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中华稻蝗谷胱甘肽S-转移酶的分离纯化被引量：3: 2011年; 采用硫酸铵沉淀法和GSH-agarose亲和层析法,对中华稻蝗Oxya chinensis(Thunberg)5龄若虫谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferases,GSTs)进行了分离纯化。结果表明:经硫酸铵沉淀,饱和度在60%～80%下沉淀中GSTs比活力较高,饱和度90%时比活力达到最高,为0.3046μmol/min/mg protein,纯化倍数为1.82。进一步经GSH-agarose亲和层析纯化后,比活力最高达到8.5185μmol/min/mg protein,纯化倍数为50.88。经SDS-PAGE电泳检测,呈现单一的条带,亚基的分子量约为25.4ku。此组分的纯化成功为进一步研究中华稻蝗谷胱甘肽S-转移酶的酶学性质、结构特点和作用原理提供了基础资料。; 郭艳琼吴海花宣涛张建珍郭亚平马恩波; 关键词：谷胱甘肽硫转移酶中华稻蝗纯化

蝗虫肠道微生物总DNA提取方法的比较被引量：3: 2009年; 采用Bead beating法和QIAamp DNA stool mini kit法提取蝗虫肠道微生物总DNA,并对2种方法提取DNA的得率、完整性以及16SrRNA基因扩增产物的变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)图谱等进行综合比较。结果表明,Bead beating法提取DNA的得率显著高于QIAamp DNA stool mini kit法(P=0.042),而QIAamp DNA stool mini kit法提取DNA片段更完整。PCR-DGGE检测微生物多样性结果显示,QIAamp DNA stool mini kit法提取DNA所代表的微生物群落多样性略高于Bead beating法,但Mann-Whitley统计学检验表明用2种方法检测蝗虫肠道微生物多样性无显著差异(P=0.17)。因此在蝗虫肠道微生物群落多样性的检测中QIAamp DNA stool mini kit法具一定的优势,而Bead beating法同样适用。; 龙文敏严二平宣涛魏华庞小燕赵立平马恩波; 关键词：蝗虫肠道微生物 DNA提取 PCR-DGGE

东亚飞蝗谷胱甘肽S-转移酶分离纯化被引量：6: 2009年; 通过硫酸铵沉淀技术和GSH-agarose亲和层析对东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis(Meyen)5龄若虫谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferases,GSTs)进行了分离纯化。结果表明GSTs活性在硫酸铵各沉淀段均有分布,但在55%～100%沉淀段活性较高,在硫酸铵饱和度为85%时比活力最高,达到420.33μmol/min/mg protein,纯化倍数为18.86。根据硫酸铵粗沉淀谷胱甘肽S-转移酶结果,选择硫酸铵浓度为60%～90%沉淀段进行GSH-agarose亲和层析,纯化后比活力最高达到1365.29μmol/min/mg protein,纯化倍数达到61.25。经SDS-PAGE鉴定,得到的GST为1条带,亚基的分子量约为24kDa。; 宣涛吴海花郭亚平田怀东马恩波; 关键词：东亚飞蝗谷胱甘肽S-转移酶纯化

中华稻蝗AFLP反应体系的建立与优化被引量：5: 2007年; 以中华稻蝗为研究材料,提取到高质量的总DNA。通过优化酶切连接、预扩增、选择性扩增等实验条件,确定了AFLP银染技术方法,从而建立了中华稻蝗AFLP分子标记研究体系,得到了清晰的AFLP指纹图谱,为探讨稻蝗种间遗传学关系提供了新的技术手段。; 郑先云宣涛龙文敏郭亚平马恩波; 关键词：AFLP 分子标记 PCR 中华稻蝗

东亚飞蝗谷胱甘肽s-转移酶基因克隆、基因表达及蛋白纯化: 东亚飞蝗是洲际性的农业害虫，其为害严重。近年来我国蝗虫发生逐年加重，特别是由于北方地区持续高温干旱，蝗虫孳生环境变化，蝗灾发生面积扩大，暴发频率提高，对我国农业生产构成严重威胁。我国目前控制蝗虫为害的手段主要是采用化学药...; 宣涛; 关键词：东亚飞蝗农业害虫谷胱甘肽S-转移酶基因克隆抗药性

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宣涛