韩素文
- 作品数：22 被引量：46H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人黑色素瘤细胞系MTS1/p16CDDK4基因的突变
- 1998年
- 为了探讨p16基因在人肿瘤细胞系中的突变,采用PCR-SSCP分析和基因序列测定技术,对人黑色素瘤细胞系(Bowes)中p16基因的突变进行检测。结果显示,Bowes细胞的p16基因第二外显子扩增产物在聚丙烯酰胺凝胶中电泳异常,表明其基因序列存在点突变。核酸序列测定证实第341号核苷酸发生T→C的颠换。应用DNA重组技术构建的突变型p16基因重组质粒可作为基因探针用于检测p16基因的缺失。
- 张劲风贺晓慧韩素文洪美玲王秉仪陈广祥赵先碧李庆
- 关键词：人黑色素瘤突变MTS1/P16第二外显子
- 全文增补中
- 痘苗病毒不同启动子对乙型肝炎病毒表面抗原表达的影响
- 1996年
- 利用ＤＮＡ重组和细胞体内同源重组技术，分别获得了Ｐ７．５启动子和Ｐ１１启动子单独带动的乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）基因的重组痘苗病毒，以及同一个重组痘苗病毒中含有Ｐ７．５和Ｐ１１启动子分别带动一个ＨＢｓＡｇ基因（正反两个插入方向）的四种重组痘苗病毒，比较了它们对ＨＢｓＡｇ表达的影响。含Ｐ７．５启动子的比含Ｐ１１启动子的重组痘苗病毒表达的ＨＢｓＡｇ水平更高；在同一个重组痘苗病毒中Ｐ７．５和Ｐ１１两个启动子分别带动ＨＢｓＡｇ基因时，两个启动子同向转录表达的ＨＢｓＡｇ水平较低，而两个启动子反向转录时表达的ＨＢｓＡｇ水平较高，但均没有单一Ｐ７．
- 韩素文于强程度胜方继明
- 关键词：乙型肝炎病毒表面抗原重组痘苗病毒操纵子
- 带节育环妇女宫腔液血纤维蛋白溶酶原激活物的测定
- 1991年
- 用溶解圈法对带节育环妇女宫腔液血纤维蛋白溶酶原激活物(PA)进行测定,并经抗尿激酶(UK)血清及抗组织型血纤维蛋白溶酶原激活物(t-PA)血清中和抑制试验鉴定 PA 类型(UK 或 t-PA)的特异性。结果证明,上环妇女宫腔液中 PA 的阳性率及PA 含量均高于未上环组,特别是上环1、2个月与未上环者差别显著,以后各组逐渐下降,1年以后接近未上环组,PA(UK 及 t-PA)是溶血栓类物质,上环妇女宫腔液中 PA物质的增高有可能是导致月经过多的主要原因。
- 韩素文俞炜源王莉娟
- 关键词：宫腔液节育环PA
- 人黑色素瘤细胞系中MTS_1/p16CDK_4基因的突变
- 1999年
- 目的 探讨MTS1/p16CDK4基因在人肿瘤细胞中的突变及意义。 方法 采用PCRSSCP方法和基因序列测定技术对人黑色素瘤细胞系Bowes、Hela细胞和正常人肺细胞HFL中p16基因exon2进行检测和分析。 结果 Bowes细胞和Hela细胞中p16基因exon2扩增的单链DNA在聚丙烯酰胺凝胶中泳动加快,表明其DNA顺序存在单链构象改变。核酸序列测定证实第341号核苷酸发生T→C的颠换。 结论 p16基因的突变导致其编码蛋白质异常,引起细胞异常增殖。p16基因的突变是肿瘤发生和发展的重要原因。
- 张劲风韩素文贺晓慧王秉仪陈广祥赵先碧李庆
- 关键词：黑色素瘤点突变肿瘤抑制基因核酸序列分析单链构象
- 人端粒保护蛋白hPot1的一种新选择性剪接体的克隆及鉴定被引量：2
- 2004年
- hPot1是端粒单链结合蛋白,在维持染色体末端的稳定性中发挥着重要作用。从前列腺癌细胞C4-2中提取总RNA,以反转录得到的cDNA为模板,扩增全长的hPot1cDNA,发现hPot1基因的一种新的剪接形式。这种新的剪接形式缺失了野生型hPot1基因的第2个外显子,并且造成了读码框架的改变,使翻译提前终止,表达出一段有45个氨基酸残基的短肽。进一步检测表明,这一hPot1mRNA新剪接体广泛存在于多种组织来源的细胞中,提示这一剪接形式可能是细胞调控hPot1功能的一种调节机制。
- 林坚陈浩黄君健白云秀金蕊张彬韩素文黄翠芬
- 关键词：人端粒保护蛋白HPOT1选择性剪接克隆染色体
- 人尿激酶原cDNA序列缺失突变体的构建及表达被引量：1
- 1997年
- 采用ＰＣＲ重叠延伸法和基因重组技术构建了人尿激酶原ｃＤＮＡ序列中缺失１５０～１５６位氨基酸的突变体，以ＣＯＳ７细胞中获得暂时性表达以及在ＣＨＯ细胞中稳定高效表达，其表达水平为４５０～５００ＩＵ／１０６ｃｅｌ／２４ｈ，表达产物经ＳＤＳＰＡＧＥ电转溶实验和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析证明，细胞分泌的ＰｒｏＵＫ突变体与天然ＰｒｏＵＫ以及完整全长ＤＮＡ序列表达ＰｒｏＵＫ的分子量相同，为５４ｋＤａ，绝大多数为单链，比完整ｃＤＮＡ序列表达产物的单链比例明显增高。
- 韩素文俞炜源程度胜胡宝成
- 关键词：尿激酶原CDNA突变体基因工程
- 含不同长度前C序列的乙型肝炎病毒核心抗原基因在重组痘苗病毒中的表达被引量：1
- 1991年
- <正> 核酸序列分析表明,乙型肝炎(乙肝)病毒核心抗原基因(C基因)编码区内存在两个ATG。目前认为第二个ATG为乙肝病毒C抗原的起始密码子,两个ATG之间的序列称为前C序列,共87bp。Uy、Rutter、Roossinck及景新等的研究表明,含前C序列时,C基因在大肠杆菌中的表达是形成具有HBeAg活性的P25~e膜蛋白,在哺乳动物细胞中的表达则是形成分泌性的HBeAg;不含前C序列时。
- 程度胜韩素文项秉一方继明
- 关键词：乙肝病毒痘苗
- 人白介素6在 CHO 细胞中的克隆与表达
- 1997年
- 本研究通过引物设计、转译优化、ＤＮＡ体外重组等技术，构建了ｐＳＶ２·ＩＬ６重组质粒，利用磷酸钙共沉淀法转染中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷型（ＣＨＯｄｈｆｒ－）株，经选择培养基筛选及逐渐提高甲氨蝶呤（ＭＴＸ）的浓度加压基因共扩增法，获得一株稳定表达人ＩＬ６的细胞株，用ＩＬ６依赖的杂交瘤细胞株７ＴＤ１测定细胞上清液的ＩＬ６生物学活性为１．９×１０５Ｕ／（１０６细胞·ｄ）。
- 韩素文王嘉玺陈志荣俞炜源邹民吉彭善云
- 关键词：白细胞介素6CHO细胞克隆
- 人尿激酶原cDNA在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中高效表达研究被引量：3
- 1993年
- 通过构建高效表达载体,改进转染方法,与二氢叶酸还原酶(dhfr)基因共扩增等手段在CHO细胞内高效表达了人尿激酶原(Pro-UK)cDNA。首先将pro-UK cDNA插入到SRα启动子的下游,构建成表达质粒pMG10102,在COS-7细胞内进行暂时性表达,结果表明此启动子的表达水平比SV40早期启动子高约5倍。然后将质粒pMG10102和pSV2-dhfr线性化后用磷酸钙共沉淀法转染CHO-dhfr^-细胞,经一系列筛选后获得20个能表达pro-UK的细胞克隆,纤维蛋白溶解平板法(FAPA)测定表达水平为12.5—100IU/10~6 cells/d.再经MTX加压共扩增,得到9株高表达细胞系,其中最高的表达水平达到400—500IU/10~6 cells/d。经2—3个月连续传代,表达水平未下降,表明细胞株是稳定的。Western Blot分析证明细胞分泌的重组pro-UK具有与天然pro-UK相同的分子量,而且培养液中不加蛋白酶抑制剂时,分泌的重组UK大部分为单链(60%以上)。
- 程度胜俞炜源韩素文李秀珍李风知胡宝成方继明黄翠芬
- 关键词：尿激酶原CDNA基因工程
- 分别含K88,K99和LT-B亚单位抗原基因的重组痘苗病毒的构建
- 1991年
- 本文构建了分别含K88,K99和LT-B亚单位抗原基因的重组痘苗病毒,并观察了这3种基因的表达情况。首先将K88亚单位基因克隆入痘苗转移或体PGJP-5中,得到嵌合质粒P_5-K88,将K99和LT-B亚单位基因分别克隆至痘苗转移载体PJ16中,得到重组质粒PJK-9和PLT-B。再经细胞体内同源重组技术,将以上3种基因分别插入到痘苗病毒天坛株的TK基因中,经5-BUdR的选择压力在人TK^--143细胞中挑选TK^-表型病毒,分别以相应的^(32)P标记的基因片段为探针进行杂交筛选重组病毒株。我们得到7株含K99亚单位基因的重组病毒V-K99(Ⅰ～Ⅷ),5株含K88亚单位基因的重组病毒V-K88(Ⅰ～Ⅴ);1株含LT-B亚单位基因的重组病毒V-LTB,ELISA检测结果表明,在以上3种重组病毒感染的人TK^--143细胞培养液和细胞裂解物中均未测出相应的基因表达产物。以上结果表明这3种基因可能不易在痘苗系统内有效表达。
- 程度胜韩素文方继明
- 关键词：重组痘苗病毒
