何月
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：南昌大学第四附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- XPD和PPARγ对HepG2增殖及ERG表达的影响
- 2012年
- 目的探讨人着色性干皮病基因D（xeroderma pigmentosum groupD，XPD）和PPARγ对HepG2增殖及ERG表达的影响。方法用脂质体转染法瞬时转染重组质粒pEGFP—N2／XPD和空载质粒pEGFP—N2入HepG2细胞中，转染后给予10μmol／L的GW9662（PPARγ抑制剂）孵育48h。实验分为6组：空白对照组、脂质体组、pEGFP—N2组、pEGFP—N2／XPD组、pEGFP—N2／XPD＋GW9662组及GW9662组。用RT—PCR和Western印迹检测XPD、PPARγ和ERG表达的变化：MTT法观察细胞增殖活力：流式细胞仪检测细胞凋亡。结果RT-PCR和Western印迹检测示：重组质粒pEGFP—N2／XPD的转染使得XPD表达增高（P均〈0．001）；XPD表达增高使得ERG表达降低，同时使得PPARγ表达增高，GW9662能抑制XPD这一作用。MTT结果显示：XPD表达增高抑制了细胞增殖活力，GW9662能抑制XPD降低细胞活力的作用（P均〈0．001）。流式细胞仪结果显示：pEGFP—N2／XPD组较未转染组的HepG2细胞凋亡指数明显增加，GW9662能抑制XPD这一作用（P均〈0．001）。结论XPD可通过PPARγ途径抑制肝癌细胞增殖和促进凋亡的；XPD是通过PPARγ途径下调ERG的表达。
- 何月罗文张吉翔
- 关键词：着色性干皮病基因DPPARΓ凋亡增殖
- 自噬抑制剂对乙醇诱导的肝星状细胞活化作用的影响
- 2014年
- 目的观察自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对乙醇诱导的肝星状细胞(HSC)活化作用,并探讨其作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,设立空白对照组、阳性对照组(乙醇刺激组)、低剂量组(5mmol/L 3-MA+100 mmol/L乙醇)、高剂量组(10 mmol/L 3-MA+100 mmol/L乙醇)。RT-PCR分析各组HSC活化标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原基因表达,Western blot法检测各组HSC中自噬水平标志蛋白LC3Ⅱ、α-SMA、Ⅰ型胶原表达;MTT法检测3-MA对乙醇诱导的HSC增殖的影响。结果与空白对照组比较,阳性对照组中α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达量明显增加(P<0.05),高剂量组却显著减少(P<0.01);与阳性对照组比较,低剂量组和高剂量组中α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达量逐渐减少(P<0.05);与低剂量组比较,高剂量组中α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达减少(P<0.05)。与阳性对照组比较,加入3-MA处理后的HSC增殖显著减少(P<0.05)。结论 3-MA可抑制乙醇诱导的HSC-T6细胞中LC3Ⅱ蛋白的表达、α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA及蛋白的表达,抑制HSC增殖,且高剂量的作用更明显。
- 何月贾宝辉刘曼罗文张吉翔
- 关键词：乙醇肌动蛋白类胶原I型肝星状细胞
- ALK2使内皮细胞转化为类干细胞的机制
- 2013年
- 内皮细胞向间充质细胞转分化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT)过程是血管内皮细胞转化为类干细胞的基础,持续激活状态的ALK2在EndMT过程起到关键的促进作用,EndMT发生后内皮细胞能获得类干细胞的表现型。TGF-β2和BMP4作为特异性配体激活ALK2,下调某些内皮细胞标志物并上调某些间质细胞标志物,促进EndMT过程。此外,编码ALK2的基因序列在206号氨基酸上突变形成R206H ALK2后作用类似持续激活状态ALK2,同样也能达到促进内皮细胞向间充质细胞转分化的目的。
- 罗文何月刘曼张吉翔
- 关键词：血管内皮细胞
- 自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤对肝星状细胞增殖活化的影响被引量：11
- 2013年
- 目的观察自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖活化的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,设立空白对照组和3-MA低剂量组(2.5 mmol/L)、中剂量组(5 mmol/L)、高剂量组(10 mmol/L)。RT-PCR分析不同浓度3-MA对HSC活化标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)以及Ⅰ型胶原蛋白基因表达的影响,Western blot法检测不同浓度3-MA对HSC中自噬水平标志蛋白LC3Ⅱ、α-SMA以及Ⅰ型胶原蛋白表达水平的影响;MTT法检测3-MA对HSC增殖的影响,流式细胞术分析3-MA对HSC细胞周期的影响。结果低、中、高剂量3-MA作用于HSC后,HSC-T6细胞自噬水平随3-MA浓度升高逐渐下降,α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白mRNA相对表达量均明显低于对照组(P<0.05),LC3Ⅱ、α-SMA以及Ⅰ型胶原蛋白相对表达量均明显低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,低、中、高剂量时3-MA对HSC增殖的影响均显著下降(P<0.05),G2期比例与对照组比较均明显增加(P<0.05)。结论 3-MA可下调大鼠HSC-T6细胞LC3Ⅱ的表达,抑制α-SMA及Ⅰ型胶原蛋白mRNA及蛋白的表达,使HSC-T6细胞周期停滞于G2期,抑制HSC增殖活化。
- 刘曼何月张吉翔
- 关键词：肝纤维化自噬肝星状细胞细胞增殖
- Nrf2过表达对乙醇刺激下肝星状细胞激活与增殖及合成Ⅰ型胶原的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)过表达对乙醇诱导下大鼠肝星状细胞系HSC-T6激活与增殖及I型胶原mRNA及蛋白表达水平的影响。方法:采用脂质体介导法对HSC-T6进行pEGFP-Nrf2重组质粒及pEGFP-N1空载质粒瞬时转染,将细胞分为正常对照组、乙醇刺激组、乙醇刺激+pEGFP-Nrf2质粒组和乙醇刺激+pEGFP-N1空载质粒组。采用RT-PCR及Western blotting方法对HSC-T6中Nrf2、Ⅰ型胶原及α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)mRNA及蛋白表达水平进行检测,采用MTT法对HSC-T6细胞增殖水平进行检测,采用流式细胞术对HSC-T6细胞周期分布进行检测。结果:(1)荧光显微镜下观察显示pEGFP-Nrf2质粒成功转染HSC-T6,转染后48h Nrf2 mRNA及蛋白表达水平较其余组显著升高(P<0.05)。(2)乙醇刺激组与乙醇刺激+pEGFP-N1空载质粒组之间细胞增殖水平、Ⅰ型胶原、α-SMA mRNA及蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),均明显高于正常对照组(P<0.05),细胞周期分布G1期比例下降,S期比例升高(P<0.05),而乙醇刺激+pEGFP-Nrf2质粒组细胞增殖水平及I型胶原、α-SMA mRNA及蛋白表达水平与乙醇刺激组及乙醇刺激+pEGFP-N1空载质粒组相比均显著下降(P<0.05),细胞周期分布G1期比例显著上升,S期比例显著下降(P<0.05),呈G1/S期阻滞。结论:Nrf2过表达可显著抑制乙醇对HSC-T6 Ⅰ型胶原及α-SMA mRNA及蛋白表达的促进作用,使HSC-T6细胞周期发生G1/S期阻滞,抑制乙醇诱导的HSC-T6增殖水平的升高,提示其对乙醇诱导的HSC-T6细胞活化具有负性调控作用。
- 刘曼何月张吉翔
- 关键词：肝星状细胞核因子E2相关因子2Α-平滑肌肌动蛋白
