陈文定
- 作品数：6 被引量：58H指数：3
- 供职机构：河南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省基础与前沿技术研究计划项目河南省高校科技创新团队支持计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 潜伏感染期猪伪狂犬病病毒基因组甲基化预测及图谱测定
- 2015年
- 为研究DNA甲基化在PRV潜伏感染中的作用,本研究首先对PRV全基因组甲基化状态进行预测,再采用亚硫酸氢盐PCR测序的方法检测急性期及潜伏感染期IE180及EP0启动子区及转录起始位点附近区域的甲基化状态。结果显示,急性期及潜伏感染期IE180及EP0启动子区及转录起始位点附近区域均存在散在的甲基化位点,并未发现广泛的甲基化区域,与预测结果一致。结果表明,潜伏感染期间PRV基因组发生甲基化的可能性很小,进而可知DNA甲基化在PRV潜伏感染过程中未起到关键的作用。
- 郑关民陈文定余秋颖陈陆张玉娟杨利李双双常洪涛李永涛赵军王川庆
- 关键词：猪伪狂犬病病毒甲基化
- 奶牛隐性乳房炎致病性大肠杆菌AI-2信号分子检测被引量：2
- 2018年
- 为了探索奶牛隐性乳房炎大肠杆菌不同生长时期及不同培养条件下,AI-2信号分子的产生与lux S和pfs转录水平间的相互关系。应用哈维弧菌BB170,检测奶牛隐性乳房炎致病性大肠杆菌不同分离株、不同生长期及不同培养条件下AI-2的活性,应用实时荧光定量PCR检测其AI-2产生水平与lux S基因与pfs基因转录的相关性。结果表明,E285、E80814、W41、E30707和EA701205株均能产生AI-2分子,但产生的AI-2均低于阳性菌BB152; E285在迟缓期、对数前期基本没有AI-2的表达,从对数中期开始AI-2开始大量表达,到对数后期达到顶峰,是阴性对照的12倍,随后下降,到稳定期已下降为阴性对照的3. 6倍。当培养基中添加蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、甘露醇、Na Cl及乳糖时,AI-2的活性均明显提高。实时荧光定量PCR结果显示,E285在不同生长期和不同培养条件时,其AI-2活性的高低与lux S基因转录水平一致,但与pfs基因的转录没有明显关系。提示奶牛隐性乳房炎致病性大肠杆菌分离株均能产生AI-2分子,其AI-2活性与lux S基因转录水平具有高度的相关性,与pfs基因的转录水平无明显相关性,蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、甘露醇、Na Cl及乳糖可促进AI-2合成。
- 曹素芳吴迪孔兰芳皇甫和平陈文定
- 关键词：奶牛隐性乳房炎致病性大肠杆菌LUXS基因
- 猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒、A群轮状病毒和嵴病毒多重RT-PCR检测方法的建立及临床应用被引量：11
- 2013年
- 本研究建立了可同时检测猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis Virus,TGEV)、A群轮状病毒(Group A rotavirus,GARV)和猪嵴病毒(Porcine kobuvirus)的多重RT-PCR方法。检测中,建立的多重RT-PCR方法能够检测到500pg的TGEV、PEDV、GARV和猪嵴病毒等量混合RNA模板,与常规的单一RT-PCR检测结果基本相同(检测TGEV、PEDV、GARV和猪嵴病毒的灵敏性分别为100%、100%、93.33%和96.67%,特异性均为100%)。结果表明,建立的多重RT-PCR方法敏感性和特异性良好,可作为临床上猪病毒性腹泻病因快速、高效的诊断工具。应用该方法对2010-2012年华中地区190份腹泻仔猪样本进行检测,PEDV、TGEV、GARV和猪嵴病毒的阳性率分别为62.11%、0.53%、7.37%和82.11%。混合感染方面,PEDV和猪嵴病毒混合感染率为47.89%,PEDV和GARV混合感染率为4.74%,GARV和猪嵴病毒混合感染率为7.37%,PEDV、GARV和猪嵴病毒混合感染率为4.74%,未发现TGEV与其它3种病毒的混合感染情况。另外,有27份样本中仅检出PEDV(14.21%),57份样本只检出猪嵴病毒(30%)。分析表明,我国自2010年底大面积暴发的病毒性腹泻是多病原混合感染造成的,主要病原为PEDV,猪嵴病毒在其中所起作用尚待进一步验证和研究。
- 霍金耀郑逢梅陈陆余秋颖常洪涛陈文定明星郑关民赵军王川庆
- 关键词：PEDVTGEV
- 奶牛乳房炎大肠杆菌AI-2检测及luxS和pfs基因表达
- 奶牛乳房炎主要是由病原藏生物侵入奶牛乳腺组织引起的炎症。该病发病率高、治愈难度大，导致牛奶产量减少、品质下降，是最终引发临床型乳房炎而导致奶牛淘汰、死亡的重要疫病之一。已报道引起奶牛乳房炎病原微生物主要为金黄色葡萄球菌、...
- 陈文定
- 关键词：奶牛乳房炎大肠杆菌密度感应基因表达
- 文献传递
- 2012-2013年新流行猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及其gE、TK、gD基因序列分析
- 2012年伊始,猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)在河南省部分地区再次暴发。为探寻其中缘由,对2012年3月至201 3年6月间采集的疑似PR病料接种Vero细胞并经PCR鉴定,分离到4株伪狂犬病病毒(Pseu...
- 余秋颖陈陆常洪涛陈文定明星郑关民张玉娟韩莎王川庆
- 关键词：伪狂犬病病毒TKGD基因
- 2012-2013年新流行猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及其gE、TK、gD基因序列分析被引量：37
- 2014年
- 2012年伊始,猪伪狂犬病(pseudorabies,PR)在河南省部分地区再次暴发。为探寻其中缘由,对2012年3月至2013年6月间采集的疑似PR病料接种Vero细胞并经PCR鉴定,分离到4株伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)。同时对该4株病毒的gE、TK和gD基因进行PCR扩增、克隆、测序及分析。序列分析显示:4株PRV河南分离株的gE、TK、gD基因有些核苷酸及氨基酸发生变化,不同于参考毒株;遗传进化分析显示:4株PRV河南分离株形成单独1个小亚群,与中国其他地区分离株之间的亲缘关系较近,与欧洲、南美洲分离株之间的亲缘关系较远,推测此4株河南分离毒株是新型国内流行株。
- 余秋颖常洪涛陈文定陈陆明星郑关民张玉娟韩莎王川庆
- 关键词：伪狂犬病病毒
