和君
- 作品数：8 被引量：12H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室更多>>
- 发文基金：国家肉鸡产业技术体系建设专项广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- H9亚型AIV型特异性电化学发光免疫检测方法的建立被引量：6
- 2015年
- 【目的】H9亚型禽流感是重要的人兽共患性传染病,该亚型病毒为H7N9亚型和H10N8亚型流感病毒提供了6个内部基因(PB2、PB1、PA、NP、M、NS),并且一直处于动态重组过程中。因此,建立针对H9亚型禽流感的型特异性电化学发光免疫的高通量快速检测方法,加强H9亚型流感的监测,具有重要意义。【方法】用钌联吡啶标记H9亚型AIV的单克隆抗体,用MPI-E型电致化学发光分析系统评价钌标单抗标记效率;用生物素标记H9亚型AIV的多克隆抗体,HABA法检测抗体生物素化的效率;待测抗原与钌标单抗作用1 h后,将此抗原-抗体复合物与通过生物素-链霉亲和素系统固定在磁微球表面的多克隆抗体反应,最后加入反应底物三丙胺后即可在电化学分析系统进行发光检测。优化生物素化多抗和钌标单抗最佳工作浓度,确定临界值和反应谱,对所建立的方法进行敏感性、特异性和重复性试验。攻毒后3 d和5 d,采集攻毒组和空白对照组鸡只的88份咽拭子和肛拭子,分别用电化学发光免疫检测方法和鸡胚病毒分离法进行检测和比较。【结果】钌标抗H9亚型AIV单克隆抗体的标记效率为每个单抗Ig G分子上结合21个Ru2+,且间接免疫荧光方法证明其仍具有生物活性;生物素化兔抗H9N2亚型AIV多克隆抗体的标记效率为每个Ig G分子上结合了6个生物素分子,且Western blotting试验证明其仍保持生物活性;该方法的检测临界值为28.3,可疑区间为23.4—33.2;阴性和阳性变异系数均小于10%;检测限为5×104EID50,能够特异性地检测H9亚型AIV,不与其他亚型流感病毒(H1、H3、H4、H5和H6亚型)和其他类型的禽源病毒(NDV、IBV和IBDV)反应。3 h内即可完成检测,与鸡胚病毒分离法的符合率为86.4%。【结论】所建立的H9亚型AIV型特异性电化学发光免疫检测方法可以用于临床样品检测,对H9亚型禽流感的监测和防控具有重要意义。
- 亓文宝李芳李华楠黄丽红和君穆光慧罗开健廖明
- 关键词：H9亚型禽流感
- 一株H9N2亚型禽流感病毒全基因组分析被引量：1
- 2012年
- 为了研究H9N2亚型AIV A/Chicken/Guangdong/333/2008的全基因组序列变异情况,试验利用RT-PCR方法扩增出该病毒的8个基因序列,并应用DNAStar和MEGA4.0软件分析所得基因序列。结果表明:该病毒HA基因的第226位氨基酸由Q(Gln)变为了L(Leu),其NP基因与Viet Nam/1203/2004(H5N1)的NP基因同源率最高。说明该病毒已具备了感染哺乳动物的分子特征,并可能在遗传演化过程中突变为高致病性的禽流感病毒(AIV)。
- 胡玥谭淑娴和君李小康李芳焦培荣亓文宝廖明
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型基因组系统发生分析
- 三株H9N2亚型禽流感病毒的全基因组遗传演化分析
- 目的：本研究旨在从分子水平探讨华南地区H9N2亚型禽流感病毒的演化和变异规律。方法：采用RT-PCR方法对三株H9N2亚型禽流感病毒全基因分别进行了扩增，然后进行序列测定与分析。结果：结果表明，各个基因片段均含有相应病毒...
- 刘国乾曹蓝和君焦培荣亓文宝廖明
- 关键词：禽流感病毒全基因组基因变异
- 用反向遗传操作技术产生具有鸡胚高度适应性的H1N1亚型重组猪流感病毒
- 反向遗传操作技术是近几年发展起来的新的方法学,为相关研究开阔了视野,具有良好的应用前景。利用8质粒流感反向遗传系统将流行病毒株主要的保护性抗原HA和NA基因与鸡胚高度适应的毒株的6个内部基因进行重配,以这种6+2的方式能...
- 亓文宝李小康和君齐岩樊惠英焦培荣廖明
- 文献传递
- H9N2亚型AIV在小鼠中致病性增强的分子与免疫机制
- H9N2亚型AIV在全世界范围内广泛流行,给养禽业造成了巨大的经济损失。而且部分毒株已获得了感染哺乳动物和人类的能力,对人类健康造成巨大威胁。1材料与方法筛选出对BALB/c小鼠具有强毒力的H9N2亚型AIV Ck/GD...
- 亓文宝田进李小康和君张长辉焦培荣廖明
- 文献传递
- 三株H9N2亚型禽流感病毒全基因组序列分析被引量：5
- 2012年
- 采用RT-PCR对3株H9N2亚型禽流感病毒基因组进行扩增,测序后再利用DNAStar和MEGA 4对所得到的序列和部分具有代表性的参考序列进行遗传演化及分子特点分析,旨在从分子水平探讨华南地区H9N2亚型禽流感病毒的流行特点,为该病的综合防控提供依据。结果表明,3个分离株CK/GD/162/03、Francolin/GD/298/05与CK/GD/A8/10分别属于B34、B47和B54基因型;3个分离株HA基因未发生明显的变异,符合我国大陆H9N2亚型AIV HA基因的遗传进化特点,但内部基因出现不同程度重组且部分基因与人源高致病性H5N1亚型AIV同源性很高;CK/GD/162/03、Francolin/GD/298/05两株分离株具有宿主多样性。因此,对华南地区H9N2亚型AIV进行监控及分子流行病学调查具有重要意义。
- 刘国乾曹蓝和君冯军祥张长辉田进焦培荣亓文宝廖明
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型基因重组
- 石蒜石物碱化合物对流感病毒抗病毒活性的研究
- 禽流感病毒是正粘病毒科，单股负链的RNA病毒。近年来，禽流感陆续在我国禽类和野鸟中暴发，给养禽业造成了惨重的损失。一些高致病性禽流感病毒，尤其是H5N1禽流感病毒有时感染人类并可以致死、人感染H5N1禽流感病毒的事件持续...
- 和君
- 关键词：流感病毒MDCK细胞抗病毒活性
- 用反向遗传操作技术产生具有鸡胚高度适应性的H1N1亚型重组猪流感病毒
- 亓文宝李小康和君齐岩樊惠英焦培荣廖明
