赵海龙
- 作品数:22 被引量:46H指数:4
- 供职机构:石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金兵团博士基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生建筑科学更多>>
- 少孢节丛孢菌胞外丝氨酸蛋白酶P186基因的克隆、序列分析及表达被引量:1
- 2014年
- 根据GenBank中少孢节丛孢菌丝氨酸蛋白酶P186基因序列设计特异性引物,运用RT-PCR扩增获得目的基因片段,构建重组表达质粒pET32a-P186,转化到大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG进行了诱导表达。结果表明,P186基因cDNA全长为1224 bp,编码407个氨基酸,其中第1~21位为信号肽序列,氨基酸序列的第156~167位、192~202位、343~353位分别是天冬氨酸(Asp160)、组氨酸(His192)、丝氨酸(Ser345)活性位点所在区域,属于Subtilase家族,包括2个潜在的N-联糖基化位点( Asn249、Asn342)及与底物结合的S1区( SBP) Ser251 Ile252 Gly253和Ala277 Ala278 Gly279。SDS-PAGE分析结果显示,表达产物的分子质量约为62 kDa。 Western Blot 分析结果表明,P186重组蛋白可以与抗蛋白粗提液多克隆抗体发生反应。为了揭示少孢节丛孢菌捕食线虫的分子机制,首次克隆并表达了少孢节丛孢菌丝氨酸蛋白酶P186基因,为进一步研究丝氨酸蛋白酶P186的生物学功能奠定了基础。
- 赵海龙孟庆玲乔军陈双庆王国超谢堃胡政香才学鹏
- 关键词:少孢节丛孢菌克隆
- 绵羊肺炎支原体HSP70基因的克隆、表达及免疫原性分析
- 引言根据GenBank登录的MO HSP70基因序列,设计特异性引物对MO新疆分离株HSP70基因进行扩增,克隆入T载体中测序。将HSP70基因亚克隆入表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达载体pGEX4T-1-HS...
- 胡政香乔军孟庆玲赵海龙陈诚赞哈尔·波拉提才学鹏陈创夫
- 捕食线虫性真菌的分离鉴定及氨基酸对其捕食器诱导效应被引量:1
- 2014年
- 为了解新疆阿勒泰地区的捕食线虫性真菌分布情况,采用玉米粉琼脂培养基(CMA)培养分离阿勒泰地区土壤中的捕食线虫性真菌,通过对纯化后菌株的形态学观察和分子生物学分析,鉴定出5株少孢节丛孢属真菌和1株圆锥节丛孢菌。另外用质量浓度分别为0.5,0.05,0.005 g/L的L-苯丙氨酸、L-色氨酸、L-蛋氨酸和L-缬氨酸对已分离的圆锥节丛孢菌AS3株进行捕食器生成的诱导反应,发现各组氨基酸对捕食器的产生均有诱导效应,但质量浓度为0.05 g/L的L-苯丙氨酸诱导产生的捕食器总数最多。为利用捕食线虫性真菌进行生物防控奠定了理论基础。
- 陈双庆孟庆玲乔军赵海龙王俊伟王为升罗建勋才学鹏
- 关键词:捕食线虫性真菌氨基酸
- 绵羊肺炎支原体溶血素TlyC基因的克隆及分子特征分析被引量:2
- 2014年
- 根据GenBank报道的绵羊肺炎支原体(MO)基因序列,设计特异性引物,对MO新疆分离株(MO XJ)溶血素TlyC基因进行克隆及测序;并对该基因及其编码蛋白进行分子特征分析,并与其他支原体相应序列进行同源性分析,构建该基因系统进化树。结果表明,TlyC基因全长为1 239bp,编码426个氨基酸,其中第1-23位氨基酸残基为信号肽,编码区含有跨膜结构域和CBS结构域,二级结构以α-螺旋为主。系统发生分析表明,MO与猪肺炎支原体232株和絮状支原体的相应序列亲缘关系较近,而与其他种支原体的亲缘关系较远。研究首次克隆了MOTlyC基因,为了解MOTlyC生物学功能及其致病中的作用奠定了基础。
- 胡政香孟庆玲乔军赵海龙马玉刘田莉赞哈尔.波拉提才学鹏陈创夫
- 关键词:绵羊肺炎支原体基因克隆
- ncRNA Rli60在单核细胞增生李斯特菌环境应激及生物膜生成中的调控作用
- [前言]单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种兼性胞内寄生的革兰氏阳性致病菌,可以引起人和动物流产、脑膜脑炎、败血症等症状,是一种对公共卫生安全和畜牧业生产具有较大危害的人兽共患...
- 彭叶龙乔军孟庆玲谢堃赵海龙宋雪梅陈创夫
- 关键词:单核细胞增生李斯特菌NCRNA环境应激生物膜
- ncRNA rli60在单核细胞增生李斯特菌环境应激及生物膜生成中的调控作用
- 引言单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种兼性厌氧胞内寄生革兰氏阳性致病菌,能引起人和动物脑膜脑炎、流产、败血症等症状,引起较高的死亡率,对公共卫生安全及畜牧业生产造成了严重的威...
- 彭叶龙乔军孟庆玲谢堃赵海龙宋雪梅陈创夫
- 单核细胞增生李斯特菌非编码RNA rli87基因缺失株的构建、鉴定及其生长特性初步研究被引量:4
- 2015年
- 拟构建单核细胞增生李斯特菌(LM)非编码RNArli87基因缺失株,对其进行分子鉴定,分析rli87基因缺失对LM生长的影响。用融合PCR方法构建LM-SB5 rli87基因缺失突变体,并构建pKSV7-Δrli87穿梭载体,将其转化入LM-SB5感受态细胞,利用温度(42℃)和氯霉素(10μg·mL-1)的抗性双重压力来实现同源重组,筛选同源重组菌进行分子鉴定,测定缺失株与母源野毒株37℃条件下生长曲线。结果显示:PCR和测序结果证实成功获得了LM-Δrli87重组菌。通过25代的连续传代,PCR鉴定结果显示,该缺失株具有良好的遗传稳定性。与野毒株进行对比,在37℃条件下缺失株与野毒株的生长差异不显著(P>0.05)。非编码RNArli87基因在37℃条件下对LM生长没有明显的调控作用。
- 谢堃乔军孟庆玲彭叶龙赵海龙马玉陈诚才学鹏陈创夫
- 关键词:同源重组
- ncRNA Rli60在单核细胞增生李斯特菌环境应激及生物膜生成中的调控作用
- 【前言】单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes, LM)是一种兼性胞内寄生的革兰氏阳性致病菌,可以引起人和动物流产、脑膜脑炎、败血症等症状,是一种对公共卫生安全和畜牧业生产具有较大危害的人兽共...
- 彭叶龙乔军孟庆玲谢堃赵海龙宋雪梅陈创夫
- 关键词:单核细胞增生李斯特菌NCRNA环境应激生物膜
- 文献传递
- 绵羊肺炎支原体新疆分离株黏附素与溶血素A基因的克隆及序列分析被引量:4
- 2015年
- 根据Gen Bank报道的绵羊肺炎支原体(MO)基因组序列,设计特异性引物,对MO新疆分离株黏附素基因和溶血素A基因进行PCR扩增、克隆及测序;应用分子生物学软件对该基因及其编码蛋白进行分子特征分析,并与其他支原体相应序列进行同源性分析,构建该基因系统进化树。结果显示:黏附素基因长为3426 bp,溶血素A基因长为777 bp;黏附素在第1-23位氨基酸残基为信号肽、1个跨膜区,可能为分泌型蛋白;溶血素A无信号肽和跨膜区、有RNA结合位点和甲基转移酶结合位点。系统发生分析表明,黏附素基因与猪肺炎支原体P146株进化关系较近,与其他的支原体进化关系远;溶血素A基因与猪肺炎支原体232株、结膜支原体HRC581株位于同一分枝上,进化关系近。本研究克隆了MO黏附素基因和溶血素A基因,为了解MO毒力相关基因生物学功能及其致病中的作用奠定了前期基础。
- 胡政香乔军孟庆玲陈诚赵海龙马玉刘田莉赞哈尔.波拉提张金生陈创夫
- 关键词:绵羊肺炎支原体黏附素基因克隆
- 捕食线虫性真菌-少孢节丛孢菌粘附蛋白基因的克隆及生物信息学分析
- 陈双庆孟庆玲乔军赵海龙王国超赵新霞罗建勋才学鹏