夏海萍
- 作品数：24 被引量：15H指数：2
- 供职机构：南京军区南京总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 两种不同量子点标记用于抗核抗体检测的对比研究与评价
- 目的以两种不同粒径量子点(QDs)为标记,采用IIFA对血清样本进行ANA检测和细胞成像研究,探索其在临床试验检测中的应用效果。方法以Hep-2细胞为实验基质,两种不同发射荧光波长量子点(QD655和QD605)为标记分...
- 虞伟张晶白彩琴夏海萍李晓军武建国
- 量子点标记链酶亲合素-生物素系统用于抗核抗体检测的对比研究与评价被引量：1
- 2015年
- 目的对比研究不同颜色量子点(QDs)标记链霉亲合素(SA)-生物素系统在抗核抗体(ANA)间接免疫荧光实验(IIFA)检测中的效果,评价其在临床样本检测中的应用价值。方法 Hep-2细胞为抗原片,分别以QD655-SA、QD605-SA、QD565-SA结合生物素化羊抗人Ig G(生物素化二抗),用IIFA检测临床样本血清ANA,以异硫氰酸荧光素(FITC)标记二抗(FITC-二抗)为对照。比较和评价3种QDs-SA的应用效果。结果对114例患者血清研究发现,QD655-SA、QD605-SA、QD565-SA结合生物素二抗检测可见与FITC-二抗检测ANA结果相同或类似的荧光模式,阳性结果符合率均为100%,平均抗体滴度均高于FITC-二抗标记检测结果(P<0.01)。尤其对核仁型、核均质型与核点型ANA荧光模式检测效果优于FITC-二抗结果。相关分析结果显示:QD655-SA、QD605-SA、QD565-SA与FITC-二抗标记ANA定性结果高度一致(Kappa=0.979),滴度均呈高度正相关(P均<0.01)。结论 QDs-SA用于IIFA法检测ANA总体结果稳定、灵敏、可行,可获得较FITC-二抗检测更加敏感和稳定的实验结果。
- 张晶虞伟夏海萍李晓军张宇顾宁
- 关键词：抗核抗体
- 胶原诱导关节炎模型小鼠CCP抗原特异性T细胞的量子点标记检测及其与CCP特异性淋巴细胞增殖的关系
- 2014年
- 目的建立基于量子点(quantum dots,QDs)标记环瓜氨酸肽(CCP)抗原特异性T细胞(CCP-AST)的流式细胞分析术(FCM),研究胶原诱导关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠CCP-AST的阳性率及其与CCP抗原特异性淋巴细胞增殖的关系。方法构建CIA小鼠模型,用QDs标记链霉亲合素(QD705-SA)结合生物素化的CCP对CCP-AST(CD4+CD8-CCP-TCR+)进行体外标记与FCM检测,同时将CCP与小鼠脾单个核细胞(MSMC)进行共培养,并对其增殖刺激指数(SI)、CCP-AST阳性率及其他参数做相关分析。结果成功建立检测QDs标记CCP-AST的FCM术,发现CIA组小鼠CCP-AST阳性率[中位数(第25分位数,第75分位数)]为0.575%(0.475%,1.185%),显著高于PD2B对照肽的0.165%(0.113%,0.240%)和健康组小鼠的0.085%(0.000%,0.205%),差异均有统计学意义(P均<0.01)。CIA组小鼠经CCP刺激,MSMC出现明显的增殖反应,SI值为4.710,高于健康组小鼠CCP刺激的SI值0.860,差异有统计学意义(P<0.01)。相关性分析显示,CIA组小鼠CCP-AST阳性率与CCP刺激MSMC的SI值呈显著正相关关系(r=0.734,P<0.05),与关节炎症指数之间亦呈正相关(r=0.611,P<0.05)。结论 QD705-SA结合生物素化的CCP,可实现对CCP-AST的有效标记和FCM检测,CIA组小鼠CCP-AST阳性率与CCP抗原刺激的特异性淋巴细胞增殖结果显著相关,并与CIA小鼠关节肿胀和炎症程度关系密切。
- 张敏杰张晶夏海萍刘国瑞严孝岭虞伟李晓军
- 关键词：量子点环瓜氨酸肽抗原特异性T细胞
- 胶原诱导性关节炎大鼠两种抗原短肽特异性自身免疫反应的实验研究
- 建立大鼠模型,观察抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体及Ⅱ型胶原短肽(CⅡ260-272)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠淋巴细胞激活作用的影响,同时对CIA大鼠血清中相关自身抗体进行检测,探讨CIA大鼠在成模过程中特异性自身免疫...
- 虞伟白彩琴夏海萍张晶王凯李晓军武建国
- 液态芯片技术分析RA患者血清免疫复合物对滑膜细胞分泌细胞因子的影响被引量：1
- 2011年
- 目的用液态芯片技术研究类风湿关节炎(RA)患者血清免疫复合物(IC)对关节成纤维样滑膜细胞(FLS)分泌细胞因子的影响。方法用聚乙二醇(PEG)沉淀法分别提取10份抗环瓜氨酸肽抗体(ACCP)阳性的RA患者及健康人对照血清IC,间接ELISA法测定IC中ACCP特异性IC水平。体外培养RA患者关节FLS,分别用RA患者ACCP-IC阳性IC(ACCP+-IC)、ACCP-IC阴性IC(ACCP--IC)及健康人对照血清IC(C-IC)刺激FLS,培养24 h后,用液态芯片技术检测不同来源IC刺激对FLS分泌IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-15、IL-17、TNF-α、GM-CSF、EGF、VEGF等11种细胞因子水平的影响。结果 10份RA患者血清中提取的IC,包括ACCP+-IC 6份和ACCP--IC 4份,刺激FLS 24 h后,可诱导细胞分泌大量IL-6、IL-8和GM-CSF;其中ACCP+-IC组刺激FLS分泌GM-CSF和IL-8水平均显著高于ACCP--IC组。3组刺激物组刺激分泌IL-1β、IL-2、IL-10、IL-15、IL-17、TNF-α、EGF、VEGF等其他8种细胞因子含量均无显著性差异。结论 ACCP+-IC具备更强的促FLS分泌GM-CSF、IL-6和IL-8的活性。
- 高德玉王凯刘阳夏海萍严孝岭虞伟李晓军
- 关键词：类风湿关节炎细胞因子免疫复合物抗环瓜氨酸肽抗体
- 人软骨糖蛋白-39对CIA大鼠淋巴细胞体外增殖作用的研究
- 背景类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节滑膜为主要靶器官的慢性系统性炎症性的自身免疫性疾病,而其发病机制尚不明确。。人软骨糖蛋白-39(human cartilageglycopro...
- 夏海萍白彩琴张晶虞伟李晓军王凯高德玉武建国
- 文献传递
- Ⅱ型胶原短肽对胶原诱导性关节炎大鼠淋巴细胞体外增殖作用的研究
- 白彩琴夏海萍虞伟张晶李晓军武建国
- Ⅱ型胶原短肽对胶原诱导性关节炎大鼠淋巴细胞体外增殖作用的研究被引量：2
- 2011年
- 目的观察Ⅱ型胶原短肽（CⅡ260—272）对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠T淋巴细胞激活的影响。探讨其在类风湿关节炎（RA）发病中的作用。方法建立CIA大鼠模型，分别在建模1、2…8周后，体外分离、培养大鼠脾淋巴细胞，采用活细胞计数（CCK-8）法检测C1I260—272短肽对淋巴细胞增殖反应的影响，并分析CⅡ短肽特异性T淋巴细胞增殖反应与滑膜炎及血管翳评分、成模时间及抗CⅡ及其短肽抗体之间的相关性。用SPSS17．0软件进行数据分析。滑膜炎和血管翳评分结果比较用单因素方差分析，方差齐用LSD法，方差不齐用Games—Howell法；2组间增殖水平比较用Mann—WhitneyU检验；细胞增殖与其他指标的关系用Spearman相关分析；2组间抗体水平比较用t检验。结果免疫3周后，C11短肽特异性T细胞即出现明显的增殖反应[0．963（0．332-1．628）]，与0周组大鼠10．332（0．331N0．357）]比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；分析发现，T细胞增殖反应与成模时间及抗bcⅡ抗体、抗Cit—bCⅡ抗体水平均呈正相关（r分别为：0．624，0．413，0．575，P均〈0．01）。免疫2周后模型组大鼠中抗CⅡ260—270抗体（0．827±0．155）与0周（0．043±0．009）比较，差异有统计学意义（P〈0．01），免疫4周后抗bcⅡ抗体（0．362±0．062）、抗cit—bcⅡ抗体（0．390±0．141）与0周相比，均有显著升高（P〈0．01）；同时，这3种抗体水平与血管翳评分也有显著相关性（P〈0．01或P〈0．05）。结论CⅡ短肽在建模早期即可刺激CIA大鼠脾淋巴细胞异常增殖，并在血清中检出针对CⅡ短肽的抗体反应。提示在利用CⅡ分子诱发CIA疾病发生过程中，该表位肽在驱动T、B淋巴细胞活化及引起自身免疫反应中发挥了重要作用。
- 白彩琴夏海萍虞伟张晶王凯李晓军武建国
- 关键词：关节炎T淋巴细胞
- 人软骨糖蛋白-39对CIA大鼠淋巴细胞体外增殖作用的研究
- 2011年
- 目的观察人软骨糖蛋白-39（HCgp39）对胶原诱导型关节炎（CIA）大鼠淋巴细胞激活的影响，探讨其在类风湿关节炎（RA）发病中的作用。方法建立CIA大鼠模型，分别在建模1、2、3、4、5、6、7、8周后，分离、培养大鼠脾淋巴细胞，CCK-8法检测HCgp39对淋巴细胞增殖的影响，ELISA法检测血浆中抗HCgp39抗体及COMP的分泌水平，分析指标之间相关性。结果建模2周后，HCgp39抗原特异性T细胞与对照组比较出现明显增殖反应（P均〈0．01），与建模时间、抗HCgp39抗体水平显著正相关，与血管翳和滑膜炎症评分显著负相关。各组抗HCgp39抗体水平和COMP水平较对照组显著增高（P均〈0．01），且抗HCgp39抗体水平与建模时间及COMP呈显著正相关。结论HCgp39可刺激CIA大鼠脾淋巴细胞的体外异常增殖，初步提示nCgp39抗原短肽在CIA早期及后续的发病过程中可能起着一定作用。
- 夏海萍张晶白彩琴虞伟李晓军武建国
- 关键词：增殖反应
- 环瓜氨酸肽对胶原诱导型关节炎大鼠淋巴细胞体外增殖作用的研究
- 背景类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以慢性破坏性关节病变为主的全身性自身免疫病。胶原诱导型关节炎(CIA)的发生过程、临床表现及免疫病理改变等均与RA有诸多相似之处,需要有特定的MHC...
- 白彩琴张晶夏海萍虞伟李晓军武建国
- 文献传递
