周伯如
- 作品数：15 被引量：57H指数：7
- 供职机构：南京中医药大学第一临床医学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 中药干预女性促性腺激素分泌水平及相关调节机制的研究进展被引量：2
- 2017年
- 有研究表明,下丘脑—垂体—卵巢（hypothalamuspituitary-ovarian,HPO）轴是控制调节女性正常生殖内分泌功能的核心。绝大多数女性生殖内分泌疾病并非由卵巢或子宫单一器官功能异常所致,而与HPO轴整体功能的不协调相关。
- 周伯如高影茜周惠芳
- 关键词：促性腺激素分泌水平女性中药干预生殖内分泌功能生殖内分泌疾病
- 补肾助孕方对大鼠垂体细胞促性腺激素的调节被引量：7
- 2018年
- 目的目前黄体功能不全的机制尚不明确,文中观察补肾助孕方含药血清对大鼠垂体细胞促性腺激素(FSH)和促黄体生成激素(LH)分泌功能的影响,探讨补肾助孕方干预垂体分泌促性腺激素的作用机制。方法用补肾助孕方水煎剂给雌性SD大鼠灌胃,制备补肾助孕方含药血清。采用CCK-8法检测注射用醋酸西曲瑞克、含药血清和垂体促性腺激素释放激素(GnRH)对细胞活性的影响。在最大无毒浓度的条件下,采用注射用醋酸西曲瑞克阻滞垂体细胞GnRH受体,用RPC细胞建立受体拮抗模型(模型组),另建立空白组(正常细胞)、西曲瑞克组(仅单纯注射醋酸西曲瑞克作用6 h)、补肾助孕方组(仅加含补肾助孕药血清作用24 h)。使用20 nmol/L GnRH刺激细胞6 h,检测各组细胞上清液中FSH和LH含量,以及FSHβ与LHβ、GnRHR的mRNA表达。结果与空白组比较,西曲瑞克组细胞上清FSH降低[(3.91±0.36)m IU/m L vs(2.26±0.22)m IU/m L,P<0.05]、LH降低[(8.94±0.57)m IU/m L vs(3.35±0.59)m IU/m L,P<0.05],补肾助孕方组细胞上清LH显著升高[(8.94±0.57)m IU/m L vs(10.79±0.60)m IU/m L,P<0.05];与西曲瑞克组相比,补肾助孕方组与模型组细胞上清FSH、LH水平均明显升高(P<0.05)。与空白组比较,西曲瑞克组FSH mRNA显著降低[(0.95±0.23)vs(0.58±0.12),P<0.01]、LH mRNA显著降低[(0.98±0.14)vs(0.27±0.21),P<0.01],GnRHR mRNA表达升高[(0.97±0.13)vs(1.77±0.26),P<0.01];补肾助孕方组FSH mRNA、LH mRNA升高(P<0.05)。与西曲瑞克组比较,补肾助孕方组、模型组FSHβmRNA、LHβmRNA表达均升高(P<0.05),而GnRHR mRNA表达降低(P<0.01)。结论补肾助孕方能显著提高大鼠垂体细胞GnRH受体拮抗模型的FSH、LH分泌水平,降低异常升高的GnRH受体的mRNA及蛋白水平。补肾助孕方可改善GnRH受体表达功能。
- 刘贝周惠芳周伯如蒋小飞徐建亚谢彤单进军
- 关键词：垂体细胞含药血清
- 补肾助孕方对黄体功能不全模型大鼠血清PRL、E_2及P的影响被引量：8
- 2017年
- 目的研究补肾助孕方对黄体功能不全(LPD)模型大鼠血清催乳素(PRL)、雌二醇(E_2)、孕激素(P)的影响。方法米非司酮构建LPD大鼠模型,将50只大鼠分为空白组、模型组、孕酮组,以及中药低、高剂量组共5组,每组10只,分组给药,以ELISA试剂盒测定各组大鼠血清中PRL、E_2及P水平。结果模型组、孕酮组的PRL、E_2明显高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05),中药低、高剂量组PRL、E_2明显低于模型组和孕酮组,差异有统计学意义(P<0.05),各组P均有升高,但组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾助孕方药可降低LPD模型大鼠过高的PRL、E_2水平,升高P水平,从而改善黄体功能,提高子宫内膜容受性。
- 戴佳轩杨丽娟周伯如周惠芳
- 关键词：黄体功能不全催乳素雌二醇孕酮
- 补肾助孕方对黄体功能不全大鼠促性腺激素及其关键调控因子的影响被引量：11
- 2016年
- 目的黄体功能不全的机制目前尚不明确,文中通过观察补肾助孕方对大鼠下丘脑-垂体的影响,探究其中潜在的作用机制。方法将50只雌性育龄SD大鼠随机分为空白组、模型组、孕酮组、补肾助孕方低剂量组、补肾助孕方高剂量共5组,除空白组等渗盐水灌胃外,各组采用米非司酮灌胃构建黄体功能不全模型,孕酮组、补肾助孕方低剂量组、补肾助孕方高剂量组在此基础上分别采用地屈孕酮(1 m L/100 g)与补肾助孕方药(0.4、1.2 m L/100 g)进行干预。完成给药流程后,检测大鼠血清促卵泡生成素(follicle-stimulating hormone,FSH)、促黄体生成素(luteotropic hormone,LH)含量;观察大鼠垂体前叶FSHβ、LHβ的mRNA水平以及上游促性腺激素释放激素受体(gonadotropin-releasing hormone receptor,GnRHR)与垂体GTH细胞中环磷腺苷效应元件结合(c AMP responsive element-binding,CREB)蛋白的转录与蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠血清FSH降低、LH升高(P<0.05);与模型组FSH水平[(9.01±0.94)ng/m L]相比,孕酮组与补肾助孕方高剂量组[(10.44±0.87)、(10.55±1.31)ng/m L]升高(P<0.05),与模型组血清LH水平[(10.94±0.79)ng/m L]相比,孕酮组、补肾助孕方低剂量组、高剂量组[(9.15±0.36)、(9.72±0.25)、(9.48±0.42)ng/m L]降低(P<0.01)。与空白组比较,模型组、补肾助孕方低剂量组FSHβmRNA降低(P<0.05),模型组LHβmRNA和CREBmRNA升高、GnRHRmRNA降低(P<0.01)。与模型组相比,补肾助孕方高剂量组FSHβmRNA升高(P<0.05),孕酮组和补肾助孕方低、高剂量组LHβmRNA降低(P<0.05),孕酮组和补肾助孕方低剂量组GnRHRmRNA升高(P<0.05),补肾助孕方低、高剂量组CREBmRNA升高(P<0.05)。与模型组相比,空白组、孕酮组与补肾助孕方低剂量组GnRHR蛋白、CREB蛋白表达升高,补肾助孕方高剂量组仅CREB蛋白表达升高(P<0.05)。结论补肾助孕方可有效调节LPD大鼠黄体中期垂体促性腺激素分泌,其机制可�
- 周伯如戴佳轩杨丽娟周惠芳
- 关键词：黄体功能不全下丘脑-垂体-卵巢轴
- 补肾助孕方调节生殖轴促进胚胎着床的机制探讨
- 综合中西医生殖轴的相关理论，周惠芳教授课题组提出补肾助孕方治疗LPD性不孕症的作用机制假说：补肾助孕方并非单纯作用于卵巢或子宫单一器官，亦可能直接作用于HPO轴的垂体部位，通过调控GnRHR表达或GnRH受体后PKC-M...
- 戴佳轩周伯如周惠芳
- 关键词：不孕生殖轴胚胎着床
- 文献传递
- 补肾助孕方药对大鼠子宫内膜细胞MMP-9mRNA、Caspase-3mRNA及细胞上清液MMP-9,TIMP-1水平表达的影响被引量：10
- 2014年
- 目的探讨补肾助孕方药对大鼠分泌期子宫内膜细胞MMP-9mRNA、Caspase-3mRNA的表达及细胞上清液中分泌MMP-9,TIMP-1含量的影响。方法取未成年SD雌鼠分泌期子宫内膜细胞体外培养,加药干预48h后,采用QPCR法检测补肾助孕方药高、低剂量含药血清及多组对照用药干预,对子宫内膜细胞MMP-9mRNA、caspase-3mRNA的表达,同时采用放免法检测细胞上清液MMP-9,TIMP-1的含量。结果 1补肾助孕方药高剂量组显著提高子宫内膜细胞MMP-9mRNA表达,联合雌二醇后,中药高、低剂量组对MMP-9mRNA表达有协同提高作用(P<0.05);补肾助孕方药高剂量组对米非司酮干预后表达下调的子宫内膜细胞MMP-9mRNA具有显著的提高作用(P<0.05);2补肾助孕方药高剂量组显著下调子宫内膜细胞Caspase-3mRNA表达(P<0.01);中药高、低剂量组联合雌二醇后对Caspase-3mRNA表达有协同下调作用(P<0.05,P<0.01);补肾助孕方药高、低剂量组分别对米非司酮干预后表达升高的子宫内膜细胞Caspase-3mRNA具有显著的下调作用(P<0.05,P<0.01)。3补肾助孕方药高、低剂量组显著提高子宫内膜细胞上清液MMP-9,TIMP-1水平表达(P<0.05,P<0.01),联合雌二醇后,中药高、低剂量组对MMP-9,TIMP-1表达有协同提高作用(P<0.05);补肾助孕方药高、低剂量组分别对米非司酮干预后表达降低的MMP-9水平具有显著的升高作用(P<0.05,P<0.01)。米非司酮对细胞上清液TIMP-1的表达无意义。结论补肾助孕方药提高子宫内膜细胞MMP-9mRNA的表达及细胞上清液MMP-9,TIMP-1水平,同时下调子宫内膜细胞Caspase-3mRNA的表达,降低细胞的凋亡,有利于提高子宫内膜容受性,有利于胚胎着床。
- 孙光娟蒋凤荣周伯如王健宏周惠芳
- 关键词：MMP-9TIMP-1
- 补肾助孕方调节生殖轴促进胚胎着床的机制探讨被引量：7
- 2016年
- 补肾助孕方是基于国医大师夏桂成教授提出的"心(脑)-肾-子宫轴"理论指导下形成的经验方剂。临床研究已证实,其为治疗黄体功能不全性(LPD)不孕症的有效方药,并能提高患者胚胎着床期P、LH等水平,实验结果提示其能改善卵巢黄体功能及子宫内膜容受性。基于中西医对LPD性不孕为生殖轴功能失调认识上的一致性,课题组认为补肾助孕方能够作用于垂体,提出"通过GnRH受体后信号通路调控垂体GTH表达进而调节生殖轴功能"的作用新机制假说。首次从GnRH受体后PKC-MAPK、Ca2+-CAM、c AMP-PKA信号通路,开创性地研究补肾助孕方对垂体GTH表达分泌的调控及补肾法治疗LPD的助孕新机制,为中药治疗LPD不孕症的研究提供新思路和新方法。
- 戴佳轩徐建亚谢彤蒋凤荣姜淼周伯如周惠芳
- 关键词：黄体功能不全促性腺激素GNRH受体信号通路
- SD大鼠腺垂体细胞体外分离方法的比较被引量：2
- 2017年
- 目的体外分离腺垂体制备主要包括酶消化及机械法等方法,但何种方法效果更好尚无相关报道。现比较大鼠腺垂体细胞体外分散制备的几种主流方法并对其进行促性腺激素分泌细胞鉴定,明确何种制备方法更为便捷高效。方法将48只成年雌性SD大鼠按随机数字表法分为胰酶组(0.25%胰酶EDTA液消化)、Ⅳ型胶原蛋白酶组(Ⅳ型胶原蛋白酶消化)、机械分离组(200目细胞筛研磨)及胰酶+机械分离组(0.25%胰酶EDTA液消化+200目细胞筛研磨),每组12只。评价各种方法制备细胞的效果。培养各组原代细胞,动态观察各组细胞在体外生长的情况,并利用免疫细胞化学染色技术进行鉴定。结果与机械分离组细胞活率[(90.25±0.96)%]比较,胰酶组、胰酶+机械分离组[(94.11±1.71)%、(94.92±1.92)%]均升高;与Ⅳ型胶原蛋白酶细胞活率[(93.32±1.77)%]比较,胰酶组、胰酶+机械分离组亦明显升高(P<0.05)。形态学观察:各种方法制备的腺垂体细胞均呈圆形,折光性强,边缘完整清楚。培养16~24 h候开始部分贴壁,至48~72 h绝大部分细胞贴壁,早期腺细胞仍为圆形,体积较前减小,可见少量大体积的细胞散落分布其间。培养7 d后,细胞变为多角形或梭形,并连接成片,至10 d左右,纤维化逐渐明显;免疫细胞化学染色表明FSH阳性细胞体积较大,数量少,散在分布;其阳性产物位于细胞质内,呈蓝色;酶联免疫吸附试验测定细胞上清液证实离体细胞仍有激素分泌功能。结论对比单一制备细胞方法,胰酶消化+机械分离法具有一定优势;体外培养的垂体前叶细胞生长良好,分泌功能存在,可胜任相关科学实验。
- 蒋小飞周惠芳周伯如刘贝袁艺祯单进军徐建亚谢彤
- 关键词：SD大鼠体外培养免疫化学染色
- 中药对子宫内膜容受性相关生物因子的影响被引量：2
- 2013年
- 子宫内膜容受性与胚胎种植有紧密联系,其受到众多因素影响,为数众多的生物因子是这些因素中重要部分。近年来,结合传统理论创新与现代科学研究方法,中医药在改善子宫内膜容受性方面取得成效。对中药影响子宫内膜容受性相关生物因子这一方面的研究进展进行了概述。
- 周伯如周惠芳
- 关键词：子宫内膜容受性生物因子中医药
- 补肾助孕方对LPD模型大鼠垂体GnRH受体信号转导系统的影响被引量：8
- 2017年
- 目的通过观察补肾助孕方对大鼠垂体促性腺激素及促性腺激素释放激素(GnRH)受体信号系统的影响,探究其作用机制,寻找中医心-肾-子宫轴理论的现代科学依据。方法采用米非司酮对SD雌鼠进行造模,并进行药物干预。采用ELISA法检测大鼠血清样本促黄体生成激素(LH)和促卵泡成熟激素(FSH)水平,qPCR法检测各组大鼠垂体FSHβ、LHβ基因转录水平。对大鼠垂体GnRH受体信号转导系统关键分子以及下游重要转录因子分别采用qPCR与Western blot方法检测其基因转录与蛋白表达水平。结果补肾助孕方显著提高了由米非司酮诱导的血清低FSH水平与垂体GnRH受体低表达(P<0.05),补肾助孕方组高、低剂量组中PKC、p38MAPK、JNK、ERK、PKA等关键信号转导分子以及c-Jun、Elk-1、Egr-1、CREB等转录因子的mRNA及蛋白表达均显著高于模型组(P<0.05),但CAM及其下游的Nur77在各组间均无显著差异。结论补肾助孕方能够通过调节垂体GnRH受体信号转导系统调节垂体促性腺激素的分泌水平,证明该方具有调节生殖轴整体功能的作用,阐释了中医心-肾-子宫轴理论与现代医学下丘脑-垂体-卵巢轴在内容上的一致性。
- 周伯如周惠芳刘贝朱宏坤戴佳轩徐建亚谢彤
- 关键词：黄体功能不全GNRH受体
