孙文超
- 作品数：107 被引量：248H指数：9
- 供职机构：温州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学水利工程更多>>
- 寨卡病毒E蛋白亚单位疫苗复合型佐剂的筛选
- 2021年
- 为了筛选能够增强亚单位疫苗免疫效果的复合型免疫佐剂,试验以前期筛选的ZJ01和ZJ02佐剂为基础,分别与免疫增强剂A、B、C、D混匀制备复合型免疫佐剂,与表达寨卡病毒(ZIKV)E蛋白的亚单位疫苗混匀后免疫Balb/c小鼠,检测免疫后小鼠IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b抗体水平,ZIKV E蛋白特异性抗体和中和抗体水平及淋巴细胞增殖效果,以验证复合型佐剂的免疫增强效果。结果表明:免疫后第35天,ZJ01和ZJ02试验组含有A组分和D组分的血清中IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、特异性抗体及中和抗体等抗体水平多数显著或极显著高于E蛋白对照组(P<0.05或P<0.01、P<0.001、P<0.0001),其中IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b抗体水平是E蛋白对照组的1.74~3.35倍;特异性抗体水平是E蛋白对照组的1.43~1.60倍;中和抗体水平是E蛋白对照组的1.33~1.75倍;T淋巴细胞增殖水平是E蛋白对照组的1.30~1.36倍。说明含有A组分和D组分的ZJ01与ZJ02复合型佐剂能更好地增强亚单位疫苗的免疫效果。
- 曹亮高越汪伟孙文超鲁会军陈爽方芳金宁一田明尧
- 关键词：E蛋白亚单位疫苗免疫增强
- PRRSV与PCV2的分子流行病学调查及其重组腺病毒疫苗实验免疫研究
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)已经成为中国流行比较严重的猪病之一，特别是2006年爆发的高致病性PRRSV，给养猪业造成了巨大的经济损失。目前国内PRRSV流行毒株仍以美洲型为主，但在2011年以后随着欧洲型毒株在...
- 孙文超
- 欧洲型PRRSV、PCV2二联重组痘苗病毒疫苗的猪实验免疫研究
- 研究背景:猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respi...
- 韩继成任静强孙文超靖杰肖朋朋郭海宁陈兴鲁会军金宁一
- 关键词：免疫研究
- 文献传递
- 猪乳头瘤病毒荧光定量PCR检测方法的建立
- 2023年
- 为建立可以快速检测猪乳头瘤病毒(SsPV)的方法,根据SsPV E2基因的保守序列设计引物,利用普通PCR方法扩增SsPV E2保守基因片段,将其克隆到pMD18-T载体,构建重组质粒pMD18-T-SsPV作为标准品质粒,经实时荧光定量PCR(qPCR)条件优化后,进行特异性、灵敏性和重复性试验。结果显示,所建立的qPCR方法在7.2×10^(1)~7.2×10^(8)copies/μL模板浓度区间内与Ct值呈现良好的线性关系,检测下限为7.2×100copies/μL,灵敏度比普通PCR高100倍;与猪德尔塔冠状病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪捷申病病毒、猪圆环病毒2型、猪圆环病毒4型无交叉反应;该方法组内变异系数和组间变异系数均小于2.0%;对44份猪皮肤组织样品进行检测,检测阳性率为2.27%,普通PCR检测阳性率为0%。综上所述,本试验成功建立了SsPV qPCR检测方法,为SsPV的快速检测提供了可靠方法。
- 张昕宇李玉莹雷晓哓赵宸辰黄海鑫汪伟郑敏孙文超兰添
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗猪免疫试验效果评价被引量：2
- 2016年
- 目的评价欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18猪体免疫效果。方法用鉴定正确的重组腺病毒进行猪免疫试验,通过淋巴细胞亚群检测、细胞因子检测和免疫组化检测分析其免疫效果。结果猪淋巴细胞亚群检测显示重组腺病毒pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18刺激CD4+和CD8+表达量在21d、35d、49d分别为PBS组的1.53、1.84、1.90倍和1.41、1.76、1.53倍,差异有统计学意义(P<0.05);ELISA检测pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18免疫猪血清IL-4和IFN-γ水平在14d时的表达量分别是PBS组的1.45和1.46倍(P<0.05),而在35d时分别是PBS组的1.81和1.79倍(P<0.05)。免疫组化检测免疫猪肺、肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴组织病毒量相对于野毒组和PBS组显著减少。结论重组腺病毒pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18疫苗,具有良好的免疫原性,能提高猪细胞免疫和体液免疫水平。
- 解长占曹亮孙文超张萍韩继成郭海宁肖朋朋温树波崔卓栋南福龙马海彬赵冠宇张赫庄忻雨张金勇鲁会军金宁一
- 关键词：重组腺病毒疫苗
- 乙型脑炎病毒可视化分型基因芯片的制备被引量：2
- 2014年
- 目的:制备乙型脑炎病毒(JEV)可视化分型基因芯片。方法:根据JEV的基因组序列,应用生物学软件设计JEV分型引物及探针,制备其可视化分型基因芯片;用生物素标记的引物PCR扩增目的片段,并与固定于玻片上的探针杂交,加入链霉亲和素标记的纳米金,银增强实现可视化;进行特异性、灵敏性及重复性试验。结果:探针特异地与相应的标记目的基因片段杂交,并在芯片上呈现较强的阳性杂交信号;2号探针能特异性检出JEV,3、4号探针可分别对Ⅰ型和Ⅲ型JEV进行分型;芯片对JEV质粒检测的灵敏度达105拷贝/mL;以蓝耳病病毒等5种病毒为对照,芯片只对JEV响应,具有特异性;制备的基因芯片具有批间、批内重复性。结论:制备的基因芯片具有高特异性、灵敏性及重复性,可以快速、准确、高通量地对JEV进行可视化分型检测。
- 薛斐辛舒田宇飞孙文超温树波阎富龙盛媛王茂鹏朱羿龙田明尧金宁一
- 关键词：乙型脑炎病毒基因型基因芯片可视化
- 基孔肯亚病毒和辛德毕斯病毒可视化检测基因芯片研究
- 研究背景:基孔肯雅病毒(Chikungunya Virus,CHIKV)和辛德毕斯病毒(Sindbis Virus,SINV)是甲病毒属单链RNA病毒,经蚊虫传播,在世界范围内广泛分布,有致病快,传播迅速等特点,其流行严...
- 薛斐田明尧辛舒曹佳嫒孙文超金宁一
- 关键词：基孔肯亚病毒辛德毕斯病毒可视化
- 流感病毒PR8F的拯救及其对BALB／c小鼠的致病力被引量：1
- 2017年
- 为了研究H1N1流感病毒对BALB/c小鼠的致病相关分子机制、传播机制以及开发新型疫苗,将本实验室保存的A/PR/8/34株的8个质粒参照Paulina构建的流感病毒8质粒突变系统做定点突变,利用反向遗传操作技术,成功拯救出H1N1流感病毒突变株PR8F。将PR8F株以106 TCID50/100μL的剂量滴鼻感染BALB/c小鼠,观察小鼠临床表现及体质量变化。解剖攻毒后不同时间小鼠并观察体内主要脏器的病理特征,提取各脏器RNA,通过实时荧光定量PCR方法,检测PR8F株在小鼠体内不同脏器中的病毒残留量和在BALB/c小鼠肺脏中的扩增效率。结果表明,H1N1流感病毒突变株PR8F感染小鼠4~7d后全部致死;PR8F株在小鼠体内各脏器中的病毒残留量有很大差异,肺脏中最多,且病毒在肺脏内呈指数形式扩增。本试验建立了H1N1流感病毒PR8F株对BALB/c小鼠的感染模型,为H1N1流感病毒致病机制和传播机制的研究奠定基础。
- 崔卓栋柴丹溫树波解长占孙文超张萍韩继成曹亮田明尧金宁一
- 关键词：定点突变病毒拯救实时荧光定量PCR
- 犬圆环病毒全基因组克隆与序列分析被引量：12
- 2016年
- 犬圆环病毒(Dog circovirus,DogCV)是近年来新发现的一种哺乳动物圆环病毒。为研究DogCV中国流行毒株基因组特性和遗传进化,以犬血清样品提取的DNA为模板,采用重叠PCR技术首次获得DogCV中国流行毒株的全基因组序列,命名为JZ98/2014。序列分析表明JZ98/2014全基因组长度为2063nt,编码3个主要开放阅读框:ORF V1(Rep蛋白,303个氨基酸)、ORF C1(Cap蛋白,270个氨基酸)和ORF C2(106个氨基酸)。同源性比较显示JZ98/2014与美国、欧洲流行毒株的全基因组序列同源性为82.1%-89.5%,而Rep和Cap基因同源性分别为82.1%-89.5%和84.6%-89.1%。遗传进化树分析显示,目前世界流行的DogCV存在多个分支,而JZ98/2014与美国、欧洲流行毒株处于不同分支。
- 孙文超曹慧慧郑敏徐素萍张红云韦显凯苏姣秀何杰勇
- 关键词：基因进化分析
- 猪圆环病毒3型与猪圆环病毒2型二重PCR检测方法的建立被引量：7
- 2019年
- 为建立同时检测PCV3和PCV2的二重PCR方法,分别以PCV3和PCV2基因组的保守区域设计2对特异性引物,片段大小分别为649,295 bp。将反应条件进行优化,构建PCV3和PCV2的二重PCR检测方法。检测结果表明该方法能特异性扩增PCV3和PCV2,且无法扩增其他猪常见病毒;PCV3和PCV2的最低检出限分别为508,412 copies/μL。临床样品检测结果显示,PCV3和PCV2阳性率分别为2.1%(3/145),62.1%(90/145),PCR产物经测序证实为PCV3。本研究建立的二重PCR方法具有速度快、特异性强和灵敏度等优点,可以用于PCV3和PCV2的检测和流行病学调查。
- 孙文超汪伟赵翠青赵海洋刘立明孟娟王茂鹏王茂鹏曹亮曹亮夏秀秀孙迪菲宋璟子郑敏郑敏金宁一
- 关键词：PCV2
