谢纬武 作品数:12 被引量:329 H指数:8 供职机构: 中国科学院遗传与发育生物学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 美国洛克菲勒基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
新一代分子标记技术──AFLP 被引量:94 1996年 AFLP(Amplifiedfragmentlengthpolymorphism)是近年来发展起来的最有效的新一代分子标记技术.本文对AFLP的发生发展、基本原理、反应程序,在植物分子生物学研究中的应用以及方法本身的优缺点进行了介绍和评述. 翁曼丽 谢纬武 伏健民 王斌关键词:分子标记技术 AFLP 分子生物学 温敏核不育水稻5460S细菌人工染色体文库的构建和鉴定 被引量:20 1999年 为了构建温敏核不育 (TGMS)基因区域的精细物理图谱并最终分离TGMS基因 ,以温敏核不育水稻 5 46 0S为材料 ,摸索优化了构建植物细菌人工染色体 (BAC)文库的方法 ,构建了一个高质量的BAC文库 .该文库由 1 95 84个克隆构成 ,插入片段平均长度为 1 1 0kb ,相当于水稻单倍体基因组大小的 5倍 ;以分子量分别为 1 40和2 5 0kb的 2个大BAC克隆进行稳定性传代实验 ,经 1 0 0代传代后其插入的DNA片段仍然稳定存在 ;以线粒体和叶绿体基因为探针筛选BAC文库 ,未检验出叶绿体和线粒体DNA的污染 ;以和tms1基因连锁的 3个分子标记作为探针对BAC文库进行了筛选 ,每个探针至少可获得一个阳性克隆 ,利用热不对称性交错PCR(Tail PCR)法成功分离了阳性克隆的左右末端序列 . 邱芳 金德敏 伏健民 张超良 谢纬武 杨仁崔 张洪斌 王斌关键词:水稻 温敏核不育基因 细菌人工染色体 文库 TGMS水稻BAC库的构建及与TGMS基因连锁的BAC克隆的筛选 1998年 TGMS水稻BAC库的构建及与TGMS基因连锁的BAC克隆的筛选王斌1伏建民1邱芳1谢纬武1王京兆1金德敏1李敬玲1杨蜀岚2杨仁崔2(1.中国科学院遗传研究所,北京100101)(2.福建农业大学作物遗传育种研究所,福州350002)有用基因的分离是... 王斌 伏建民 伏建民 邱芳 谢纬武 王京兆 金德敏 李敬玲 杨蜀岚关键词:基因连锁 BAC克隆 水稻线粒体 TGMS 基因分离 细菌人工染色体 植物高纯度大分子量核DNA的快速、简便制备方法 被引量:8 1998年 大分子量DNA(Megabase-size)的制备是构建YAC(Yeast artificial chromosome),BAC(Bacterial artificial chromosome)等大分子量基因组文库的前提,是绘制大尺度物理图谱的基础,还可以应用于重复序列的宏观研究.但因DNA在制备过程中易被机械剪切和核酸酶消解,所以制备大分子量DNA是比较困难的.最初制备植物大分子量DNA是采用低熔点琼脂糖包埋原生质体的方法,但存在明显的不足:(Ⅰ)植物原生质体的培养费时、费力、费财;(Ⅱ)适应范围有限;(Ⅲ)细胞器DNA污染严重.随后出现的包埋纯化后完整细胞核的制备方法,虽然较好地克服了包埋原生质体方法的缺点,但其制备步骤仍然繁琐,制备的大分子量DNA与细胞残渣、酚类物质(例如苹果)、细胞器DNA及小分子量核DNA混在一起,严重地干扰后续的分子生物学分析与操作.为此,我们利用脉冲电泳技术探索和建立了完善的高纯度大分子量核DNA的制备方法,能有效地克服上述缺点. 伏健民 邱芳 谢纬武 李传友 王斌关键词:DNA 植物 纯度 早熟大豆外源DNA导入的RAPD分子验证 被引量:36 1994年 利用花粉管通道技术直接导入外源总DNA,从而进行农作物品种改良,在国内外许多作物上已得到了广泛的应用。但外源总DNA是否能够通过花粉管通道进入受体,后代的变异是不是由于外源总DNA片段与受体基因组整合、表达所引起的,一直没有得到直接的分子生物学证据,本文报道了利用RAPD(RandomlyAmplifiedPolymorphicDNA)这一分子生物学技术,对通过花粉管通道导入外源总DNA所获得的大豆早熟后代进行了分子验证。结果表明:在后代基因组中找到了供体具有而受体没有的特异性DNA片段,直接从DNA分子水平上证明了外源总DNA片段可以通过花粉管通道导入受体,并与其基因组DNA整合,在后代中得到表达和遗传。 李希臣 雷勃钧 卢翠华 钱华 周思君 吕云波 谢纬武 王斌关键词:大豆 花粉管通道 早熟 RAPD 小麦D^2型与K型、V型、T型细胞质雄性不育系线粒体DNA的RAPD比较分析 被引量:19 1998年 采用RAPD方法比较新育成的小麦(TriticumaestivumL.)D2型不育系msD2CA8057与K型、V型和T型细胞质雄性不育系的线粒体DNA(mtDNA)。结果表明,msD2CA8057的mtDNA不同于其它3种类型不育系,而其它类型不育系的mtDNA彼此也各不相同。这一结果从分子水平上为鉴定该D2不育系的不育类型提供了证据。实验还发现在胞质来源相同而核背景不同的T型不育系间存在线粒体基因组多态性,这是关于小麦中T型不育系mtDNA在常规回交转育过程中发生变异的直接证据。这种变异在很大程度上可能是受不同核背景影响的结果。 姚鸿 李传友 谢纬武 吴郁文 张炎 王斌关键词:小麦 细胞质雄性不育 MTDNA RAPD 新型甜菜细胞质雄性不育系的获得及遗传学鉴定 被引量:3 1994年 以野生甜菜B.patulaAit作母本,叶用甜菜B.cielaL.和糖甜菜B.vulgarisL.作父本,通过3种间杂交,获得了一种新型甜菜细胞质雄性不育系.细胞学观察表明,该不育系表现出特异的花粉败育特性。以通用的Owen型不育系作对照,通过线粒体DMA的RFLP分析,结果显示两类不育系的线粒体基因组织结构具有明显差异,从分子生物学角度证实了所获得的不育系为不同于Owen型的新型不育系。 王继志 王定洁 满玉华 谢纬武 王斌关键词:甜菜 细胞质 雄性不育 遗传学 导入外源总DNA获得大豆早熟新品系 被引量:44 1996年 本文报道了在大豆自花授粉后,利用其形成的花粉管通道,将提取的含有早熟血缘供体大豆绥农8号的总DNA,直接导入受体大豆黑农26号中。在后代D_2代中获得3个早熟株系,熟期比受体提早15天,并迅速稳定。经异地鉴定,D90-1072品系产量比对照品种提高19.1%,于1993年进入省区试。经过对该组合的受体,供体及转化后代进行RAPD[Random Amplified Polymorphic DNA]分析,证明供体DNA片段进入受体引起后代基因组的变异。 雷勃钧 卢翠华 钱华 李希臣 周思君 吕云波 赵铠 刘广阳 杨兴勇 谢纬武 王斌关键词:大豆 外源DNA 早熟品种 普通小麦(Triticum aestivum L.)T型细胞质雄性不育系及其保持系的线粒体DNA比较研究(英文) 被引量:6 1995年 mtDNAs of T type wheat cytoplasmic male sterile lines Ning Drawf 14(ND14) and their maintainers Ning Drawf 13 (ND13) were isolated and digested completely with restriction endonucleases EcoRI, PstI, EcoRV, BamHI. The results revealed that the molecular structure of mtDNAs from ND14 and ND13 cytoplasms were significantly deviated. The mitochondrial genomic difference between CMS line and maintainers were uncovered by southern hybridization with probes of 18S+5S rRNA、atpA genes from wheat and pea mitochondria, respectively. Due to the complexity of mtDNA and no proof of protein difference, it has not yet been demonstrated whether mtDNA difference of Normal and Male Sterile Cytoplasm of wheat is associated with CMS. 刘大钧 谢纬武 王斌 吴敏生关键词:小麦 线粒体 DNA D^2型小麦细胞质雄性不育系及其保持系和恢复系线粒体DNA的比较研究 被引量:21 1998年 msD2-CA8057是新育成的具有粗厚山羊草(Ae.crasa,6x)胞质的D2型小麦细胞质雄性不育系。采用RFLP和RAPD方法对该不育系及其具有普通小麦(T.aestivum)胞质的保持系CA8057和恢复系保-769-22-6的线粒体DNA进行分析和比较,发现该不育系的线粒体DNA组织结构明显不同于其保持系,也不同于其恢复系。Southern结果表明,该不育系线粒体基因组在atpA、atp9、cob和coxⅡ基因上或附近具有显著的组织结构差异。RAPD分析证实了这一点。相反,RFLP和RAPD结果都表明保持系与恢复系之间线粒体基因组结构非常相似。这支持了该不育系的胞质遗传特点来源于与普通小麦胞质差异较大的野生型胞质的事实。 姚鸿 谢纬武 李传友 吴郁文 张炎 王斌关键词:细胞质 雄性不育 RFLP 小麦 D^2型