谢忠平杨婷高微捷赵红岳磊李华谢天宏
- 肠道病毒71型多克隆抗体F(ab’)2片段的制备及其体外中和效果评价被引量:2
- 2016年
- 目的制备肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)多克隆抗体F(ab’)2片段,并评价其体外中和效果。方法采用硫酸铵分级沉淀法从EV71感染的兔血清中提取Ig G,用胃蛋白酶进行酶解,正交试验确定最佳酶解条件;使用阴离子交换层析(Q Sepharose Fast Flow)纯化得到F(ab’)2片段,采用体外中和试验检测其对EV71的中和效果。结果硫酸铵分级沉淀法得到电泳纯的Ig G;最佳酶解条件为:胃蛋白酶与Ig G按1∶10的质量比混合,47℃反应4 h,在此条件下,F(ab’)2的产率最大值为79.51%,且方差分析表明,酶切比例对F(ab’)2产率的影响最大,温度次之,时间对F(ab’)2产率的影响不明显;经阴离子交换层析纯化,可有效去除Fc片段,得到电泳纯的F(ab’)2;F(ab’)2具有与Ig G、正常血清同等的中和效果。结论成功制备了EV71兔多克隆抗体F(ab’)2片段,初步确定该F(ab’)2片段具有良好的体外中和效果。
- 岳磊朱凡丽李华杨婷谢天宏龙润乡杨蓉罗芳宇谢忠平
- 关键词:肠道病毒71型多克隆抗体正交试验
- 嗜吞噬细胞无形体表面蛋白P44研究进展被引量:1
- 2020年
- P44是嗜吞噬细胞无形体p44/msp2基因家族编码的膜表面含量最多、研究最广泛的蛋白。其作为一个穿孔蛋白广泛参与病原体感染早期的黏附、入侵、免疫逃逸及新陈代谢等多种复杂生理活动,与嗜吞噬细胞无形体的致病机制密切相关,已成为当下研究的热点分子。本文就该蛋白分子的主要生理功能、分子生物学特性等方面对其进行全面阐述。
- 张秋宇王峰孙乐陈施华岳磊严敏
- 关键词:免疫逃逸
- 柯萨奇病毒A6临床分离株生物学特性分析被引量:5
- 2019年
- 目的柯萨奇病毒A6(coxsackievirus A6,CVA6)是手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)的病原体之一,本研究对多株CVA6临床分离株进行生物学特性分析,为疫苗株的筛选及后续的疫苗研发提供参考。方法从云南省21份HFMD病例的咽拭子及粪便标本中分离并鉴定CVA6毒株,并对病毒的生长特性、蚀斑形态以及对乳鼠的致病性等生物学特性进行分析。结果共分离出5株CVA6病毒,分别为CVA6-129、CVA6-113、CVA6-57、CVA6-94和CVA6-162,均属于D3亚型。CVA6-129病毒株能在Vero和KMB17细胞上稳定增殖,该毒株在感染后30 h即可达到增殖高峰,其在KMB17细胞上感染性滴度可达7.54 lgCCID50/ml。CVA6-129病毒株在Vero和KMB17细胞上形成的蚀斑形态不同,在Vero细胞上蚀斑较小,呈圆形,边缘清晰,而在KMB17细胞上蚀斑较大,不规则,边缘较模糊。乳鼠经肌肉、腹腔注射对CVA6病毒敏感,发病乳鼠主要临床症状为活动力下降、后肢麻痹瘫痪、双后肢麻痹瘫痪等,严重者出现死亡。结论本研究从多个HFMD疑似病例临床样本中分离到5株CVA6病毒,其中CVA6-129病毒株表现出作为疫苗候选株的潜力。
- 何鑫杨婷李华岳磊宋霞谢天宏高微捷谢忠平
- 关键词:手足口病生物学特性
- CV-A16疫苗候选株 K168-8Ac 低温连续传代效果的评价
- 2019年
- 目的通过对柯萨奇A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)K168-8Ac毒株低温连续传代后的生长稳定性和免疫原性进行评价,为柯萨奇A组16型减毒疫苗的研究提供指导。方法用本科室筛选的CV-A16疫苗候选株K168-8Ac在KMB17细胞上32℃连续传代到第80代(P80),从中选取8个代次的病毒P35、P40、P50、P60、P64、P66、P69、P80,分别进行感染性滴度检测,然后用这8个代次的病毒原液分别免疫BALB/c小鼠,初次免疫后60 d进行加强免疫,于初次免疫后28 d、60 d及加强免疫后7 d、21 d进行采血;同时选取第80代的病毒进行10倍系列稀释至10^(-7),分别用原液和10倍系列稀释的8个稀释度的病毒(即7.75 lgCCID_(50)/ml~1.75 lgCCID_(50)/ml)免疫BALB/c小鼠,初次免疫后第28天进行加强免疫,于初次免疫后28 d、加强免疫后7 d、加强免疫后21 d采血,用体外微量细胞病变法进行中和抗体效价检测。结果 K168-8Ac毒株在32℃条件下在KMB17细胞上连续传代后,8个代次的病毒均有较高的感染性滴度,感染性滴度在7.37 lgCCID_(50)/ml~7.75 lgCCID_(50)/ml间波动(平均为7.56 lgCCID_(50)/ml),表明其增殖特性较稳定。8个代次的病毒免疫小鼠后抗体效价及抗体阳转率之间差异均无统计学意义,初次免疫28 d(一次免疫)中和抗体效价GMT仅为1∶27.1(1∶11~1∶64),但初次免疫60 d时GMT比初次免疫28 d增长了2.0倍,达到1∶54.3;加强免疫后7 d、21 d GMT为1∶422.0和1∶1 140.0,分别比初次免疫28 d增长了15.6倍及42.1倍。用P80的病毒以7.75 lgCCID_(50)~1.75 lgCCID_(50)的剂量免疫小鼠,其中和抗体效价随感染剂量的降低而降低;初次免疫后第28天,7.75 lgCCID_(50)及6.75 lgCCID_(50)两个病毒剂量的中和抗体效价GMT分别为1∶32及1∶14,而5.75 lgCCID_(50)以下的剂量全部阴性;加强免疫后7 d及21 d,病毒含量低至4.75 lgCCID_(50)的GMT仍能达到1∶11,但低于3.75 lgCCID_(50)则为阴性,加强免疫后7 d及21 d,平均中和效价均小�
- 谢天宏宋霞杨婷李华龙润乡岳磊张也何鑫王正鑫谢忠平
- 关键词:柯萨奇病毒A组16型疫苗感染性滴度
- 病毒通过Rubicon抑制自噬晚期或干扰素的产生实现固有免疫逃逸的研究进展
- 2025年
- 固有免疫反应是宿主抵御病毒感染的第一道防线。通过自噬靶向降解病原微生物,协同模式识别受体诱导干扰素(IFN)产生,是机体抵御病毒感染的重要途径。Rubicon,一种Run结构域Beclin 1相互作用和富含半胱氨酸结构域蛋白,对自噬和IFN产生具有抑制效应。一方面,Rubicon作为磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)复合体的一种结合成分,通过不同的结构域分别与液泡蛋白分选34(Vps34)、紫外线辐射耐受相关基因(UVRAG)、小鸟苷三磷酸(GTP)激酶和RAS癌基因家族成员7(Rab7)相互作用,介导自噬成熟抑制;另一方面,Rubicon抑制核因子κB关键调节因子(NEMO)的泛素化和干扰素调节因子3(IRF3)的二聚化,进而阻断IFN产生相关的信号转导。研究发现卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)、乙型肝炎病毒(HBV)、仙台病毒(SeV)、丙型肝炎病毒(HCV)等多种病毒,通过调节Rubicon的表达或功能实现固有免疫逃逸,Rubicon有望成为抗病毒治疗的新靶点。
- 宿俊玮袁瑾王峰李珺岳磊严敏
- 关键词:病毒RUBICON自噬
- 一种利用毛细管电泳技术自动化批量检测mRNA加帽率的方法
- 本发明提供了一种利用毛细管电泳技术自动化批量检测mRNA加帽率的方法,属于生物检测技术领域。将根据待测mRNA的5’UTR区序列设计的杂交探针与待测mRNA杂交得到杂合序列,对杂合序列进行酶解、纯化和高温变性解离,得到探...
- 向虹洪超 陈昶旭 田原谢忠平廖国阳谢天宏 高羽岳磊李华戴永娟 余娜