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嗜热真菌木聚糖酶与稀酸联合水解甜菜渣生产L-阿拉伯糖的初步研究被引量：5: 2009年; 通过嗜热真菌DSM 10635固体发酵生产木聚糖酶,探讨了利用该木聚糖酶-稀酸联合水解甜菜渣生产稀少五碳糖的方法,并对水解产物进行了定量分析.研究发现:通过木聚糖酶-稀酸水解甜菜渣可得到稀少单糖,主要有阿拉伯糖、葡萄糖、木糖等.HPLC结果显示:甜菜渣的水解产物中L-阿拉伯糖含量占全部单糖含量的48.4%(质量分数).实验结果为进一步研究L-阿拉伯糖的工业生产和精制奠定了基础.; 张继泰曾小英付正熊海容; 关键词：木聚糖酶水解甜菜渣 L-阿拉伯糖

嗜热真菌木聚糖酶1YNA的表达和定点突变被引量：6: 2011年; 为了进一步提高嗜热真菌(Thermomyces lanuginosus DSM10635)本已较耐热的木聚糖酶1YNA的热稳定性。利用重叠延伸PCR技术从嗜热真菌基因组DNA中扩增获得了木聚糖酶1YNA的基因xyl,将其插入到大肠杆菌表达载体pET-22b(+)中,构建了重组表达质粒pET-22b(+)-xyl。该质粒转化到表达宿主大肠杆菌BL21(DE3)后获得了能成功表达的工程菌。工程菌表达木聚糖酶1YNA的最适温度为65℃,最适pH值为6.0。其在75℃,pH值为6.5的条件下失活处理30min后还残存有30%的酶活,与嗜热真菌生产的木聚糖酶特性相近。在对该木聚糖酶的N端氨基酸序列进行定点突变后发现,T4A、T4G、T4R均对该木聚糖酶的热稳定性无显著影响,其中T4G突变体的耐热性有变弱的趋势。; 付正张华山曾小英熊海容; 关键词：嗜热真菌重叠延伸PCR 定点突变木聚糖酶

嗜热真菌木聚糖酶1YNA及其双硫键突变体在毕赤酵母中的表达被引量：4: 2013年; 将前期已经获得的大肠杆菌表达的木聚糖酶1YNA的野生型(BL1)及定点突变后的双硫键型(C24)基因,分别克隆到表达载体pPIC9中,获得的重组质粒转入毕赤酵母GS115中,构建成功毕赤酵母工程菌并表达获得木聚糖酶野生型(TLX)及木聚糖酶双硫键型(DSB)。在对表达量和酶特性进行分析后的结果证实,2株重组毕赤酵母均能高效表达,在摇床培养水平上,野生型与突变型均表达出具有高活力的酶蛋白,表达量分别为1.75mg/ml(TLX)与1.82mg/ml(DSB),且在培养液中目标产物外的杂蛋白含量非常少。DSB显示出的热稳定性明显高于TLX。DSB的最适反应温度为75℃,TLX的最适反应温度为68℃。DSB在75℃下处理30 min分钟后仍能保留50%的残余酶活力,同等处理条件下TLX的残余酶活力则低于20%。本项实验是首次报道利用毕赤酵母表达木聚糖酶1YNA及其突变体。; 李思佳王亚伟付正汪文俊Ossi Turunen熊海容; 关键词：毕赤酵母异源表达酶特性

嗜热真菌木聚糖酶1YNA的表达、突变和酶特性研究: 木聚糖酶能将木聚糖降解为低聚木糖和少量木糖。在饲料、食品和造纸行业等都有极大地应用前景。现在商业应用的木聚糖酶大部分都是通过工程菌大规模发酵得到的。到目前为止，来源于不同生物的多种木聚糖酶已经被成功表达于大肠杆菌、芽孢杆...; 付正; 关键词：木聚糖酶嗜热真菌重叠延伸PCR 二硫键热稳定性; 文献传递

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