黄立东 作品数:42 被引量:85 H指数:5 供职机构: 上海市免疫学研究所 更多>> 发文基金: 上海市科学技术发展基金 国家自然科学基金 福建省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
OMgp多克隆抗体的制备,鉴定及其在成年大鼠SCI前后的表达 目的 制备抗中枢神经系统(CNS)髓鞘源性分子-少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(Oligodendrocyte Myelin Glycoprotein,OMgp)的多克隆抗体,以检测OMgp在脊髓损伤(SCI)前后的表达变化和相... 窦芳芳 于盼盼 黄立东 徐晓明关键词:多克隆抗体 SCI 神经元 少突胶质细胞 一种抗人Nogo-66受体蛋白疫苗的制备方法及其应用 一种制备抗人Nogo-66受体蛋白疫苗的方法,从人神经母细胞瘤(SK-N-SH)cDNA中,经PCR扩增得到全长hNgR基因,将扩增的片段插入至克隆载体中,再亚克隆至含6个His标签的表达载体pET28a(+)获得重组表... 陆佩华 于盼盼 黄立东 徐晓明 虞志华 王艳霞 王小飞 刘欣秋 徐亮文献传递 转染II类分子反式激活因子基因突变体抑制猪SLA的表达 被引量:2 2002年 为观察CIITA基因突变体对猪SLA表达的影响 ,用脂质体转染法将pcDNA3及CIITA突变体pcDNA3mCIITA2、pcDNA3mCIITA3和pcDNA3mCIITA4转染入猪血管内皮细胞系PIEC和猪B淋巴细胞系L2 3。利用流式细胞术 /RT PCR检测各种突变体对猪SLA DR、 DQ分子 /mRNA组成性和诱导性表达的影响。发现两种突变体pcDNA3mCIITA3和pcDNA3mCIITA4对PIEC/L2 3细胞SLAII类分子的表达起明显的抑制作用 ,而空载体pcDNA3和不具有起始密码子的突变体pcDNA3mCIITA2无此作用。提示pcDNA3mCIITA3和pcDNA3mCIITA4能抑制猪SLAII类分子的表达。 欧启水 林琳 黄立东 陆佩华 周光炎关键词:基因转染 主动免疫治疗在习惯性流产患者中诱发免疫抑制 被引量:5 1995年 对采用主动免疫治疗获成功的22对原因不明性习惯性流产夫妇,作了治疗前后患者抗丈夫淋巴细胞毒抗体和混合淋巴细胞培养(MLC)观察。发现治疗后大部分患者没有出现抗丈夫淋巴细胞毒抗体,提示细胞毒抗体与治疗是否成功无必然联系。MLC结果表明,主动免疫治疗在患者中诱发了免疫抑制,且这种抑制是非特异针对丈夫的。因为治疗后,患者对丈夫,患者对无关男性的MLC刺激指数均显著下降,同时伴有血清抑制因子升高,两者与治疗前相比均有显著差异(P<0.01)。提示细胞免疫参与了免疫抑制。诱发免疫抑制可能是主动免疫治疗获得成功的机制之一。 陆佩华 富赛里 黄立东 周光炎 林其德 赵爱民 周涵春 严隽鸿关键词:流产 免疫抑制 免疫疗法 细胞免疫学 MHCⅡ类反式激活因子基因的克隆、鉴定及初步功能测定 被引量:5 2001年 目的 克隆MHCⅡ类反式激活因子 (classⅡtransactivator,CⅡTA)基因并进行初步功能测试 ,为CⅡTA的应用研究奠定基础。方法 RT PCR扩增CⅡTA基因 ,将其克隆到pGEM T载体上并进行酶切和测序鉴定 ;用EcoRⅠ、XhoⅠ将CⅡTA定向克隆到表达载体pcDNA3上 ,用脂质体转染法将pcDNA3/CⅡTA转入HeLa细胞 ;流式细胞术观察细胞表面HLA DR/DQ的表达变化。结果 成功克隆CⅡTA基因 ,CⅡTA基因的转入使HeLa细胞表面表达HLA DR/DQ分子。结论 转入CⅡTA能使HeLa细胞表面表达MHCⅡ类分子表达 ,CⅡTA参与调控MHCⅡ类基因的转录和表达。 欧启水 林琳 黄立东 陆佩华 周光炎关键词:基因克隆 MHC HELA细胞 酵母双杂交文库筛选及N型钙离子通道与BART相互作用的初步分析 被引量:1 2006年 目的应用酵母双杂交技术筛选N型钙离子通道相关蛋白,并对候选蛋白BART(binder of arltwo)进行初步分析。方法用N型钙离子通道α1亚基C端630个氨基酸残基肽段(Calcium channel630a-mino acids,CaCh630)作为探针,运用酵母双杂交技术筛选出与之相互作用的基因。通过PCR扩增并克隆候选基因BART,然后分别构建带有红色荧光蛋白标签的表达载体pDsRed-BART和带绿色荧光蛋白标签的pEGFP-CaCh630,共转染海马神经元后,用激光共聚焦扫描显微镜观察这两个外源蛋白在细胞中的定位情况。结果应用酵母双杂交技术筛选出6个相关基因,体外共转染试验发现BART和CaCh630分子在海马神经元内有共定位现象,进一步证明其可能存在相互作用。结论BART可能在维持钙离子通道细胞骨架中定位起重要作用。 朱慧琴 于盼盼 林琳 杭勤 陆佩华 黄立东关键词:酵母双杂交技术 钙离子通道 共定位 PCR在检测HBV DNA中的应用 被引量:22 1994年 PCR在检测HBVDNA中的应用汤继光,黄立东,范友谊,李玉强,杨爱民,徐云,周光炎目前,国内文献报道用聚合酶链反应技术(PCR)检测乙肝病毒(HBV)DNA,大多集中在方法学上[1,2]。我们用PCR技术和酶联免疫试验(ELISA)同时检测了612... 汤继光 黄立东 范友谊 李玉强 杨爱民 徐云 周光炎关键词:聚合酶链反应 乙型肝炎病毒 DNA 采用PCR-RFLP技术分析中国人HLA-DR5亚型 被引量:4 1991年 采用等位特异的限制性内切酶降解经PCR扩增的中国人HLA纯合细胞的DRB基因片段,根据相应的限制性片段长度多态性(PCR-RFLP),可十分快速而准确地从DNA水平区分DR5的两个亚型,并显示属于DRW12亚型的中国人HLA纯合细胞与参考细胞间电泳格局的差异,提示新的DRW12变异体的存在。该技术不必采用等位或顺序特异的寡核苷酸探针进行杂交,因而无需使用放射性同位素,展示了应用于HLA基因分型的良好前景。 黄立东 陆佩华 富赛里 周光炎关键词:HLA-DR 限制性内切酶 白细胞介素-1对神经干细胞的增殖具有抑制作用 <正>神经干细胞(NSCs)移植治疗中枢神经系统损伤是神经科学研究的一个热点。但中枢神经系统损伤能导致损伤区及其附近组织强烈的炎症反应,内源性胶质细胞和浸入的免疫细胞因此产生多种细胞因子,如白细胞介素-1(IL-1)等。... 王小飞 于盼盼 黄立东 朱慧琴 虞志华 陆佩华关键词:白细胞介素-1 神经干细胞 细胞增殖 文献传递 用PCR指纹图作HLA-DR快速配型的研究 1995年 PCR指纹图技术选用通用型引物扩增HLA-DRB基因第二外显子,其产物在PAGE电泳中显示特定的“卫星”条带。可用于个体间作HLA-DR的基因水平交叉配型,确定供受体间DRB基因的相容性。采用HLA纯合的B淋巴细胞系,分析单倍型上DRBI、DRB3等基因异同时指纹图格局的变化,并通过15对细胞间组合和比较,证实经DNA交叉配合后的指纹图格局能十分敏感地反映个体间DR基因间的差异。在此基础上进一步对17对随机个体作PCR指纹图及交叉配型分析,表明这一技术在判别供受体间DR基因匹配性上十分有效,并有简单、快速、准确等优点。 张庆华 沈仲毅 黄立东 钱振芳 陆佩华 周光炎关键词:HLA-DR基因 移植配型 器官移植