车茜
- 作品数：17 被引量：38H指数：5
- 供职机构：动物疫病与人类健康四川省重点实验室更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”四川省重点科技攻关项目四川省重点科学建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 小鹅瘟病毒VP3基因疫苗的构建及其诱导小鼠和鹅中和抗体的初报被引量：9
- 2008年
- PCR 扩增小鹅瘟病毒(GPV)CHv 株 VP3基因并克隆入 pMD 18-T-Simple 载体,亚克隆正向插入到真核表达质粒 pcDNA3.1(+)CMV 启动子下游多克隆位点,经 PCR 和HindⅢ与 BamH Ⅰ双酶切鉴定表明成功构建了 GPV VP3基因疫苗(pcDNA3.1-GPV-VP3)。该疫苗以200μg/只肌注免疫 Balb/c 小鼠和鹅,同时分别设肌注 PBS 和 pcDNA3.1(+)作为对照,于免疫后第30、45、60、75、90、105天应用鸭胚原代成纤维细胞(DEF)进行微量中和试验检测小鼠和鹅血清抗100 TCID50 GPV 的抗体效价。结果表明,pcDNA3.1-GPV-VP3免疫小鼠第30天可检测到抗 GPV 的中和抗体,抗体效价缓慢上升至90天达到高峰(平均1:135.8)后下降,105天仍高于75天;免疫鹅的中和抗体效价呈现与小鼠类似的规律,第90天达到高峰(平均1:98.5)。因此,pcDNA3.1-GPV-VP3具有良好的免疫原性,肌注免疫小鼠和鹅后能够诱发产生抗 GPV 的中和抗体,有进一步开展临床研究和应用的前景。
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- 关键词：小鹅瘟病毒VP3基因真核表达质粒基因免疫中和抗体
- 小鹅瘟病毒VP3真核表达质粒与弱毒疫苗诱导鹅体免疫应答的比较被引量：6
- 2011年
- 【目的】比较小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)和弱毒疫苗免疫鹅体内的免疫应答,以期为进一步研究和阐明pcDNA-GPV-VP3免疫发生机理、免疫持续期等提供基础数据。【方法】将pcDNA-GPV-VP3和小鹅瘟弱毒疫苗分别免疫30日龄四川白鹅,用免疫组织化学方法检测免疫鹅体内GPV抗原的分布,用淋巴细胞增殖实验和间接ELISA分别检测免疫鹅的细胞免疫水平和血清抗体滴度,比较GPV基因疫苗与弱毒疫苗诱导鹅体免疫应答的能力。【结果】①弱毒疫苗组于免疫鹅的心、肝、脾、肺、肾、法氏囊、胸腺、哈氏腺、十二指肠、空肠、回肠、直肠、盲肠、胰腺、大脑及注射部位肌肉均中检测到GPV抗原;基因疫苗组于免疫鹅的心、十二指肠、空肠、回肠、直肠、盲肠及注射部位肌肉中检测到GPV抗原。②弱毒疫苗免疫雏鹅外周血T淋巴细胞14 d后对ConA的反应开始增强,35 d达到最高值后下降;基因疫苗免疫雏鹅外周血T淋巴细胞OD值先下降,14 d后开始上升并高于空白质粒对照鹅和PBS对照鹅,35 d时达最大值,以后又逐渐下降,第21-63天极显著(P<0.01)高于PBS对照鹅和空白质粒对照鹅,第21-63天时极显著(P<0.01)高于弱毒疫苗免疫鹅。③弱毒疫苗免疫鹅血清抗体第3天开始高于PBS对照鹅,第28天达到最大值后逐渐下降;基因疫苗免疫鹅血清体从第14天开始高于PBS对照组,第28天达最大值,第21-217天显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于PBS和空白质粒对照鹅;基因疫苗免疫鹅血清抗体除第28天极显著(P<0.01)高于GPV弱毒疫苗免疫鹅外,其余时间与弱毒疫苗免疫鹅差异不显著。【结论】pcDNA-GPV-VP3免疫雏鹅后能在免疫部位皮肤、心肌和各肠段中表达并能够诱导鹅体产生良好的细胞免疫和体液免疫,基因疫苗诱导鹅体产生免疫应答的能力优于弱毒疫苗,结果为阐述pcDNA-GPV-VP3的免疫机制和临床应用提供了数据资料。
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- 关键词：小鹅瘟病毒基因疫苗
- 小鹅瘟病毒VP3基因疫苗的构建及其诱导小鼠中和抗体初报
- 引言/目的：小鹅瘟(Gosling Plague,GP)是由鹅细小病毒(Goose Parvovirus,GPV)引起的一种严重危害养鹅业的高度接触性传染病。为了认识 VP3基因疫苗的免疫效果,本研究在构建了小鹅瘟病毒 ...
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- 文献传递
- 小鹅瘟病毒VP3基因疫苗诱导雏鹅细胞免疫喝体液免疫的研究
- 车茜
- 关键词：基因枪轰击肌肉注射小鹅瘟病毒VP3基因疫苗细胞免疫体液免疫
- 基因枪轰击和肌注不同剂量小鹅瘟病毒VP3基因疫苗在雏鹅体内的表达的时相的比较研究
- 本文将 GPV-VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别以每只200μg、100μg、50μg肌肉注射,6μg、 3μg、1μg基因枪轰击的方法免疫30日龄四川白鹅,以生理盐水和空载体质粒 pcDNA3.1(+)...
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- 关键词：基因枪轰击肌肉注射雏鹅
- 文献传递
- 基因枪轰击和肌肉注射小鹅瘟病毒VP3基因疫苗诱导小鼠免疫发生的比较研究
- 将本实验室构建的小鹅瘟 VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别按每只6、3、1μg基因枪轰击和200、100、50μg肌肉注射免疫 BALB/c 小鼠,以 pcDNA3.1(+)和生理盐水为对照。并于免疫后3、...
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- 关键词：基因枪轰击肌肉注射小鼠
- 文献传递
- 基因枪轰击小鹅瘟病毒VP3基因疫苗诱导鹅体内体液免疫的机制
- 2009年
- 将小鹅瘟病毒VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别以每只1μg、3μg和6μg的基因枪轰击免疫30日龄四川白鹅,用免疫组织化学法检测pcDNA-GPV-VP3在鹅体内各组织器官表达情况;用间接ELISA检测免疫鹅血清中GPV抗体滴度。结果:①各剂量免疫组1d时能在免疫部位皮肤,3d时能在心脏/十二指肠/空肠/盲肠/肝脏,7d时在回肠/直肠检测到pcDNA-GPV-VP3的表达;7d表达最多;表达可持续至35～63d;表达产物的数量和表达持续时间总体规律为6μg组>3μg组>1μg组。②免疫后第7d血清抗体开始升高,21d达到最大值,免疫后第14～217d极显著(P<0.01)高于PBS和空白质粒对照;体液免疫效果存在一定的剂量依赖。研究表明,pcDNA-GPV-VP3基因枪轰击免疫雏鹅后能在免疫部位皮肤、心肌、肝脏和各肠段中表达并能够诱导雏鹅产生良好的体液免疫。
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- 关键词：基因枪轰击雏鹅
- 小鹅瘟病毒VP3基因疫苗与弱毒疫苗诱导小鼠免疫应答的比较
- 将本实验室构建的小鹅瘟 VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别按每只6μg基因枪轰击和 100μg肌肉注射免疫 BALB/c 小鼠,小鹅瘟弱毒疫苗按每只100 μL免疫 BALB/c 小鼠,以 pcDNA3.1...
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- 关键词：免疫应答小鼠
- 文献传递
- FQ-PCR检测肌注小鹅瘟病毒VP3基因疫苗在雏鹅体内的动态分布被引量：1
- 2007年
- 将30日龄四川白鹅分别肌肉注射接种50μg、100μg和200μg的GPV-VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3),以生理盐水和空载体质粒pcDNA3.1(+)为对照,于免疫接种后1h、12h、1d、3d、7d、21d、35d、63d、105d和217d采集全血以及各组织器官,用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测pcDNA-GPV-VP3在雏鹅体内的动态分布。结果表明:①pcDNA-GPV-VP3各剂量免疫雏鹅1h即可在各组织中被检测到,其中注射部位含量最高,肝、淋巴器官(脾、法氏囊、胸腺、哈氏腺)含量较高;②到217d时,50μg组免疫雏鹅各个组织器官内仍检测到pcDNA-GPV-VP3的存在,但多数组织器官中的含量比1h时约少了103～104;③血液中pcDNA-GPV-VP3的含量较少,且1h～217d各时间点的差异不显著(P≥0.05);④不同剂量pcDNA-GPV-VP3免疫雏鹅各组织中的含量呈现的总体规律为200μg组>100μg组>50μg组,但差异不显著(P≥0.05)。因此,pcDNA-GPV-VP3免疫雏鹅后1h时可分布至雏鹅体内各组织器官中并持续存在217d以上。
- 黎敏程安春汪铭书韩新锋刘晓东卢菲车茜陈孝跃
- 关键词：FQ-PCR肌肉注射雏鹅
- 基因枪轰击和肌注小鹅瘟VP3基因疫苗在鹅体内的动态分布规律
- 本文将 GPV-VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别以每只200μg、100μg、50μg肌肉注射,6μg、 3μg、1μg基因枪轰击的方法免疫30日龄四川白鹅,以生理盐水和空载体质粒 pcDNA3.1(+)...
- 黎敏程安春汪铭书韩新锋刘晓东卢菲车茜陈孝跃
- 关键词：FQ-PCR基因枪轰击肌肉注射雏鹅
- 文献传递
