齐香荣
- 作品数：24 被引量：46H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中国综合性艾滋病研究项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 应用ELISPOT方法筛选确定HIV-1 B／C亚型疫苗六种抗原的H-2^d限制的T细胞表位被引量：3
- 2011年
- 为了筛选和确定用于检测表达HIV-1 B'/C亚型病毒6种抗原(gp160、gag、polr、evt、at和nef)的艾滋病疫苗免疫小鼠后H-2d限制的特异性T细胞表位,本研究使用表达上述6种抗原的复制型DNA疫苗和非复制型重组痘苗病毒疫苗联合免疫BALB/c小鼠,通过矩阵设计将HIV-1 B(C)亚型6种相应抗原全序列肽库分别混合成肽池,使用肽池对免疫小鼠进行IFN-γELISPOT检测,根据检测结果确定肽库中特异反应的优势表位肽。结果显示:筛选到七条针对Gag的特异表位肽,其中有5条与文献报道相同,另2条为新表位肽;筛选到3条针对Pol蛋白特异表位肽,其中一条为新表位肽;筛选到2条针对gp160特异表位肽,其中一条为新表位肽;在Nef肽库中筛选到一条新的表位肽;从Tat肽库中筛选到3条表位肽,这三条肽在肽库中是连续的序列,都包含(或部分包含)网上公布的表位序列;在Rev肽库中没有筛选到能够产生阳性反应的特异性表位肽。本研究使用IFN-γELISPOT方法筛选和确定了可用于检测表达HIV-1 B'/C亚型病毒6种抗原(gp160、gag、pol、revt、at和nef)的艾滋病疫苗免疫小鼠后H-2d限制的特异性T细胞表位。
- 齐香荣高瑛瑛陆柔剑邓瑶孟昕谭文杰阮力
- 关键词：HIV-1IFN-ΓELISPOTT细胞表位
- 流行性乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白基因在原核细胞中的高效表达及其表达产物的抗原性分析被引量：6
- 2003年
- 目的 获得JEVE蛋白基因并使其在E coli中高效表达 ,以研究其抗原活性 ,为进一步研制ELISA早期诊断试剂盒奠定基础。方法 根据已发表的JEVSA - 14 - 14 - 2减毒株序列 ,设计一对特异性引物 ,通过RT -PCR扩增出E蛋白基因的cDNA片段 ,并将其克隆入 pET - 32a(+)表达载体中 ,构建重组融合表达载体pET -E ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)后 ,利用IPTG诱导获得高效表达。结果 扩增的E蛋白基因片段长 1113bp ,编码 371个氨基酸残基 ,该基因片段与国内发表的减毒株SA14 - 14 - 2碱基序列同源性为 10 0 %。表达产物分子量约为 6 2kD ,经Westernblotting分析表明表达产物具有较好的抗原性。结论 通过序列分析表明 ,我国的JEVSA - 14 - 14 - 2减毒株未发生基因突变。表达产物的稳定高效表达及其抗原特异性分析为今后ELISA早期诊断试剂盒的研制提供了依据。
- 杨耀武齐香荣陈德胜何孔旺陈溥言沈国顺
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白原核细胞抗原性
- HIV pol 基因修饰在不同载体系统中对免疫效果的影响
- 2012年
- 目的了解pol基因修饰前后在不同载体系统中表达水平差异对免疫效果的影响，为确定HIV疫苗中能诱发较高水平细胞免疫的Pol靶抗原奠定实验基础。方法将含有优化前后pol基因的HIV-1DNA（pVRC）疫苗和痘苗病毒载体（rVV）疫苗单独或联合免疫BALB／c小鼠，利用IFN-1ELISPOT和ICS检测各组的细胞免疫效果，ELISA检测体液免疫水平，分别比较基因优化前后及在不同载体内的Pol诱发的免疫效果。结果DNA疫苗中pol基因修饰后细胞免疫反应由112提高至258（SFC／10^6 SMNC），抗体滴度随免疫次数增加而提高，基因修饰后第二针的抗体水平由10^1.7提高至10^2.3，三针后则没有差别；而以痘苗病毒为载体的疫苗基因修饰前后细胞免疫反应（～600SFC／10。SMNC）和抗体水平（-10^2.2）均没有差异。两种疫苗联合免疫均可显著提高Pol在小鼠体内的免疫效果，基因修饰后细胞免疫反应由788提高至2500（SFC／10。SMNC），抗体水平则没有差别。结论Pol基因修饰明显提高常规DNA疫苗免疫效果，并可进一步提高联合免疫效果，但对重组痘苗病毒疫苗单独免疫效果无明显影响。
- 高瑛瑛齐香荣孟昕邓瑶谭文杰阮力
- 关键词：痘苗病毒基因免疫法
- 鸡胚致死孤儿病毒Ⅲa蛋白原核表达及其产物纯化
- 鸡胚致死孤儿病毒(CELOV)属于腺病毒科的禽腺病毒Ⅰ群中的Ⅰ型,为双股DNA病毒,无囊膜,20面体对称,基因组大小为43 804bp。该病毒能够在鸡肾细胞、鸡胚肝细胞等细胞上增殖,产生细胞变圆、折光性增强、脱落等病变。...
- 周斌齐香荣杨耀武芦银华陈溥言
- 鸡胚致死孤儿病毒Ⅲa蛋白原核表达及其产物纯化
- 本文将鸡胚致死孤儿病毒Ⅲa蛋白原核表达,通过Ⅲa蛋白检测动物机体内的抗体水平和感染率,以便进行CELOV流行病学调查.
- 周斌齐香荣杨耀武芦银华陈溥言
- 关键词：鸡胚致死孤儿病毒原核表达克隆
- 文献传递
- 流行性乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白在原核细胞中的高效表达以及ELISA诊断试剂盒的初步研究
- 流行性乙型脑炎(Epidemic Encephalitis B)简称乙脑,是由乙型脑炎病毒(Encephalitis B Virus)又称日本脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)引起...
- 杨耀武齐香荣陈德胜何孔旺陈溥言沈国顺
- 文献传递
- 六株不同地区分离的H7N9流感病毒假病毒制备与生物学特性研究被引量：1
- 2017年
- 目的 选择不同地区分离的H7N9亚型流感病毒代表株,制备各代表株的假病毒,为H7N9疫苗对不同地区毒株的免疫保护效果评价奠定基础.方法 通过对29株H7N9流感病毒血凝素（Hemagglutinin,HA）的氨基酸序列分析,获得6株不同地区H7N9亚型流感病毒代表株病毒;采用基于慢病毒载体的假病毒包装系统,以HA与神经氨酸酶（Neuraminidase,NA）作为包膜质粒,包装获得6株带有荧光素酶报告基因的假病毒;通过电镜负染、Western blot检测、感染MDCK后的荧光素酶读值和血凝试验等了解6株假病毒的生物学特性,通过血清交叉中和试验了解其在中和抗体检测中的应用情况.结果 筛选获得6株不同地区分离的H7N9流感病毒代表株并制备了相应的假病毒颗粒,电镜下可观察到典型的流感病毒形态,Western blot可检测到HA、NA和P24的表达;滴度测定结果显示6株假病毒对MDCK细胞的感染力为104- 105TCID50/50μl,血凝活性可达64- 512;SH1上海株H7N9 HA疫苗免疫血清针对6株流感假病毒100TCID50剂量的中和效力不同,提示6株假病毒可用于疫苗的交叉免疫效果评价.结论 成功获得6株H7N9不同地区代表株流感假病毒,为疫苗的免疫效果评价奠定了基础.
- 黄保英李善琴齐香荣任皎宋敬东谭文杰田厚文阮力
- 关键词：假病毒血凝素抗原特性
- 三个HIV-1广谱中和表位与HBV S抗原融合表达可诱导小鼠特异性抗体应答被引量：4
- 2008年
- 为了增强HIV-1交叉中和表位的免疫原性,本研究使用PCR克隆技术将HIV-1三个具有一定广谱中和活性的线性抗原表位ELDKWA(简称2F5)、NWFDIT(简称4E10)和GPGRAFY(简称447-52D)基因分别融合到HBV S基因的3'末端,构建了分别表达这三种融合基因的天坛株重组痘苗病毒疫苗RVJ1175S-2F5、RVJ1175S-4E10和RVJ1175S-447-52D,使用这三种重组痘苗病毒感染的细胞培养上清液经分离纯化制备了三种相应的蛋白亚单位疫苗PS-2F5、PS-4E10和PS-447-52D,对重组痘苗病毒和亚单位疫苗中三种融合抗原的生物学及免疫学特性进行了比较研究。PCR和测序结果表明,三种融合基因序列正确重组到痘苗病毒TK区,HBsAg的ELISA检测表明三种融合蛋白有效表达并分泌到细胞培养上清液中,SDS-PAGE凝胶电泳显示三种纯化后的融合蛋白均含分子量为23kD和27kD两种典型HBsAg条带,Western blot证明这两个条带均能与HBsAg抗体反应,并分别能与三种表位相应的HIV-1单抗2F5、4E10和447-52D反应。小鼠免疫结果显示,三种重组痘苗病毒疫苗和三种蛋白亚单位疫苗均能诱发较高水平的HBsAg抗体和相应HIV-1交叉中和表位抗体,蛋白亚单位疫苗诱生的这两类抗体均明显高于对应的重组痘苗病毒疫苗。这些结果为进一步研究三种表位抗体的中和活性和通过不同类型疫苗联合免疫进一步增强其免疫效果研究奠定了基础。
- 李学仁陈红王文邓瑶齐香荣高瑛瑛孟昕谭文杰阮力
- 关键词：HIV-1中和表位重组痘苗病毒
- 猪伪狂犬病毒血清学调查及部分特性的研究被引量：5
- 2003年
- 从山东某猪场疑似猪伪狂犬病死亡的仔猪大脑、扁桃体等组织中分离到一株病毒。该病毒接种家兔后,使家兔产生典型的奇痒症状,且能在鸡胚成纤维细胞(CEF)上增殖,并可产生典型的细胞病变(CPE)。CEF细胞接种该病毒后,进行DNA琼脂糖凝胶电泳时,呈现"梯状"条带,说明病毒感染CEF细胞后,使细胞产生"凋亡"现象。综合本病毒的各种特性,初步鉴定为伪狂犬病毒。应用伪狂犬乳胶凝集诊断试剂盒对来自山东6个猪场共100份血清进行了血清学调查。共检出阳性血清25份,血清阳性率达25%。
- 宋春阳单虎韩先杰宋玉芹齐香荣杨斌成
- 关键词：伪狂犬病毒血清学调查细胞凋亡
- 流行性乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白在原核细胞中的高效表达以及ELISA诊断试剂盒的初步研究
- 本研究利用RT-PCR技术扩增了JEV E蛋白基因主要片段,将之克隆入大肠杆菌中进行高效表达,并利用间接ELISA对表达产物的抗原性进行检测.为进一步利用原核表达产物研制诊断试剂盒奠定基础.
- 杨耀武齐香荣陈德胜何孔旺陈溥言沈国顺
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒ELISA诊断试剂盒RT-PCR技术
- 文献传递
