余世明
- 作品数：7 被引量：20H指数：3
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CD147对体外破骨细胞分化成熟的影响被引量：6
- 2010年
- 目的建立破骨细胞(osteoclasts,OCs)体外分化成熟的模型,研究CD147对OCs分化成熟的影响。方法从外周血分离单个核细胞贴壁培养,使用破骨细胞分化因子(receptor activator of nuclear factor-κβligand,RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)诱导OCs生成。实验分为对照组、诱导组(RANKL+M-CSF)及阻断组(RANKL+M-CSF+CD147Ab),应用免疫荧光染色和流式细胞术检测CD147在破骨前体细胞(osteo-clast precursor cells,OPCs)的表达;抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察OCs的分化成熟情况及Real-time PCR技术检测CD147及TRAP mRNA在OPCs中的表达变化。结果①CD147分子在OPCs细胞膜上表达。②流式细胞术测得细胞膜表面平均荧光强度对照组(159.55±1.65)、诱导24 h组(171.18±3.46)、诱导48 h组(178.47±4.59)逐渐增强(P<0.05),而阻断24 h组(117.69±9.01)显著减弱(P<0.01)。③阻断组TRAP染色阳性细胞(细胞核≥3)数显著少于诱导组(P<0.01),且OCs体积小。④在24、48 h诱导组CD147 mRNA相对表达量[(1.393±0.248)、(1.772+0.326)]及TRAP mRNA的相对表达量[(1.810±0.398)、(2.608±0.906)]在OPCs诱导分化过程逐渐增高,均高于相应时相点阻断组(P<0.05);且TRAP mRNA相对表达量与CD147 mRNA相对表达量呈正相关(r=0.833,P<0.01)。结论 CD147分子在OPCs细胞膜上表达且参与OCs分化成熟;抑制CD147的表达,OCs出现成熟障碍。
- 廖通权刘玉刚胡旭张莹余世明初同伟周跃
- 关键词：破骨细胞CD147分化成熟
- CD147对体外破骨细胞分化过程中基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9分泌的影响被引量：3
- 2011年
- 目的建立体外破骨细胞(osteoclasts,OCs)诱导分化模型,研究CD147对体外破骨细胞分化过程中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases 2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases 9,MMP-9)合成与分泌的影响。方法采用健康成人外周血分离单个核细胞贴壁培养,应用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulatingfactor,M-CSF)与NF-κB受体活化因子配体(receptor or activator of NF-κB ligand,RANKL)诱导单个核细胞向Ocs分化。实验分为对照组(RANKL+M-CSF)与蛋白诱导组(RANKL+M-CSF+CD147蛋白)。应用抗酒石酸酸性磷酸酶染色(tar-trate-resistant acid phosphatase,TRAP)及骨吸收实验检测鉴定OCs的分化成熟,Real-time PCR技术检测CD147、MMP-2和MMP-9 mRNA在破骨前体细胞(osteoclast precursor cells,OPCs)中表达变化,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清液中MMP-2、MMP-9的表达。结果①TRAP染色和骨吸收实验检测到破骨样细胞形成并具有骨吸收功能,建立体外Ocs诱导分化模型成功。②在24、48 h蛋白诱导组CD147 mRNA[(1.344±0.207)、(1.816±0.222)]、MMP-2 mRNA[(1.187±0.077)、(1.437±0.231)]及MMP-9 mRNA[(1.128±0.107)、(2.353±0.679)]的相对表达量均高于相应的对照组(P<0.05),且MMP-2、MMP-9 mRNA的相对表达量与CD147 mRNA的表达量呈正相关(r分别为0.818、0.758,P<0.01)。③24、48 h蛋白诱导组MMP-2蛋白[(386.71±40.66)、(367.35±20.72)μg/L]、MMP-9蛋白[(1 177.78±66.42)、(1 514.37±68.56)μg/L]表达均高于相应对照组(P<0.05),蛋白诱导组MMP-2蛋白的表达在24 h与48 h间无统计学差异(t=1.190,P>0.05),而MMP-9蛋白的表达在48 h显著高于24 h(t=7.589,P<0.05)。结论外源性CD147蛋白可以促进OCs分化成熟过程中MMP-2及MMP-9的合成与分泌,但MMP-2分泌的增加不呈时间依赖性。
- 余世明初同伟廖通权胡旭刘玉刚周跃
- 关键词：CD147破骨细胞MMP-2
- 单核细胞趋化蛋白-1在恶性骨肿瘤中高表达被引量：5
- 2011年
- 目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)在人转移性骨肿瘤、恶性原发性骨肿瘤、良性骨肿瘤组织中差异性表达及其意义。方法 2008年12月至2010年9月期间,收集转移性骨肿瘤15例、原发性恶性骨肿瘤15例、良性骨肿瘤15例,总共45例骨肿瘤标本。半定量RT-PCR检测各组MCP-1 mRNA的表达水平。应用免疫组织化学S-P法检测MCP-1蛋白的表达水平、Image-Pro Plus(IPP)分析标本中阳性细胞的累积光密度值和阳性表达面积。结果转移性骨肿瘤组MCP-1 mRNA相对表达量(0.862±0.042)高于恶性原发组(0.612±0.051)和良性组(0.171±0.021)(P<0.05)。转移性骨肿瘤组织中MCP-1免疫组化累积光密度(4 532.12±190.02)和阳性面积[(513.32±89.08)μm2]均高于原发性恶性骨肿瘤组[(2 592.11±120.21)、(308.34±79.33)μm2]和良性骨肿瘤组[(551.22±79.12)、(115.91±32.68)μm2],且其在原发恶性组中的表达水平也高于良性组(P<0.05)。结论 MCP-1在恶性骨肿瘤中高表达,在转移性骨肿瘤表达更显著。
- 胡旭初同伟廖通权余世明刘玉刚周跃
- 关键词：骨肿瘤肿瘤转移逆转录聚合酶链反应免疫组织化学单核细胞趋化蛋白-1
- 血小板衍生生长因子D对体外破骨细胞分化过程的影响被引量：1
- 2013年
- 目的用外源性血小板衍生生长因子D(platelet-derived growth factor D,PDGF-D)体外刺激外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),观察其对破骨细胞(osteoclasts,OCs)分化过程的影响。方法采集外周血并分离单个核细胞,实验分为3组:阳性对照组为NF-κB配体激活因子(receptor or activator of NF-κB Ligand,RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)联合诱导,阴性对照组(细胞培养基)和实验组(PDGF-D)。应用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察各组破骨细胞前体细胞向破骨样细胞(osteo-clast like cells,OLCs)的分化情况,Real-time PCR检测破骨细胞标志基因TRAP、Cathepsin K、MMP-9mRNA的表达情况,Western blot检测各组细胞中Cathepsin K蛋白的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞上清液中MMP-9的表达。结果①TRAP染色可见阳性对照组和实验组的OLCs显著多于阴性对照组。②阳性对照组和实验组TRAP、Cathepsin K、MMP-9mRNA的相对表达量均显著高于阴性对照组(P<0.05),但阳性对照组和实验组间无统计学差异(P>0.05)。③阳性对照组和实验组MMP-9(ELISA检测)、Cathepsin K蛋白(Western blot检测)表达均显著高于阴性对照组(P<0.05),但阳性对照组和实验组间无统计学差异(P>0.05)。结论外源性PDGF-D可在无RANKL/M-CSF的条件下于体外独立诱导破骨前体细胞向OLCs分化。
- 刘栓得初同伟张超黄晨余世明周跃
- 关键词：破骨细胞
- 破骨细胞在肿瘤低氧微环境中活性的研究进展被引量：1
- 2011年
- 骨组织具有高度活性，能够通过持续的重建来修复自身的微损伤，从而保持结构、载荷和钙的内稳态平衡，骨骼系统的这种内稳态平衡是靠骨吸收和骨形成动态维持的，参与骨吸收的主要细胞是破骨细胞（osteoclast，OC）。近年有研究发现，
- 余世明初同伟
- 关键词：破骨细胞炎症低氧
- CD147抗体对破骨细胞中基质金属蛋白酶活性影响的体外研究被引量：3
- 2012年
- 目的:建立人破骨细胞(Osteoclast,OCs)体外诱导分化模型,研究CD147单克隆抗体对OCs分化过程中基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinases 9,MMP-9)和基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinases 2,MMP-2)表达及活性的影响。方法:通过采集健康成年志愿者外周血所分离的单个核细胞贴壁培养,应用NF-κB配体激活因子(Receptor or Activator ofNF-KB Ligand,RANKL)与巨噬细胞集落刺激因子(Macrophage colony stimulating factor,M-CSF)诱导单个核细胞向OCs分化。本实验分为抗体组(RANKL+M-CSF+CD147单克隆抗体)与对照组(RANKL+M-CSF)。抗酒石酸酸性磷酸酶染色(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)与骨吸收实验检测鉴定OCs分化及活性情况,Real-Time PCR技术检测CD147、MMP-9和MMP-2 mRNA在破骨前体细胞(Osteoclast precursor cells,OPCs)中表达情况,明胶酶谱法检测细胞培养上清中MMP-9、MMP-2酶蛋白的活性变化情况。结果:①对照组经TRAP染色和骨吸收实验检测到破骨样细胞形成并具有骨吸收功能,而抗体组OCs分化及活性均受到抑制;②在24、48小时时相点上抗体组CD147、MMP-2及MMP-9 mRNA的相对表达量均低于相应的对照组(P<0.05),且MMP-2、MMP-9 mRNA的相对表达量与CD147 mRNA的表达量呈正相关。③明胶酶谱检测细胞培养上清,可见在24、48小时两时相点上抗体组OCs细胞中MMP-2、MMP-9酶原及活性酶的酶解量均较相应对照组明显降低(P<0.05)。结论:CD147单克隆抗体可以抑制OCs分化成熟过程中MMP-9及MMP-2的表达与活性;CD147对MMP-2、MMP-9活性的调节,可能是其对OCs活化调节的机制之一。
- 余世明初同伟廖通权胡旭刘栓得周跃
- 关键词：破骨细胞CD147基质金属蛋白酶明胶酶谱
- CCR1参与肺癌分泌因子诱导破骨细胞生成被引量：3
- 2012年
- 目的建立肺癌细胞与单核/巨噬细胞间接共培养模型,观察在肺癌细胞条件培养基作用下抑制前体破骨细胞(RAW264.7)的CCR1对破骨细胞生成的影响。方法收集肺癌细胞A549的条件培养基,将条件培养基以不同浓度加入RAW264.7培养基中共培养,在共培养体系中加或不加CCR1特异性拮抗剂BX471。细胞培养至第5天进行TRAP染色,提取不同条件作用后RAW264.7细胞的总RNA,采用Real-time PCR检测CCR1及破骨细胞标志基因cathepsin K、TRAP mRNA的表达,使用细胞免疫荧光和Western blot检测不同时期RAW264.7细胞中CCR1及Cathepsin K蛋白的表达量。结果加入A549细胞条件培养基的RAW264.7细胞TRAP阳性细胞显著增多,条件培养基明显上调RAW264.7的CCR1、Cathepsin K、TRAP的表达且呈浓度依赖,CCR1特异性拮抗剂BX471可抑制肺癌分泌因子对破骨细胞的活化。结论肺癌细胞分泌因子可促进破骨前体细胞向破骨细胞分化,CCR1参与了肺癌细胞分泌因子对破骨细胞的活化过程。
- 黄晨余世明刘栓得张超初同伟周跃
- 关键词：肺癌骨转移破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶
