马贤凯
- 作品数：98 被引量：296H指数：9
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- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学自然科学总论更多>>
- Ⅰ型人免疫缺陷病毒(HIV-1)逆转录酶在大肠杆菌中的表达及其初步纯化被引量：1
- 1993年
- Ⅰ型人免疫缺陷病毒逆转录酶在抗感染及ＡＩＤＳ治疗药物的设计中是一个重要的靶分子，并且可作为工具酶应用于逆转录ＰＣＲ等分子生物学研究中。本研究将ＨＩＶ－１ＲＴ基因经ＰＣＲ扩增并修饰后克隆入大杆菌表达载体ｐＢＶ２２０，所获重组子所表达的ＨＩＶ－１ＲＴ蛋白占菌体总蛋白的８％左右，且经〔＾３Ｈ〕ｄＴＴＰ掺入法证实该重组ＨＩＶ－１ＲＴ具有ＲＴ聚合酶活性。
- 李满陈辉王嘉玺凌世淦马贤凯
- 关键词：逆转录酶免疫缺陷病毒
- 在昆虫细胞中克隆与表达人白细胞介素6被引量：1
- 1993年
- 本文利用DNA合成及PCR技术对人白细胞介素6(hIL-6)cDNA进行转译优化与扩增,并同杆状病毒载体pVL 1393重组构建了pVL·IL-6载体;通过磷酸钙共沉淀法将pVL·IL-6 DNA与野生型苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(wtAcMNPV)DNA共转染昆虫细胞Sf9,筛选出表达人IL-6的重组病毒rAc·IL-6,经ELISA定量测定rhIL-6表达水平约为1μg/ml;rhIL-6生物活性经IL-6依赖细胞系7TD1测定为10~6u/ml。
- 赵春文王嘉玺肖定华马贤凯
- 关键词：PCR杆状病毒白细胞介素-6
- 人毒素源性大肠杆菌热敏感肠毒素基因的克隆和表达被引量：6
- 1989年
- 用限制酶Pst Ⅰ完全消化毒素源性大肠杆菌H10407的热敏感肠毒素(LT)质粒DNA,酶切片段经电泳分离后,用Southern分子杂交技术定位LT基因。回收5.3kb的LT DNA片段并将它与经Pst Ⅰ完全酶解的pUC8DNA混合,体外连接后用于转化感受态E.coli JM83细胞。筛选后获得了一株能有效表达LT的重组子。免疫学及生物学测定表明,此克隆株所产生的LT与亲本株H10407所产生者具有相同的免疫原性和生物活性,且其产最为亲本株的16倍。
- 程新波陈添弥马贤凯黄翠芬
- 关键词：大肠杆菌克隆
- 不同培养基和寄主菌对白介素——Ⅱ工程菌表达的影响
- 1991年
- 本文比较了LB、M9CA 两种培养基和大肠杆菌 DH5α和 RRl 寄主菌,对白介素-Ⅱ(IL-Ⅱ)工程菌表达的影响。比较结果表明,M()CA培养基和DH5α寄主菌效果较好,其表达 IL-Ⅱ的蛋白量占整个菌体蛋白量的18%,占包涵体蛋白量的53%。
- 朱跃先马贤凯
- 关键词：白细胞介素培养基工程菌
- 用微量和弱免疫原性抗原制备多克隆及单克隆抗体的新方法被引量：5
- 1989年
- 制备抗血清及单克隆抗体(McAb)时，最重要的是抗原(Ag)诱发所免疫动物的抗体应答强度，企图获得高效价的抗体，不但取决于Ag本身所具有的免疫原性，而且与免疫时所使用的AE量，免疫途径及佐剂形式有关。通常当抗原免疫原性较强、
- 王小宁马贤凯汪美先
- 关键词：单克隆抗体抗原多克隆抗体应答免疫途径高效价
- 乙型肝炎病毒的X蛋白在大肠杆菌中的高效表达被引量：5
- 1989年
- X基因是乙型肝炎病毒(HBV)的四个开读框架之一,编码一个含154个氨基酸的蛋白。将含有编码145个氨基酸的X基因主要部分用Bam HI及Bgl Ⅱ酶切,获得Bam HI-Bgl Ⅱ HBV DNA片段(584bp),将其插入到质粒pEx31的Bam HI切点,构建成一个在λPL启动子控制下表达MS2-X融合蛋白的质粒—pEx31-HBX。含此质粒的大肠杆菌可产生占菌体蛋白总量40％的28千道尔顿融合蛋白。用抗X标准抗血清证实,此融合蛋白具有X的抗原活性,并制备了抗融合蛋白的抗血清。这是在国内首次成功地高效表达乙型肝炎病毒的X蛋白。
- 金灵马贤凯
- 关键词：乙肝病毒X基因大肠杆菌
- 丙型肝炎病毒外膜E_2／NS_1区基因在大肠杆菌中的表达
- 1996年
- 将丙型肝炎病毒外膜Ｅ_２／ＮＳ_１基因亚克隆至融合型表达载体，在大肠杆菌中进行表达，表达的重组蛋白经ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ和ＥＬＩＳＡ鉴定具有丙型肝炎病毒外膜蛋白的抗原性，能与丙型肝炎病毒感染血清发生特异性结合反应，为研究外膜蛋白抗体的意义创造了条件。
- 沈定霞郝飞逯好英李梦东马贤凯
- 关键词：丙型肝炎病毒外膜蛋白基因表达
- 乙型肝炎病毒分子生物学研究进展
- 马贤凯
- 关键词：复制(分子生物学)转录(分子生物学)分子生物学乙型肝炎病毒
- 抗rHIV—env1肽单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定
- 1992年
- 用rHIV-env_1肽免疫BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合,经4次克隆化获5株杂交瘤细胞系,其分泌抗体类型均属IgM。经连续传代6个月及液氮冻存9个月,分泌抗体特性无明显变化。5株McAb对rHIV-env_1肽或HIV-1均能明显地识别。用ELISA间接法测定各株McAb的相对亲和力,有3株(F7、B10、D6)McAb的50％最大结合浓度介于0.9～5μg/ml之间,用已如HIV-gp120抗体阳性血清阻断4株McAb与相应抗原的结合试验,所获结果各异。其中McAb B10与rHIV-env_1肽抗原的结合均可被4份HIV-gp120抗体阳性血清明显阻断,故初步认为B10McAb与抗HIV-gp120抗体中的保守肽段具有共同成分,抗HIV-env_1肽高度保守肽段的McAb,对艾滋病(AIDS)患者和人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者的诊断具有实际应用价值。
- 王敏超汪德清温新宇吴卫星马贤凯王鸿雁
- 关键词：艾滋病单克隆抗体ELISA肽类杂交瘤细胞株
- 基因工程产物纯化工艺的设计被引量：14
- 1995年
- 基因工程产物纯化工艺的设计徐明波，马贤凯（军事医学科学院基础医学研究所）工艺的设计和操作单元的选择是一个在尝试和失败中不断积累经验的过程，与工艺设计者的知识水平与经验有关。前人工作的总结是获得设计思路的重要途径［１］。一、影响工艺设计的因素分析１．活...
- 徐明波马贤凯
- 关键词：基因工程基因工程产物纯化工艺
