赖旺生
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:厦门大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项福建省农科院青年科技人才创新基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- HBV中和抗体筛选分析
- 乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)作为乙型肝炎(Hepatitis B,HB)的致病因素,自发现以来一直威胁着人类的健康与生命安全。高达20亿的感染基数与每年100万的相关死亡人口,使HBV成为最...
- 赖旺生
- 关键词:乙型肝炎病毒抗体筛选致病因素中和活性
- 戊型肝炎病毒ORF1多聚蛋白的不同功能域在细胞内的定位被引量:1
- 2011年
- 为了探讨戊型肝炎病毒多聚蛋白ORF1的多个功能域在宿主细胞中的表达和定位情况,我们首先将psk-HEV重组载体上的ORF1各功能域的编码序列克隆到绿色荧光蛋白载体pcDNA3.1-GFP上,构建成融合表达的重组质粒,并测序和酶切鉴定其构建成功。再通过Western-Blot验证各融合蛋白在细胞中正确表达,并用激光扫描共聚焦显微镜观察融合蛋白在细胞内的分布和定位。在Huh7细胞中,RdRp蛋白主要分布于细胞核内,HEL蛋白以囊泡状分布于细胞核周,MET蛋白以颗粒状存在于细胞核和细胞质中,PLP蛋白呈极性分布于细胞核周,X蛋白在细胞核和细胞质中均存在。各融合蛋白在细胞中的不同定位印证了对这些蛋白质的功能预测和体外研究结果,这为进一步研究HEV不同蛋白功能提供了支持。
- 黄慧郑子峥赵敏李婧娴赖旺生苗季张军夏宁邵
- 关键词:HEV
- 4型戊型肝炎病毒重组衣壳研究及感染模型初探被引量:1
- 2010年
- 目的 表达4型戊型肝炎病毒(HEV)开放式阅读框ORF2重组衣壳蛋白并初步建立用于4型HEV早期感染过程研究的细胞模型.方法 从猪胆汁中调取4型HEV ORF2的肽段(aa368-606)基因,并且利用大肠杆菌系统得到重组D66蛋白.结果 重组D66蛋白在水相中以二聚体为基本单位自组装成分子半径约为13 nm的颗粒.该颗粒与HEV感染的急性期、恢复期患者的血清均有较强的反应性.将D66颗粒与细胞共孵育,发现该颗粒可以与肝实质细胞系HepG2的细胞结合并进入细胞内,这种结合可被恢复期及急性期HEV患者血清所阻断.结论 这些结果表明重组D66蛋白颗粒,可以一定程度上模拟4型HEV的表面位点,并且可以特异性吸附并进入细胞,为进一步研究4型HEV感染的分子机制提供基础和平台.
- 赵敏李婧娴郑子峥郭清顺黄慧赖旺生苗季葛胜祥张军夏宁邵
- 关键词:衣壳重组蛋白