郑龙
- 作品数：69 被引量：106H指数：5
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- Flt3L及CCL5对prime/boost免疫策略中抗原特异性免疫应答的增强及抗肿瘤作用
- 2008年
- 目的:研究Flt3L与CCL5作为联合佐剂在prime/boost免疫策略中对HBc抗原特异性免疫应答的增强及抗肿瘤作用。方法:将两种细胞因子质粒与携带HBc抗原的DNA疫苗经肌内注射法共免疫小鼠,免疫3次后再用原核表达的HBc颗粒蛋白或HBcDNA疫苗加强,观察对稳定表达HBcAg的小鼠黑色素瘤细胞(B16-HBc)的生长抑制作用;并分别采用MTT法检测荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖、流式细胞术检测脾CD8+T淋巴细胞中IFN-γ表达、ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清IL-2、IL-4含量及乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测特异性CTL杀伤活性。结果:与对照组相比,佐剂联合DNA疫苗免疫经蛋白加强组(DDP/Adj)显著抑制肿瘤生长;佐剂联合DNA疫苗免疫组(DDD/Adj)及DDP/Adj组均可促进特异性淋巴细胞增殖反应(P<0.05),且DDP/Adj高于DDD/Adj组(P<0.05);DDD/Adj及DDP/Adj组小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞中IFN-γ表达、IL-2表达水平及CTL杀靶活性均高于对照组(P<0.01或P<0.05),IL-4表达水平在各组无显著区别(P>0.05)。结论:在prime/boost免疫策略中,采用Flt3L与CCL5两种细胞因子联合应用可显著促进荷瘤小鼠产生抗原特异性免疫应答及抗肿瘤作用。
- 刘春燕郑龙尤红煜张艳王俊霞宋淑霞
- 关键词：抗原特异性免疫应答
- 实验动物皮肤病原真菌核酸鉴定方法的建立
- 目的选择一种快速、敏感和特异的方法来检测实验动物皮肤病原真菌。方法选取真菌CHS1基因皮肤真菌通用引物CHS11S,CHS11R一种随机引物FM1,利用聚合酶链反应(PCR)扩增三种动物皮肤病原真菌标准株:须毛癣菌、石膏...
- 王俊霞刘福英郑龙尤红煜刘军须丛斌
- 关键词：皮肤真菌真菌实验动物
- 文献传递
- HFJ大鼠与Wistar大鼠用于动脉粥样硬化造模的比较研究被引量：6
- 2013年
- 目的通过高脂喂养和免疫损伤结合的方法,建立HFJ近交系大鼠和Wistar封闭群大鼠动脉粥样硬化动物模型并进行比较分析。方法选择HFJ近交系和Wistar封闭群大鼠,分别随机分为模型组和正常组,正常组给予基础饲料饲喂,模型组给予高脂饲料饲喂,并采用牛血清白蛋白(40mg/kg)和卵清白蛋白(2.5mg/kg)进行免疫损伤,并辅以维生素D3(25万U/kg)灌胃,饲养90d后测定血脂水平、血液生化指标、观察病理变化和血管内皮生长因子(VEGF)免疫组化情况。结果 (1)HFJ和Wistar大鼠正常组相比较,前者TG、TC和LDL-C水平高于后者(P<0.05),HFJ大鼠模型组LDL-C含量明显高于Wistar大鼠(P<0.05);(2)心肌损伤指标,HFJ和Wistar大鼠模型组均较正常组心肌激酶(CK)、心肌激酶同工酶(CK-Mb)明显升高;(3)HE染色发现与Wistar大鼠模型组相比,HFJ近交系大鼠斑块形成更为明显,明显处于动脉粥样硬化病理Ⅲ期,可见纤维帽形成,纤维帽下具有典型的胆固醇结晶裂隙和泡沫细胞,中层平滑肌排列紊乱;(4)免疫组化法测定主动脉弓VEGF蛋白的表达,HFJ大鼠模型组较Wistar大鼠表达升高(P<0.05)。结论成功建立了HFJ大鼠动脉粥样硬化疾病动物模型,与Wistar大鼠相比HFJ大鼠模型特点更为显著,可为动脉粥样硬化研究提供一新的实验动物品系。
- 连伟光郑龙尤红煜刘健敏张东明刘福英王俊霞
- 关键词：动脉粥样硬化动物模型免疫损伤
- AFP表达调控载体对肝癌模型的靶向治疗作用被引量：1
- 2013年
- 目的观察甲胎蛋白(AFP)表达调控载体pAFP-P53-EGFP对AFP表达阳性肝癌模型靶向治疗作用。方法以人肝癌HepG2(AFP阳性)、人肝癌SMMC7721(AFP阴性)细胞于BALB/c-nu裸小鼠右腋皮下荷瘤,14d成瘤,免疫组化检测AFP。将构建好的pAFP-EGFP和pAFP-P53-EGFP重组质粒于肿瘤内注射,观察肿瘤体积变化,通过免疫组化观察p53在HepG2肿瘤中的特异性表达及对肿瘤细胞的杀伤作用。结果荷HepG2、SMMC7721细胞株裸鼠14d皮下肿瘤生长良好,且肿瘤体积均为500mm3左右,经HE染色证实造模成功。同时,AFP免疫组化结果显示接种HepG2细胞的肿瘤组织AFP表达阳性,SMMC7721细胞的肿瘤组织AFP表达为阴性。经pAFP-EGFP和pAFP-P53-EGFP重组质粒治疗后,p53的免疫组化分析结果显示接种HepG2细胞的裸鼠pAFP-P53-EGFP治疗组p53表达量显著高于其他各组,可见明显细胞凋亡现象,且肿瘤体积较对照组减小。结论含AFP基因调控序列的pAFP-P53-EGFP载体可专一性地作用于AFP阳性肝癌细胞,引起肝癌细胞周期阻滞和凋亡。
- 张焕铃侯洁王俊霞尤红煜郑龙连伟光刘树锋
- 关键词：AFP启动子P53细胞周期阻滞
- HFJ和Wistar大鼠脂肪肝及胰岛素抵抗动物模型的比较被引量：1
- 2012年
- 目的建立近交系HFJ大鼠和封闭群Wistar大鼠脂肪肝胰岛素抵抗动物模型及比较其生物学特性。方法雄性HFJ大鼠和Wistar大鼠,分别随机分为模型组和正常组,模型组喂养高脂饮食,正常组喂养普通饮食,两组脂肪分别占摄入能量的44.2%和19.2%,共饲养12周。每周称体质量,测定血糖、甘油三酯、胆固醇、ALT、AST、HDLC、LDLC和血胰岛素水平。实验期末处死动物摘取肝脏并称质量,计算肝指数;鼠肝脏用10%甲醛固定,石蜡包埋切片,HE染色,光镜下评估肝脂肪变性和炎症活动情况。结果镜下可见,HFJ和Wistar大鼠模型组肝细胞均呈现弥漫性脂肪变性,小叶内可见炎症细胞浸润,HFJ比Wistar脂肪变性较重,对照组肝脏均未见异常。两种动物的模型组ALT、AST、肝指数、HOMA-IR指数均显著高于其正常组,HFJ和Wistar种系间各指标的差异无显著性;HFJ大鼠模型组体重和正常组体重具有显著性差异(P<0.01),而Wistar大鼠模型组体重与正常组体重间无显著差异(P>0.05);HFJ大鼠TG和TC含量均显著高于Wistar大鼠。结论通过高脂饮食喂养成功建立了HFJ大鼠和Wistar大鼠脂肪肝与胰岛素抵抗疾病动物模型,与Wistar大鼠比较,HFJ大鼠具有自发性高血脂特征,造模更易成功,可为胰岛素抵抗和脂肪肝的发病机制研究、防治高血脂药物筛选提供一种新的实验动物。
- 郑龙连伟光李建辉张焕铃王俊霞刘军须蔡月花刘福英
- 关键词：胰岛素抵抗脂肪肝动物模型
- 甲型血友病的基因诊断研究被引量：3
- 2014年
- 目的建立甲型血友病的基因诊断方法。方法对33例甲型血友病患者以一期法检测血浆凝血因子FⅧ(F8)活性。采用长距离聚合酶链式反应扩增法(LD-PCR)进行FⅧ内含子22倒位检测,并对反应体系进行优化;聚合酶链式反应(PCR)技术检测内含子1倒位,凝胶成像技术分析扩增产物。捕获测序技术检测是否存在其他突变类型。结果 33例患者的FⅧ活性检测结果均小于1%,为重型;LD-PCR技术检测出13例患者存在Int22倒位,倒位发生率为39.4%;Int1倒位患者1人,发生率3%;对13例内含子22倒位患者进行测序比对,未发现其他基因突变。结论 LD-PCR技术和多重PCR技术可以有效的检测重型甲型血友病FⅧ的基因倒位。
- 尹璐宋淑霞连伟光栗彦宁郑龙刘健敏尤红煜王俊霞
- 关键词：血友病A
- 对携带HCC表位的HBc病毒样颗粒负载的DC疫苗的免疫评价
- 目的探讨携带肝细胞癌（HCC）表位的嵌合蛋白颗粒HBc-VLPs负载小鼠BMDCs制备的DC疫苗,免疫小鼠后诱导抗原特异的细胞免疫应答和抗肿瘤效应。方法制备HLA-A2转基因小鼠来源的BMDCs,将三种带有高表达于HCC...
- 张艳郑龙宋淑霞魏林
- 关键词：肿瘤模型
- 文献传递
- HFJ和MIJ近交系大鼠RAPD特征与比较研究
- 目的:利用人工合成的PCR随机引物，对本单位实验动物中心培育的两个近交系大鼠HFJ和MIJ基因组DNA进行扩增，建立HFJ和MIJ大鼠RAPD扩增特征图谱;选择常用近交系大鼠Lewis和F344作为对照品系，观察HFJ和...
- 刘福英李建辉郑龙王俊霞刘军须蔡月花张焕铃史荣珍
- 关键词：RAPD多态性
- 文献传递
- 罗格列酮诱导大鼠脂肪间充质干细胞分化成棕色样脂肪细胞的研究
- 目的 探讨罗格列酮对大鼠不同部位脂肪组织中脂肪间充质干细胞(AD-MSCs)诱导分化成棕色样脂肪细胞的影响.方法 分离大鼠背部肩胛间区棕色脂肪组织(iBAT)、双侧下肢腹股沟皮下白色脂肪组织(sWAT)和附睾白色脂肪组织...
- 郑龙刘健敏张东明王俊霞范晓飞刘树锋
- 关键词：罗格列酮
- 精子发生障碍患者Y染色体微缺失与染色体核型分析
- 目的 分析石家庄地区男性精子发生障碍患者染色体核型及Y染色体微缺失状况.方法 273例精子发生障碍患者临床表现为无精子症或严重少、弱精子症.取外周血进行染色体核型分析,性激素测定；同时,提取全血DNA,应用多重PCR反应...
- 张焕铃乜照燕吕翠婷贾新转王俊霞甄秀丽秦鸣欣郑龙张娜连伟光刘健敏尤红煜郭丽娜
- 关键词：男性不育症染色体核型分析Y染色体微缺失
