丁清泉 作品数:39 被引量:89 H指数:7 供职机构: 中国科学院武汉病毒研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 淡水生态与生物技术国家重点实验室开放谭题基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
草鱼出血病病毒的基础生物学与分子生物学特性的研究 方勤 丁清泉 蔡宜权 柯丽华 王炜 草鱼出血病病毒引起草鱼大批死亡,在中国南方(包括湖北省)尤为严重。1983年,中国科学院武汉病毒研究所鱼病课题组从患草鱼出血病的草鱼中分离出病毒病原,首次鉴定为鱼呼肠孤病毒。1990年,受农业部委托,由中国科学院武汉分院...关键词: 关键词:草鱼 出血病病毒 出血病防治 分子生物学 草鱼呼肠孤病毒RNA聚合酶基因的表达与产物纯化 被引量:1 2003年 草鱼呼肠孤病毒是引起草鱼出血病的主要病原,隶属于呼肠孤病毒科水生呼肠孤病毒属。序列分析表明,GCRV S2 片段长为3 877核苷酸,编码一个分子量为138kDa 的蛋白VP2,具有RNA聚合酶性质。为进一步了解该病毒 RNA聚合酶特性,本研究在对GCRV RNA聚合酶基因(GCRV-RdRp)保守区(约1.5kb)重组质粒pR/RRp高效表达的基础上,分别构建了编码GCRV RNA聚合酶保守区N端与C端部分基因的 pR/RRpN及pR/RRpC重组表达载体,并在原核细胞中获得成功表达。筛选的重组表达菌株经IPTG诱导培养,得到分子量分别为98kDa、103kDa的目的表达融合蛋白。Western blot分析表明,该表达产物与兔抗GCRV-VP2血清呈阳性反应。通过ProBond柱亲和层析,纯化了融合有6个组氨酸的重组表达产物,并获得约90%纯的目的蛋白。上述结果为GCRV RNA聚合酶特性分析提供了依据。 方勤 丁清泉 汪亚平 朱作言关键词:草鱼呼肠孤病毒 草鱼 出血病 RNA聚合酶 纯化 大肠杆菌RNA聚合酶的分子研究进展 1997年 丁清泉 戴顺英关键词:大肠杆菌 RNA聚合酶 分子研究 σ^(38)和RMF对有关基因表达调控的研究 被引量:1 1996年 将大肠杆菌的rpoS和rmf基因突变型和野生型菌株分别培养在营养丰富的LB培养基和成分有限的EP培养基上。在相同条件下,进入稳定期后的突变型菌株的活细胞数低于野生菌株。采用 Western blot方法测定了不同基因产物在稳定期的变化。σ^(38)对RNA聚合酶核心酶亚单位结构基因 rpoA、rpoB、rpoC以及groEs和tufA基因的表达影响不大,能抑制crp和促进rmf的表达。RMF在营养丰富的条件下对rpoA、rpoD,groEl、rho、tufA和ompA基因的表达有促进作用,而在EP条件下的影响并不明显,对crp和rpoS的表达分别有抑制和促进作用。 丁清泉 石浜明关键词:基因表达 转录调控 AcMNPV突变株的蛋白表达时相研究 2003年 将苜蓿银纹夜蛾多核衣壳核型多角体病毒(Autograph Colifornica nuclear polyhedrosis virus,AcMNPV)的野生型株HR3和温度敏感突变株ts317、ts538、ts8感染草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)Sf21细胞,并在允许温度(25℃)或非允许温度(33℃)下培养,分别采用过氧化物酶标记的抗P47蛋白、抗P143蛋白、抗多体蛋白和抗病毒结构蛋白的单克隆抗体检测病毒增殖过程各蛋白出现的时间。结果表明:1)P47蛋白是一种晚期(12hpi)表达蛋白,各突变株在允许温度(25℃)能够表达,但在非允许温度(33℃)不能表达。2)P143蛋白是一种早期(8hpi)表达蛋白,在允许温度和非允许温度时都能表达,ts8的表达量较少。3)在非允许温度条件下,蛋白质的合成速度高于允许温度。4)野生型和突变株ts317的病毒结构蛋白(P80、GP64、VP39、P24和PTP)在允许温度增殖下都能检测到,ts538和ts8表达量相对少些。5)除了GP64和P24外,ts538和ts8感染的细胞在非允许温度下不能表达病毒的结构蛋白。6)野生型毒株HR3在允许温度和非允许温度下的蛋白表达无明显差异。 丁清泉 方勤 RenéeLapointe 戴顺英 赵小东 Eric B.Carstens关键词:蛋白表达 温度敏感突变株 草鱼呼肠孤病毒核心衣壳模型 省略后视图、右视图和仰视图。 方勤 丁清泉温度对草鱼出血病影响的初步探讨 被引量:2 1990年 将鱼呼肠孤病毒(FRV)感染的草鱼饲养在人工控温的水族箱内,水温在24—30℃恒温时其死亡率无显著差异(P>0.05),而在20℃和33℃恒温时死亡率则明显降低,与24℃—30℃恒温相比死亡率有非常显著差异(P<0.01)。人工感染恒温饲养期间,死亡高峰期随水温降低而推迟,缓慢改变水温能降低死亡率,在低于20℃攻毒并维持一星期左右,即使逐步升温至30℃也不会导致感染鱼的大批死亡。 丁清泉 余兰芬 柯丽华关键词:草鱼出血病 温度 σ因子对基因启动子选择性研究 丁清泉 戴顺英关键词:化学合成 虎纹捕鸟蛛毒素-I 基因 草鱼出血病病毒对其它鱼的感染性研究 被引量:9 1991年 用草鱼出血病病鱼分离出的草鱼出血病病毒(Grass carp hemorrhage virus,GCHV)感染其它常见鱼并用ELISA方法检查感染鱼组织提取液,结果表明:青鱼、鲢鱼、布氏鳌条对GCHV抗体呈阳性反应;鲤鱼、鳙鱼、鲫鱼、团头鲂、泥鳅则呈阴性反应。综合感染鱼发病症状及死亡特征,初步认为:青鱼对GCHV是易感的,GCHV能在鲢鱼、布氏蟹条体内增值,但毒力较低,鳙鱼、鲫鱼、团头鲂、鲤鱼、泥鳅能抗GCHV感染。 丁清泉 余兰芬 柯丽华 蔡宜权关键词:草鱼出血病 草鱼出血病病毒 ELISA检测 感染性 草鱼呼肠孤病毒基因组及蛋白结构与功能研究 方勤 陆仁后 邱涛 丁清泉 张岚岚 该项目属生命科学病毒学研究领域。草鱼暴发性出血病严重地威胁中国淡水养殖业的健康发展,草鱼呼肠孤病毒(GCRV)是该病的病毒病原,研究GCRV基因组及结构蛋白特性与功能是基础病毒学及抗病毒研究需要解决的重大课题。完成人在国...关键词: 关键词:草鱼 呼肠孤病毒 免疫防治 淡水鱼养殖