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郑慧玲: 作品数：26 被引量：26H指数：3; 供职机构：广东医学院基础医学院生物化学与分子生物学研究所更多>>; 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省高等学校自然科学研究重点项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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重组金属硫蛋白2A质粒的构建与表达被引量：2: 2012年; 目的构建重组金属硫蛋白2A(MT-2A)原核表达质粒,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,为进一步研究MT-2A奠定基础。方法从人骨骼肌细胞cDNA文库中PCR扩增MT-2A基因DNA序列,构建重组表达质粒MT2A-pET32a,PCR与DNA测序法鉴定插入序列;重组细菌用IPTG诱导表达,His-bind亲和层析柱纯化MT-2A蛋白,Western blotting鉴定蛋白特性。结果扩增获得的MT-2A基因片段长186bp,DNA测序证实MT2A-pET32a重组质粒构建正确;表达的融合蛋白相对分子质量约为29×103,Western blotting证实为目的蛋白。结论成功构建了重组原核表达质粒MT2A-pET32a,在大肠埃希菌内诱导表达并纯化获得MT-2A。; 刘振杰赵树勇周静骆艳婷郑慧玲陈维春熊兴东徐宁刘新光; 关键词：基因表达大肠埃希菌

重症脑卒中治疗方法探讨(附4例报告)被引量：3: 2014年; 目的：探讨在无法按照指南治疗的情况下，对于重症脑卒中患者，利用人体自身生理水代谢功能，辅助脱水治疗策略的临床疗效。方法对4例重症脑卒中的患者，采取保守治疗，予稳定内环境、脱水剂，并利用患者自身生理水代谢功能脱水，观察其临床疗效。结果经过4～6周的综合治疗，4例重症脑卒中患者均缓慢度过危险期，并恢复意识。结论保守治疗重症脑卒中患者以生理性水代谢功能辅助脱水，不失为有效治疗手段。; 陈松林梁茵颖朱荣兰姚璐刘小云张常然郑慧玲; 关键词：重症脑卒中脑梗死脑干出血

AHA1蛋白与A型核纤层蛋白在细胞中的共定位被引量：1: 2013年; 目的构建AHA1与荧光蛋白GFP融合的真核表达载体,并在HEK293细胞中进行表达,然后检测AHA1重组蛋白在细胞中的表达,以及与A型核纤层蛋白在细胞中的共定位。方法提取HEK293细胞中总RNA,随之逆转录成cDNA,然后设计引物扩增AHA1的编码序列后构建到pEGFP-N1载体中,转染HEK293细胞后,通过免疫印迹检测重组AHA1蛋白在细胞中的表达,采用激光共聚焦显微镜观察重组AHA1蛋白与A型核纤层蛋白在细胞中的共定位。结果经PCR和DNA限制性内切酶鉴定,最后通过DNA测序并进行序列相似性分析比对,确定pEGFP-N1-AHA1重组质粒构建成功;在HEK293细胞中转染pEGFP-N1-AHA1重组质粒后,检测发现,重组AHA1蛋白在细胞中已经成功表达,并且部分AHA1蛋白与核纤层蛋白A共定位于细胞的核膜上,但是AHA1蛋白与核纤层蛋白C在细胞中不能共定位。结论成功构建了AHA1与GFP荧光蛋白的重组质粒,并且AHA1蛋白与核纤层蛋白A在细胞中能够共定位,而不与核纤层蛋白C共定位。; 蒋智文陈维春郑慧玲周静刘新光; 关键词：免疫印迹

AHA1蛋白与核层蛋白相互作用并下调p53的表达: 本研究通过研究AHA1蛋白在细胞中的分布以及与核层蛋白的相互作用,进而探究AHA1对核层蛋白和p53等的影响。指出，核层蛋白前体和核层蛋白在核膜上的堆积，诱使AHA1向胞核聚集，并且下调p53，进而对细胞衰老的进程进行调...; 蒋智文周静陈维春郑慧玲刘新光; 关键词：细胞衰老代谢调控; 文献传递

Zmpste24基因缺失与早老症被引量：3: 2016年; 衰老是一种生理完整性丧失,功能受损,疾病和死亡风险增加的过程。早老症(HGPS)是一种加速化的衰老疾病,是研究人类正常衰老理想的疾病模型。由LMNA基因突变产生prelamin AΔ50在细胞内累积是造成早老症的主要原因,早老症病人表现出寿命急剧缩短,老化特征明显的现象,例如脱发、皮下脂肪减少、骨质疏松以及早逝。锌金属蛋白酶Zmpste24是prelamin A加工成为成熟lamin A蛋白的关键酶。敲除Zmpste24基因的小鼠表现出与早老症高度一致的衰老表型,同时也存在非常相似的发病机制,如染色质异常、DNA损伤和干细胞功能缺失等。Zmpste24缺失小鼠作为典型的早老模型小鼠因其衰老周期短,衰老特征明显而获得广泛应用。本文总结了以Zmpste24缺失早老小鼠为模型取得的早老相关分子机制的研究进展,以及抗衰老策略的最新发现。; 王登川郑慧玲刘新光; 关键词：早老症

Prelamin A相互作用蛋白Narf的鉴定和表达分析被引量：1: 2011年; 目的:探讨A型核纤层蛋白前体(prelamin A)在细胞内堆积造成细胞早老的机理,筛选了prelamin A相互作用蛋白并研究其在早老细胞中的表达情况。方法:以prelamin A的C末端区域为诱饵蛋白,采用酵母双杂交方法从人骨骼肌cDNA文库中筛选prelamin A相互作用蛋白。构建了prelamin A识别因子(Narf)与绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-Narf,与红色荧光蛋白-prelamin A融合表达质粒pDsRed-PLA共转染HEK293细胞,激光共聚焦显微观察共定位情况。Western blotting检测Narf在衰老表型HEK293PLA细胞的表达情况。结果:筛选得到包括Narf在内的7个候选相互作用蛋白。Narf与prelamin A能相互作用并共定位于核纤层,在prelamin A过表达的HEK293PLA细胞中Narf表达没有升高。结论:Narf在细胞内与prelamin A相互作用,且表达量不受后者影响。; 陈维春刘振杰蒋智文彭琪袁源郑慧玲刘新光; 关键词：酵母双杂交衰老共定位

癌-睾丸抗原SSX2在肝细胞癌中的表达研究: 2014年; 目的检测癌-睾丸抗原SSX2在肝细胞癌组织中的表达。方法应用RT-PCR技术,对40例肝细胞癌的癌组织及相应癌旁组织进行SSX2基因的mRNA检测。结果肝细胞癌组织中SSX2mRNA表达阳性率为27.5%(11/40),而相应的癌旁组织无SSX2 mRNA表达阳性率为0(0/40),两组比较差异有统计学意义(P<0.001)。统计学分析显示SSX2表达与AFP阳性率、HbsAg阳性率、病理分级、肝细胞癌肿瘤大小、肝细胞癌是否伴有肝硬化的情况等相关的临床指标均无关(P>0.05)。结论 SSX2在HCC中呈低频率的表达。; 黎鹏郑慧玲韦立军; 关键词：肝细胞癌癌-睾丸抗原逆转录-聚合酶链反应 HEPATOCELLULAR SYNOVIAL SARCOMA

红斑性肢痛症7例临床治疗: 2014年; 目的评价改善循环、营养神经方法治疗红斑肢痛症的疗效和安全性。方法 7例临床诊断的红斑肢痛症患者给予营养神经:水溶性维生素1支(0.486 g/支),iv drip,qd,奥德金1.2 g,iv drip,qd;改善循环:参麦60 ml iv drip,qd,的方法治疗,约3周后,观察其疗效和安全性。结果 7例红斑肢痛症的患者,经过约3周的治疗,其临床症状消失;治疗前后检查血尿常规,肝肾功能,心电图,未见异常。跟踪观察3月,1例患者症状复发,但症状较治疗前减轻。重复治疗2周,患者症状完全缓解,跟踪观察3月,患者症状未再复发。结论改善循环、营养神经方法治疗红斑肢痛症安全有效。; 陈松林梁茵颖朱荣兰姚璐刘小云张常然郑慧玲; 关键词：红斑肢痛症营养神经

重组质粒AHA1的构建和表达及对HeLa细胞周期的影响: 2013年; 目的构建AHA1的真核表达质粒,并在HeLa细胞中进行表达,然后检测过表达的AHA1重组蛋白对HeLa细胞周期的影响。方法提取HeLa细胞中总RNA,逆转录成cDNA后,设计引物扩增AHA1基因的编码序列后构建到pCMV-HA真核表达载体中,转染HeLa细胞后使用HA标签抗体通过免疫印迹检测AHA1融合蛋白在细胞中的表达,最后分别使用流式细胞仪和CCK-8方法检测HeLa细胞的周期和增殖的变化。结果 pCMV-HA-AHA1重组质粒经PCR和DNA限制性内切酶酶切鉴定,最后通过DNA测序并经序列相似性比对,确定AHA1重组质粒构建成功;在HeLa细胞中转染pCMV-HA-AHA1重组质粒后,免疫印迹结果显示AHA1融合蛋白在细胞确已经实现过表达,经流式细胞仪和CCK-8方法检测发现,过表达的AHA1蛋白对HeLa细胞的周期和增殖影响不大。结论成功构建了pCMV-HA-AHA1重组质粒,并且在HeLa细胞成功过表达,且过表达的AHA1蛋白对HeLa细胞的周期和增殖影响不大。; 蒋智文郑慧玲陈维春刘新光; 关键词：HELA细胞免疫印迹法细胞周期

真核表达载体pEGFP-N1-kin17的构建及其在Zmpste24^(-/-)小鼠胚胎成纤维细胞内的表达: 2014年; 目的构建人kin17基因真核表达载体pEGFP-N1-kin17,将载体转染至野生型及Zmpste24基因缺失的小鼠胚胎成纤维上皮细胞,荧光显微镜观察kin17蛋白表达情况。方法用高保真DNA聚合酶,从pCMV-kin17载体中扩增获取人kin17 cDNA编码序列,将其克隆至pEGFP-N1载体中,经酶切、连接、转化后,挑取阳性克隆进行菌液进行PCR、菌液质粒双酶切及测序鉴定;将成功构建的GFP-kin17表达载体转染Zmpste24-/-MEFs,荧光显微镜观察kin17蛋白的核定位情况。结果 pEGFP-N1-kin17转化细菌克隆测序结果完全正确;将载体转入MEFs后,可以通过荧光显微镜观察到kin17蛋白的表达。结论成功构建GFP融合的kin17真核表达载体,该载体为kin17蛋白的研究提供工具。本实验中载体pEGFP-N1-kin17在野生型和Zmpste24-/-MEFs中均成功表达。; 郑慧玲崔红晶余磊黄颖刘新光; 关键词：GFP 小鼠胚胎成纤维细胞

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