公共文化服务平台

吉坤美: 作品数：66 被引量：207H指数：9; 供职机构：深圳大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学文化科学更多>>

合作作者

口虾蛄原肌球蛋白基因表达及变应原性鉴定被引量：4: 2009年; 目的克隆口虾蛄原肌球蛋白(tropomyosin)基因并表达纯化出重组蛋白,研究其变应原性。方法提取口虾蛄总RNA,设计特异引物,通过反转录聚合酶链反应克隆出目的基因片段,测序后将该片段克隆到原核表达载体pET-28a上,转化到E.coliBL21(DE3)后,经异丙基-B-D-硫代乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni2+亲和层析柱对重组变应原进行纯化。采用免疫印迹(Western-blot)检测其与对虾过敏的患者血清IgE结合活性。结果经序列测定,该基因含有长度为855bp的开放阅读框,编码284个氨基酸(GenBank登录号为EF584510)。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测该重组变应原在大肠埃希菌中高效表达36kDa的目的蛋白,且重组变应原具有良好的IgE结合活性。结论本研究成功获得了具有变应原活性的重组口虾蛄原肌球蛋白。; 詹政科刘志刚吉坤美; 关键词：口虾蛄变应原原肌球蛋白克隆表达

一种化合物在制备抗过敏药物中的应用: 本发明公开了一种化合物在制备抗过敏药物中的应用，其特征在于，所述化合物的分子式为C29H27NO8，其化学结构式为：<Image file="DDA000...; 陈家杰王慧娜吉坤美; 文献传递

标准化粉尘螨变应原脱敏疫苗中主要变应原Der f 2含量测定被引量：1: 2010年; 目的研制粉尘螨Ⅱ组变应原Der f 2单克隆抗体(Monoclonal Antibody,McAb),并建立双单抗夹心ELISA检测方法 ,测定标准化粉尘螨变应原脱敏疫苗中Der f 2的含量。方法应用基因工程方法获得粉尘螨变应原Der f2重组蛋白并通过亲和层析纯化,再免疫小鼠,利用间接ELISA筛选获得McAb杂交瘤细胞株并纯化、鉴定抗体的特异性;用一株单抗包被酶标板,同时用生物素标记另一株单抗,从而建立双单抗体夹心ELISA法;并用此法测定粉尘螨变应原脱敏疫苗中Der f2的含量。结果成功地获得了一株单抗3B12与屋尘螨抗原具有交叉反应,另外一株单抗3G7与屋尘螨抗原没有交叉反应,并建立了双单抗夹心ELISA方法测定Der f2的含量,其方法的检测限为0.5ng/mL,并在6.25ng/mL-300ng/mL范围内线性良好;标准化粉尘螨变应原脱敏疫苗中Der f2的含量为100ng/10000BAU。结论成功制备了高效价抗Der f 2单抗,并建立了双抗体夹心ELISA检测方法。该方法具有很高的灵敏度,可以测定标准化粉尘螨变应原脱敏疫苗中主要变应原Der f 2含量,为临床应用奠定基础。; 吉坤美刘晓宇唐艳詹政科刘志刚; 关键词：F 单克隆抗体夹心ELISA

双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测粉尘螨2组变应原方法的建立被引量：1: 2006年; 尘螨是最常见、最主要的过敏性疾病变应原。螨体中最主要的致敏成分是1组和2组变应原（Der1、Der2）。酶联免疫吸附测定（ELISA）是检测尘螨变应原含量应用最广泛的方法．但国内定量检测尘螨变应原的方法学研究鲜见报道。本研究用重组粉尘螨2组Der f 2（rDer f 2）．制备免疫血清，建立一种以辣根过氧化物酶系统为基础的双抗体夹心ELISA，以快速检测Der f2．现报告如下。; 练玉银刘志刚吉坤美王广伟刘晓宇; 关键词：双抗体夹心酶联免疫吸附试验螨变应原粉尘螨双抗体夹心ELISA 原方

一种基因工程重组技术制备HIV融合抑制肽的方法: 本发明涉及一种基因工程重组技术制备HIV融合抑制肽的方法。通过人工合成HIV－1 gp160上第643－678位的36个氨基酸编码区相对应的基因与经突变改造的CMP－3－脱氧－D－甘露一辛酮糖酸合成酶基因3′端融合，中间...; 刘志刚吉坤美高波; 文献传递

花生主要过敏原Ara h2的克隆表达、纯化及免疫学鉴定: 2009年; 花生中的Arah2蛋白是花生的主要过敏原，本研究从花生中克隆出Arah2的基因并表达了该蛋白，该蛋白具有特异的变应原性。; 吴序栎俞静吉坤美陈家杰刘志刚; 关键词：克隆表达免疫学鉴定花生 ARA H2 纯化

抗粉尘螨主要变应原Der f1单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1: 2009年; 目的制备和鉴定鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)。方法利用重组Der f1蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通过间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞。用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行抗体纯化。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性。结果获得6株可稳定分泌鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体,其Ig亚型均为IgG1,且6株单抗均具有良好的效价。ELISA和Western-blotting分析表明,该6株单抗均能识别重组Der f1蛋白和天然的粉尘螨提取物。其中,除了484不识别屋尘螨提取物,其他均能识别。结论成功制备了6株鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体,为建立粉尘螨主要变应原Der f1检测及纯化方法奠定了基础。; 顾耀亮李佳娜陈家杰吉坤美刘志刚; 关键词：F1 粉尘螨主要变应原单克隆抗体

防治空调中尘螨的方法: 本发明涉及一种防治空调中尘螨的方法。过敏性疾病是由于吸入或接触各种变应原引起的，其中，屋尘螨和粉尘螨引起的变态反应疾病约占70％。经调查发现空调空气滤网是它们喜好的繁衍环境。本发明运用简单、实用、经济的方法抑制空调空气滤...; 刘志刚邢苗喻海琼吉坤美高波李盟练玉银包莹沈作冰; 文献传递

一种逆转肝癌细胞耐药性的药物组合物及其应用: 本发明属医药技术领域，具体涉及一种逆转肝癌细胞耐药性的药物组合物及其应用。本发明首次提供了匹莫齐特可以用于制备杀伤肝癌干细胞的抗癌药物和逆转肝癌耐药性，其效果优于传统的化疗药物如顺铂、5‑氟尿嘧啶和阿霉素等。匹莫齐特还能...; 陈家杰吉坤美蔡楠常港; 文献传递

蒿属花粉cDNA文库的构建和初步鉴定被引量：14: 2004年; 目的构建蒿属花粉cDNA表达文库。方法应用定向克隆技术将相应dscDNA片段插入λExCell/NotI/EcoRI/CIP载体的NotI和EcoRI双酶切位点间,经包装、转染宿主菌,构建成cDNA文库。检测文库库容量和重组效率,并采用PCR方法对插入片段大小进行分析。结果成功构建了一个含有5.6×105个重组子的cDNA表达文库,重组率为100%,插入片段大小平均约1.3kb。结论所建文库容量及插入片段大小适合对蒿属花粉特异性重组变应原的进一步研究。; 刘志刚吉坤美高波何毅华黄妩姣吴晓蔓; 关键词：蒿属花粉重组变应原 CDNA文库