青海涛 作品数:15 被引量:65 H指数:5 供职机构: 南方医科大学南方医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 广州市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
结肠癌细胞体外模拟缺氧的相关研究 被引量:5 2011年 目的研究结肠癌细胞SW480与CD133+SW480肿瘤干细胞亚群对CoCl2模拟缺氧的反应性,及缺氧后抗凋亡、血管生成等相关基因mRNA水平表达的变化。方法 Western blotting比较SW480经不同浓度、不同时间CoCl2模拟缺氧后缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的差异;免疫磁珠分选(MACS)CD133+SW480肿瘤干细胞亚群,流式细胞术检测其中CD133+细胞比例,选取稳定SW480细胞HIF-1α表达的最佳CoCl2浓度和时间作用后,Western blotting比较SW480细胞与CD133+SW480肿瘤干细胞亚群HIF-1α的表达差异;观察缺氧对肿瘤干细胞球形成和增殖能力的影响;实时定量PCR比较SW480经CoCl2模拟缺氧后结肠癌干细胞表面标志CD133(PROM1)、抗凋亡基因survivin、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA水平表达的差异。结果 SW480细胞经200μmol/L CoCl2模拟缺氧8 h,HIF-1α表达量最高;经MACS分选所得CD133+SW480细胞中,CD133+细胞比例为85.56±0.89%;CD133+SW480亚群200μmol/L CoCl2模拟缺氧8 h未见HIF-1α表达;CoCl2模拟缺氧培养后CD133+SW480肿瘤干细胞亚群无血清培养肿瘤干细胞球形成率较常规培养明显增强;SW480经CoCl2模拟缺氧其CD133、survivin、VEGF等mRNA表达分别升高1.607±0.103倍(P<0.05)、2.745±0.370倍(P<0.05)、3.798±0.091倍(P<0.05)。结论 (1)CoCl2能够在体外模拟结肠癌细胞缺氧,稳定HIF-1α的表达;(2)结肠癌细胞模拟缺氧后HIF-1α的表达与CoCl2呈浓度和时间依赖性;(3)CD133抗体标记免疫磁珠分选SW480细胞后,CD133+SW480细胞有较高得率和细胞活性;(4)缺氧可使肿瘤干细胞球形成能力增强,CD133+SW480肿瘤干细胞亚群较普通SW480更能够耐受缺氧,肿瘤干细胞具有不同于普通肿瘤细胞的特殊生物学特性;(5)缺氧可改变肿瘤细胞表型,促进其向肿瘤干细胞转化,并能够增强肿瘤抗凋亡能力和血管形成能力。 青青 王媛媛 张绍衡 青海涛 王亚东 陈楚弟 肖冰关键词:结肠癌细胞 氯化钴 缺氧 抗凋亡 血管形成 内镜黏膜下剥离术治疗十二指肠隆起性病变的疗效评估 2020年 目的:评价内镜黏膜下剥离术(ESD)治疗十二指肠隆起性病变的疗效及安全性。方法:回顾性分析2014年8月至2019年12月本院ESD治疗的24例十二指肠隆起性病变的临床资料,分析患者的基线资料、病灶大小及病理特征、并发症发生情况及转归、术后随访情况等资料,评估ESD在十二指肠隆起性病变的安全性及有效性。结果:24例患者在全麻下行十二指肠隆起性病变ESD治疗,手术操作均顺利完成;24例患者中,男性13例,女性11例,平均年龄(47.8±14.0)岁;病变位于十二指肠球部13例,球降交界5例,降部6例;病灶直径1.5(0.7~5.0)cm。1例患者在术中发现创面小部分区域可见穿孔,共3例患者出现术后发热症状。平均术后住院天数(5.6±2.4)d,术后中位随访时间18(1~66)个月,随访期间无复发及狭窄等情况。结论:ESD是治疗十二指肠隆起性病变有效方法之一,可作为十二指肠隆起病变微创治疗的良好选择。 李青原 罗晓蓓 蔡建群 张强 青海涛 龚伟 王震 邢同印 陈湘 黄颖 黄榕 刘思德 韩泽龙关键词:内镜治疗 内镜黏膜下剥离术 并发症 miR-34a抑制SW480细胞增殖的机制研究 被引量:3 2015年 目的探索miR-34a的生物学功能及其对肠癌细胞的抑制作用。方法通过检索miRTar Base和miRBase数据库,筛选出已经实验验证的miR-34a靶基因,使用Cytoscape软件对筛选出的靶基因进行功能富集分类,构建靶基因相互作用网络,用DAVID数据库对miR-34a的靶基因进行信号通路富集分析;免疫印迹技术检测miR-34a对SIRT1、NOTCH1蛋白表达的影响;MTT法检测转染miR-34a对SW480细胞增殖的影响。结果共有56个基因被确定为miR-34a的靶基因,对靶基因进行功能富集分析包含Wnt Signaling Pathway and Pluripotency、Pathways in cancer、MicroRNAs in cancer、Notch signaling pathway等;对靶基因进行信号通路富集分析(p<0.001;FDR<0.05),共富集到8条通路,包含Pathways in cancer、Small cell lung cancer、Colorectal cancer等。免疫印迹结果显示SW480细胞转染miR-34a类似物后,SIRT1、NOTCH1蛋白的表达水平较对照组明显下降(p<0.01);SW480细胞转染miR-34a类似物后生长速度明显减慢,培养5天后检测两组有显著统计学差异(p<0.05)。结论 miR-34a靶基因参与多个信号通路;miR-34a可能通过负性靶向调控SIRT1、NOTCH1基因的表达而抑制SW480细胞的增殖。 赖明广 青海涛 王立生 刘圣活关键词:MIR-34A 生物信息学 SIRT1 NOTCH1 细胞增殖 内镜黏膜下隧道肿瘤切除术(ESTD)与胸腔镜下食管肿物摘除术对于治疗食管黏膜下肿物的术式对比研究 李青原 徐钰源 张强 蔡建群 郑浩轩 青海涛 黄思霖 韩泽龙 李爱民 李跃 龚伟 刘思德共聚焦激光微探头与染色放大内镜对肠道息肉性质判断的比较分析 2011年 目的比较共聚焦激光微探头与染色放大内镜结合腺管开口分型对肠道息肉性质判定的诊断价值。方法2009年12月至2010年1月间接受内镜检查发现肠道息肉的16例患者分别进行染色放大内镜检查,根据腺管开口分型判定息肉性质,然后进行共聚焦激光微探头检查,根据共聚焦激光内镜图像判定息肉性质,以病理结果作为金标准对照,比较二者判断肿瘤性病变的敏感性和特异性。结果在16例患者共发现肠道息肉26颗,与病理相比,染色放大内镜对肿瘤性病变判定的敏感性为94.1%,特异性为77.8%,阳性预测值为88.8%,阴性预测值为87.5%,诊断符合率为88.4%;共聚焦激光微探头对肿瘤性病变判定的敏感性为100.0%,特异性为88.8%,阳性预测值为94.4%,阴性预测值为100.0%,诊断符合率为96.1%,二者相比差异无统计学意义。结论共聚焦激光微探头对肠道肿瘤性病变的判定与染色放大内镜相近,在内镜检查时可作为一种新型、可靠的及时判定息肉性质检查方法。 龚伟 蔡建群 青海涛 刘思德 智发朝 姜泊关键词:结肠息肉 内窥镜 染色放大内镜 胃底腺型胃癌的临床病理特征分析 被引量:7 2020年 目的探讨胃底腺型腺癌(gastric adenocarcinoma of fundic gland type,GA-FG)的临床病理学特征,以提高对该病的认识。方法收集2017年11月至2019年11月南方医科大学南方医院、玉林市红十字医院、龙南县中医院、深圳龙岗区人民医院诊断的8例胃底腺型胃癌患者资料,分析其内镜特征、病理形态特征、免疫组化结果、治疗及预后情况。结果全组男3例,女5例,年龄46~60(中位数56.5,平均数55)岁;多因体检发现胃部肿物入院,均无肿瘤家族史;7例(87.50%)无幽门螺杆菌感染。内镜特征:肿瘤主要位于胃上部(7例,87.50%),均未发现溃疡,背景黏膜均无萎缩表现;病变以隆起性多见(6例,75.00%),多可观察到分支血管(7例,87.50%);NBI放大观察可见病变与周边背景黏膜之间多无明显边界(7例,87.50%),表面微血管多为规则(7例,87.50%),表面微结构排列规则或不规则。瘤体最大径3~15(平均数7.4)mm,累及黏膜层5例(62.50%),浸润黏膜下层2例(浸润深度分别为196μm和454μm),均未发现脉管侵袭。最终病理诊断:胃底腺型胃癌(混合型)3例,胃底腺型胃癌(主细胞为主型)2例,胃底腺型胃癌(黏液颈细胞型)2例,胃底腺型胃癌(壁细胞为主型)1例。6例患者行ESD治疗,1例行EMR治疗,1例为活检病例。7例患者随访时间内均未见复发或转移。结论GA-FG是胃癌的一种新组织学类型,其内镜特征与一般的早期胃癌不太相同。对GA-FG的内镜、病理学特征仍需进一步的研究,以对提高对该病的诊断及鉴别诊断能力。 刘明 谢佳宜 陈振煜 项立 陈春林 覃泳缤 黄世杰 钟琼 文静 张强 青海涛 狄连君 朱加兴 孙琦 陈光勇 王亚东 白杨 刘思德 罗晓蓓 韩泽龙关键词:胃肿瘤 免疫组化 内镜 窄带成像 TMPRSS4基因沉默对胰腺癌SWl990细胞生长及侵袭的影响 被引量:4 2011年 目的观察TMPRSS4基因沉默对人胰腺癌SWl990细胞体外生长增殖和侵袭的影响。方法体外合成4个靶向TMPRSS4基因和阴性对照的真核表达载体,瞬时转染到SWl990细胞,实时定量PCR法检测转染细胞的TMPRSS4mRNA表达。以干扰效率最高的真核表达载体转染SWl990细胞,G418筛选出稳定的TMPRSS4基因沉默的细胞株,蛋白质印迹法检测稳定细胞株TMPRSS4蛋白抑制效率,CCK-8法检测细胞生长抑制率,Transwell小室检测细胞侵袭能力。结果成功构建了稳定下调TMPRSS4表达的细胞株SWl990/psi.TMPRSS4,细胞转染效率为82.9%。与亲本SWl990细胞比较,TMPRSS4mRNA和蛋白水平分别下调了80.1%、60%。SWl990/psi-TMPRSS4组穿膜细胞数为(118.6±13.4)个,显著低于阴性对照组的(157.4±12.9)个和亲本细胞组的(157.0±9.5)个(P值均〈0.01)。SWl990/psi.TMPRSS4组细胞的侵袭抑制率为24.5%。但各组细胞增殖无明显变化。结论成功筛选出稳定下调TMPRSS4表达的细胞株。下调TMPRSS4表达能有效抑制胰腺癌SWl990细胞的侵袭能力,但对细胞增殖无影响。 王焕景 智发朝 赵芯梅 青海涛 伦伟健 周三喜 郭文 程天明 姜泊关键词:胰腺肿瘤 小分子干扰RNA 基因沉默 SW1990细胞 贲门失弛缓症经口内镜下食管括约肌切开术治疗进展 被引量:5 2019年 贲门失弛缓症的年发病率为每10万人1例,患病率为每10万人10例,这使其成为一种比较罕见的疾病[1]。贲门失弛缓症的症状包括吞咽困难(固体和液体食物)、胸痛、体重减轻、烧心等,个别患者可并发吸入性肺炎及反流性咽炎。贲门失弛缓症可以是儿童或老人,年龄呈双峰分布,大多数患者在20~40岁和60~70岁,没有地域、种族和性别差[2-3]。 青海涛关键词:贲门失弛缓症 XIAP通过调节CDK4/CDK6/cyclinD1复合物表达促进肝癌细胞增殖 被引量:8 2011年 目的研究肝癌细胞中XIAP与CDK4/CDK6/cyclin D1复合物之间的调控关系及在肝癌细胞增殖中的作用。方法前期研究用Pathway Array进行肝癌组织异常表达蛋白筛选,后期XIAP特异性抑制剂embelin处理Huh7细胞进行增殖、周期分析。Western blot验证XIAP与CDK4/CDK6/cyclin D1复合物之间的调控关系。结果 Pathway Array提示XIAP与CDK4、CDK6、cyclinD1之间存在联合表达。embelin引起Huh7细胞G1期阻滞、S期分布减少,抑制细胞增殖。XIAP可以调节Huh7细胞G1期蛋白CDK4、CDK6、cyclin D1表达。结论 XIAP通过调节肝癌细胞G1期蛋白CDK4/CDK6/cyclin D1复合物的表达,促使细胞进入G1周期,从而促进其增殖。 车宇芳 叶飞 青海涛 姜泊 张泳关键词:XIAP CDK4 CYCLIN D1 肝癌细胞 增殖 一种新型经鼻内镜与普通胃镜的临床对比研究 被引量:7 2013年 目的探讨Fujifilm EG-530NW经鼻胃镜的临床应用价值。方法295例接受胃镜检查的患者,按检查序号的随机数字表法随机分成普通胃镜组(172例)和新型经鼻胃镜组(123例),观察新型经鼻胃镜组的检查情况,并比较两组患者的血压、心率波动情况以及检查过程中的不适程度差异。结果新型经鼻胃镜组获得的图像与普通胃镜组相似,反转观察无盲区且图像清晰。新型经鼻胃镜组无不适或一般不适的比例明显高于对照组(81.3%比68.6%),差异有统计学意义(P〈0.05);心率波动亦明显小于普通胃镜组[(7.4±11.6)次/min比(11.t±14.6)次/min],差异有统计学意义(P〈0.05);而血压波动两组间比较差异无统计学意义(P〉0.05)。在年龄较大患者(年龄〉50岁)中,新型经鼻胃镜组心率、血压波动均显著小于普通胃镜组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论Fujifilm EG-530NW经鼻胃镜可以获得高质量的图像,较普通胃镜更能减轻患者检查时的不适感,并可减少患者心率与血压的波动,尤其对于年龄较大的患者更具有明显优势,更加安全。 青海涛 彭群 谢露 谭文欣 周丹 智发朝 姜泊关键词:内窥镜检查 经鼻胃镜 普通胃镜