刘雨飞
- 作品数：7 被引量：27H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- FHL2与IGFBP-7存在直接相互作用
- 2005年
- 目的:利用酵母双杂交技术筛选FHL2的相互作用蛋白,为进一步研究FHL2的功能奠定基础。方法:从卵巢文库中钓取FHL2cDNA,构建诱饵蛋白载体pAS2-1-FHL2,利用酵母双杂交筛选技术,在卵巢文库中筛选与FHL2相互作用的蛋白。将含有pACT2-候选基因的酵母菌与含有pAS2-1-FHL2的酵母菌进行交配实验,利用LacZ报告基因检测FHL2与候选蛋白之间是否存在相互作用。将FHL2和候选蛋白分别构建到pGEX-KG和pET-28a上,并纯化GST-FHL2和His-候选蛋白融合蛋白,利用GST沉淀实验进一步验证FHL2和候选蛋白的体外相互作用。结果:所获取的候选蛋白为IGFBP-7,是胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBPs)家族中的一员。交配实验表明,IGFBP-7与FHL2能特异性地相互作用,而不与空载体或BRCT1对照相互作用。GST沉淀实验进一步验证,IGFBP-7能与FHL2结合,而不与GST结合。结论:FHL2和IGFBP-7在体内及体外均可发生特异性的相互作用。
- 丁丽华焦园园刘雨飞方言周蕾王晓辉黄翠芬叶棋浓
- 关键词：FHL2相互作用酵母双杂交
- 与雌激素受体β相互作用的蛋白的分离及鉴定
- 2006年
- 目的:从乳腺文库中分离与雌激素受体β(ERβ)相互作用的蛋白质。方法:将ERβ基因克隆入酵母表达载体pGBKT7中,利用酵母双杂交筛选技术,从乳腺文库中分离与ERβ相互作用的蛋白质。结果:分离到与ERβ相互作用的蛋白质FBLN1,并进一步确定了ERβ与FBLN1作用的结构域为AF1及DBD结构域。结论:FBLN1可能参与ERβ信号途径并共同调节细胞的增殖。ERβ与FBLN1相互作用的发现为进一步研究ERβ与FBLN1在生理及病理中的作用奠定了基础。
- 刘雨飞周蕾丁丽华方言张浩黄翠芬叶棋浓
- 关键词：雌激素受体Β酵母双杂交相互作用
- 雌激素受体与Ⅰ型胶原蛋白存在相互作用被引量：1
- 2006年
- 目的:利用酵母双杂交技术筛选与雌激素受体(ER)αAF1转录激活结构域相互作用的蛋白,为乳腺癌发生、发展机制的研究奠定基础。方法:将编码ERαAF1的cDNA片段克隆到诱饵蛋白载体pGBKT7中,以构建的pGBKT7-ERα-AF1为表达靶蛋白的质粒,筛选人乳腺文库。将筛选到的含Ⅰ型胶原基因的质粒与表达ERα和ERβ不同结构域的质粒共转化酵母细胞,验证Ⅰ型胶原与ERαAF1作用的特异性。结果:经酶切鉴定,证实重组质粒pGBKT7-ERα-AF1含有目的基因片段;Western印迹证实ERαAF1在酵母中获得表达;酵母双杂交筛选得到与ERαAF1相互作用的Ⅰ型胶原蛋白。酵母细胞共转化实验证实,Ⅰ型胶原蛋白与ERα和ERβ的AF1结合,但与ERβ的DBD、AF2不结合。结论:Ⅰ型胶原与ERα和ERβ的AF1及ERβ的DBD存在相互作用。
- 周蕾刘雨飞丁丽华方言李杰之冯威健叶棋浓
- 关键词：雌激素受体酵母双杂交相互作用
- 乳腺癌耐药基因研究进展被引量：2
- 2004年
- 乳腺癌是一种常见的恶性肿瘤。多药耐药一直是困扰乳腺癌化疗和内分泌治疗的重要难题,耐药基因的发现及其功能研究对阐明乳腺癌耐药发生机制、寻找新的治疗靶标、提高疗效将有很大的帮助。对近几年来发现的耐药基因的结构和功能作一综述。
- 刘雨飞叶棋浓黄翠芬
- 关键词：乳腺癌耐药基因MDR
- 转录因子XBP1的融合表达、纯化及多克隆抗体的制备被引量：8
- 2004年
- 人X盒结合蛋白 1(XBP 1)为一种转录因子 ,与多种肿瘤的发生、发展有密切关系 .XBP 1有2种剪切形式 ,即XBP 1S和XBP 1U .将这 2种剪切形式中的一段相同编码序列 (编码 82～ 14 7位氨基酸 )重组于谷胱甘肽S转移酶 (GST)融合蛋白表达载体pGEX KG中 ,构建成重组质粒pGST XBP 1(82～ 14 7位氨基酸 ) .将该重组质粒转化E .coliDH5α后 ,表达GST XBP 1(82～ 14 7位氨基酸 )融合蛋白 ,经谷胱甘肽 Sepharose 4B亲和层析获得纯化的融合蛋白 .用此融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体 .利用制备的抗体分别用Western印迹和免疫细胞化学检测XBP 1的 2种剪切形式在哺乳动物细胞中的表达 .结果表明 ,该抗体对XBP 1的 2种剪切形式均具有反应原性 ,效价高 ,特异性好 ,可以用于进一步研究XBP
- 刘雨飞丁丽华郝春芳方言赵福弟黄翠芬杨晓叶棋浓
- 关键词：多克隆抗体
- 雌激素受体(ER)信号途径新调节分子NFAT3的研究
- 乳腺癌是中国十大恶性肿瘤之一,目前其发病率呈上升趋势。在某些大城市(如北京、上海),乳腺癌发病率已居女性恶性肿瘤首位。研究表明,过高的雌激素活性是乳腺癌发生的极其重要的原因,它通过雌激素受体(Estrogen Recep...
- 叶棋浓张浩谢向阳朱阳东朱建华郝春芳刘雨飞周蕾严景华刘亚玲文春耕黄翠芬
- 关键词：乳腺癌雌激素受体
- 文献传递
- 甲状腺乳头状癌RET、CK19、TG、Ki-67的表达被引量：16
- 2006年
- 目的研究甲状腺乳头状癌RET、CK19、TG、Ki-67蛋白表达特点及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测RET、CK19、TG、Ki-67蛋白在30例甲状腺乳头状癌、10例结节性甲状腺肿和18例癌旁正常甲状腺中的表达。结果RET、CK19在乳头状癌的阳性率(66·7%、83·3%)明显高于结节性甲状腺肿和正常甲状腺阳性率(7·1%、25·0%),两者差异有显著性(P<0·01)。乳头状癌组及良性病例组TG表达阳性率差异无显著性(P>0·05)。96·7%的乳头状癌Ki-67阳性细胞数小于10%。结论RET及CK19在甲状腺乳头状癌表达增加,具有一定的病理诊断价值。
- 王晓红刘雨飞鲍宇浓崔全才王德田
- 关键词：乳头状癌CK19RET甲状腺球蛋白KI-67
