全嘉新
- 作品数：3 被引量：19H指数：2
- 供职机构：广西大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 海南五指山苏云金芽孢杆菌的分离与对小菜蛾高毒力菌株的筛选
- 本研究系统的从海南岛五指山热带雨林区采集到433份土样，利用醋酸钠选择培养基的分离方法从中分离到1009株芽孢杆菌，其中产晶体的苏云金芽孢杆菌（简称Bt，下同）野生菌株30株，伴孢晶体类型有菱型、球型、方型、不规则型，体...
- 全嘉新
- 关键词：苏云金芽孢杆菌CRY基因生物测定小菜蛾高毒力菌株
- 文献传递
- 海南岛热带雨林区芽孢杆菌收集及Bt菌鉴定被引量：14
- 2009年
- 本研究系统地对海南岛热带雨林自然保护区进行了土壤样品的采集、芽孢杆菌的分离收集和Bt菌株的鉴定。从尖峰岭热带雨林区、五指山热带雨林区、吊罗山热带雨林区、霸王岭热带雨林区总共采集了土壤样品1882份,采用醋酸钠培养基结合高温方法分离出芽孢杆菌3924份,鉴定出Bt分离株158份,Bt菌株的分离率和出菌率分别为4.03%和8.40%。结果分析表明,海南岛热带雨林区芽孢杆菌及Bt菌株分布对环境和生态表现出一定的规律性,一般海拔900m至1400m的Bt菌株含量高、植被覆盖率高,土壤腐殖质含量高的热带沟谷雨林带Bt菌株含量最高。显微观察发现,获得的Bt菌株其伴胞晶体有菱形、球形、方形、椭球形、不定性等多种形状。利用SDS-PAGE方法对获得的Bt分离株进行了伴胞晶体进行分析,发现伴胞晶体的分子量有20kD到150kD不等。进一步利用PCR-RFLP技术对Bt分离株进行了cry基因型的分析,初步发现这些Bt菌株含有cry1、cry3、cry4、cry6、cry30、cry40等基因型。我们还利用鳞翅目昆虫小菜蛾和鞘翅目昆虫椰心叶甲进行部分Bt分离株的生物测定,初步结果显示本研究鉴定出的Bt分离株具有不同的抗虫靶标,对同一靶标昆虫也表现出不同的杀虫活性。整体而言,本研究结果显示出海南岛热带热带雨林自然保护区因其独特的热带地理生境、自然的生物演化系统,使得热带雨林区蕴藏了Bt菌株资源多样化,值得期待挖掘出一些新的菌株和新的基因资源。
- 张文飞全嘉新谢柳王茜易艳桃丰玫玫朱麟王锐萍方宣钧
- 关键词：芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌
- 广西大王岭和大明山自然保护区苏云金芽孢杆菌收集与鉴定被引量：9
- 2009年
- 从广西大王岭和大明山两个自然保护区共采集到土样264份,共分离出597株芽孢杆菌,通过光学和电子显微镜检观察,16株分离株观察到伴胞晶体蛋白,初步确定为苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt),出菌率为6.06%。在16株Bt分离株中,有4株在芽孢形成过程中能产菱形晶体蛋白,其余12株能产圆形和其他形状的晶体蛋白。利用PCR-RFLP方法和SDS-PAGE方法对16株Bt分离菌进行了蛋白和基因型的鉴定,结果表明,16株分离株中含有4株cry1Ac基因,表达约130kD的晶体蛋白,其中含有cry30基因和cry40基因的菌株分别1株和3株,表达大约75kD的晶体蛋白;另外8株Bt菌株表达蛋白大小不一,其基因型尚不能确定,有待进一步分析。生物测定表明,产菱形晶体含有cry1Ac基因的4株Bt分离株对鳞翅目小菜夜蛾幼虫有很强的毒杀活性,而其它分离株对小菜夜蛾没有毒杀活性。
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- 关键词：苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白SDS-PAGEPCR-RFLP
