严共鸿
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 中国木薯醇腈酶结构、功能关系的研究及其在毕赤酵母中克隆、表达
- 手性醇腈化合物是医药、化工、农业化学品制备的重要中间体,在有机合成中具有巨大的应用价值,国内外对其开发日益活跃.中国木薯醇腈酶是一种裂解酶,在酶法制备(S)-醇腈化合物方面有很大的应用前景,通过该文的研究为揭示中国木薯醇...
- 严共鸿
- 关键词：定点突变毕赤酵母
- 木薯α-羟腈酶的克隆、表达及其初步应用被引量：7
- 2001年
- 木薯α 羟腈酶是一种催化羟腈化合物分解和合成的裂解酶 ,它在不对称合成手性羟腈化合物和手性药物等方面具有广泛的应用前景。通过RT PCR从木薯叶组织总RNA中扩增出α 羟腈酶基因的cDNA序列 ,并将其克隆于质粒 pPIC9K。序列分析表明 ,克隆的基因和文献报道的 3个木薯羟腈酶的cDNA序列不完全一致 ,可能是木薯羟腈酶基因家族的新成员。通过一系列步骤 ,将获得的α 羟腈酶基因cDNA序列插入表达载体 pET30a,在大肠杆菌获得高效表达。每升发酵液获得 2 10 0单位的羟腈酶 ,粗酶液的比活为 8 5u/mg蛋白质 ,并首次利用热变性法纯化重组羟腈酶。重组羟腈酶催化合成的 (S) 扁桃腈的ee值达 95 2 % ,转化率为 98 2 %。
- 程树华严共鸿吴襟孙万儒
- 关键词：手性手性药物药理学
