苗乃法
- 作品数：86 被引量：188H指数：6
- 供职机构：潍坊医学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金山东省卫生厅科技基金山东省中医药科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗BrdU单克隆抗体在凋亡细胞检测中的应用研究被引量：2
- 2002年
- 目的探讨将自制的抗ＢｒｄＵ 单克隆抗体（ｍＡｂ）用于ＴＵＮＥＬ法检测凋亡细胞的可能性。方法分别用ＴＵＮＥＬ免疫荧光法和免疫组化技术，检测地塞米松诱导的凋亡胸腺细胞和射线照射的大鼠皮肤组织中的凋亡细胞。结果用ＴＵＮＥＬ免疫荧光法和ＴＵＮＥＬ免疫组化法法检测发现，凋亡细胞的细胞核分别呈明显的荧光或酶底物着色，而非凋亡细胞不显示荧光或无酶底物着色。结论该抗ＢｒｄＵ ｍＡｂ用于ＴＵＮＥＬ法，能够检测单个细胞标本或组织切片中的凋亡细胞，为国内开展凋亡细胞的检测，提供了一种新的方法。
- 徐志伟吴国庆李少华苗乃法魏兵冯永堂邓鸿业
- 关键词：MAB细胞凋亡单克隆抗体
- 生长抑素对人红白血病K562细胞的抑制作用被引量：4
- 2002年
- 目的 研究生长抑素对人红白血病K5 6 2细胞的抑制作用。 方法 采用 8肽生长抑素———奥曲肽(octreotide ,SMSZOL 1995 ,SMS)在体外作用于K5 6 2细胞 ,经光镜、电镜观察、3H TdR掺入法和TdT缺口末端标记(TUNEL)技术检测K5 6 2细胞增殖、凋亡的变化。 结果 光镜下观察到 ,加SMS组培养 72h与空白对照组比较 ,细胞碎片增多 ;电镜下可见 ,SMS处理组中部分细胞核染色质靠核膜边集 ,呈块状或新月形 ,部分细胞胞浆中见核碎裂团块与空泡 ,线粒体基质深染、空泡样变和髓样变 ;3H TdR掺入法显示 ,SMS呈浓度依赖性地抑制K5 6 2细胞增殖 ,抑制范围为 2 0 %～ 5 0 % ,以 10 - 6 mol L最有效。在 10 - 1 0 ～ 10 - 6 mol L范围内 ,与对照组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ;TUNEL检测见核深染的阳性细胞 ,10 - 6 mol L组与对照组比较 ,凋亡细胞明显增多 (P <0 0 1)。 结论 生长抑素可抑制K5 6 2细胞增殖 ,诱导凋亡。
- 陈红霞张圣明吴洪娟李锋杰苗乃法李香群芦志红
- 关键词：生长抑素奥曲肽K562细胞白血病细胞凋亡
- 乳糖化赖氨酸与反义x基因质粒复合物体外对HBV表达的抑制被引量：1
- 2005年
- 目的研制一种能把基因药物定向导入肝脏组织的小分子肝靶向药物载体。方法用还原氨化法合成乳糖化赖氨酸(Lac-Lys)共价结合物作为肝靶向药物载体。将含HBV反义x基因的质粒在一定条件下与Lac-Lys制成复合物后转染HepG2.2.15。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清中的HBsAg和HBeAg。结果经红外光谱定性,成功制备出了Lac-Lys的共价结合物;此共价结合物能与质粒DNA形成复合物,经细胞培养观察可将质粒DNA载入细胞;抗原检测结果显示,含有反义xDNA的质粒在细胞内能有效抑制病毒的复制。xDNA与Lac-Lys的最佳比例是1∶5,最大抑制率是73.2%。结论合成的Lac-Lys可将反义x基因质粒定向载入细胞内,并有效抑制HBsAg和HBeAg的表达。
- 王学东冯永堂陈相英苗乃法鞠吉雨张灿
- 关键词：HBV
- 乳糖-聚赖氨酸复合物对肝细胞导向能力的研究被引量：4
- 2000年
- 目的 :利用肝细胞膜存在的去唾液酸糖蛋白受体 ,合成一种能够携带目的DNA分子特异性富集到肝组织中的载体。方法 :在弱碱性溶液中 ,在氰基硼氢化钠作用下 ,通过还原氨化法进行乳糖 (Lac)与聚赖氨酸 (PLL)的共价连接 ,SephadexG 10分离纯化产物 ;采用真核细胞表达基因 β 半乳糖苷酶报道基因 ,在细胞培养中和小鼠体内观察乳糖 聚赖氨酸复合物 (Lac PLL)对肝细胞的导向能力。结果 :Lac在氰基硼氢化钠作用下能有效地结合到PLL分子上 ,Lac与PLL的摩尔比为 16∶1;Lac PLL复合物在体外能够与DNA分子形成稳定偶联物 ,使其所偶联的DNA分子有效地进入到肝癌细胞 ,并使相应基因在细胞中表达。小鼠尾静脉注射DNA/Lac PLL偶联物10 μg后 ,DNA能有效地在肝组织中富集并在肝细胞中表达。结论 :Lac PLL是一种有效的对目的DNA分子具有肝细胞特异性导向能力的载体。
- 曲春枫王学东苗乃法吴国庆顾培娣
- 关键词：肝细胞
- 中药露蜂房醇提取物对人红白血病K562细胞的生长抑制及凋亡诱导作用被引量：18
- 2004年
- 目的 :研究中药露蜂房 (NidusVespae,NV)醇提取物对K5 62细胞的作用及其机制。方法 :利用3H TdR掺入、透射电镜、原位末端标记 (TUNEL)技术、免疫组织化学和图象分析等方法。结果 :不同浓度NV醇提取物对K5 62细胞生长具有明显抑制作用 ( 2 7%～ 5 6% )。NV醇提取物组K5 62细胞呈典型的凋亡形态学改变 ,其Bcl 2蛋白表达显著减弱、Bax蛋白表达显著增强。结论 :中药NV醇提取物可明显抑制K5 62细胞增殖 ,其作用机制可能是通过Bcl 2、Bax的表达 ,从而诱导白血病细胞凋亡。
- 芦志红张圣明李香群刘加强苗乃法
- 关键词：露蜂房醇提取物白血病K562细胞肿瘤抑制
- 兔脑的化学成分分析和磷脂制备被引量：3
- 1997年
- 兔脑中含77．2％的水分，总磷脂、卵磷脂和脑磷脂含量分别为3．4％、1．5％和1．9％，蛋白质含量为9．6％。免脑和免脑磷脂中均含较多的钙、镁元素而含铁、锌、铜、锰等微量元素较少。由兔脑提取总磷脂的收率为3％。用乙醇注入法可制备磷脂的乳剂。
- 高尔李华洲于淑敏王汝琴苗乃法
- 关键词：兔脑化学成分磷脂微量元素乳剂
- 胸腺来源免疫抑制提取物对不同组织肿瘤细胞作用的研究
- 2002年
- 目的探讨小牛胸腺来源免疫抑制提取物 (TISE c)对不同组织来源肿瘤细胞的影响。方法采用3 H TdR掺入方法 ,检测TISE c对肝癌、肺腺癌、膀胱癌传代细胞株细胞增生的影响 ,以及在显微镜下观测TISE c对癌细胞形态学变化的影响。结果TISE c对 3种肿瘤细胞均具有抑制分裂增生作用 ,但是癌细胞形态正常。结论TISE c可能是一种能够抑制癌细胞分裂增生的生物制剂 ;对不同组织来源的癌细胞不存在组织特异性 ;
- 吴国庆王凤山吴晓燕苗乃法
- 关键词：肿瘤细胞细胞增生
- 小鼠OX40稳定表达细胞株的构建及其对B细胞促分化作用的研究被引量：3
- 2005年
- 目的:构建稳定表达小鼠OX40的细胞株HUVEC,并探讨其对B细胞的促增殖作用。方法:从ConA活化的小鼠胸腺淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR法扩增小鼠OX40的cDNA,并将其克隆到pUCm-T载体中,经PCR、酶切和测序分析,进而构建pIRES2-EGFP-OX40重组真核表达载体。以脂质体法转染HUVEC,经G418筛选后,用流式细胞术检测OX40分子的表达。采用3H-TdR掺入法,研究OX40信号对体外培养的B细胞的促分化作用。结果:构建了OX40基因的真核表达载体。经PCR、酶切和测序证实,插入的目的片段与GenBank登录的小鼠OX40cDNA序列完全一致。用G418筛选后,获得能稳定表达小鼠OX40蛋白的HUVEC细胞。3H-TdR掺入法结果显示,小鼠OX40稳定表达的细胞HUVEC对体外培养的B细胞具有促增殖、分化的作用。OX40/OX40L信号与CD40/CD40L信号具有协同作用。结论:成功地构建小鼠OX40稳定表达地细胞,OX40对B细胞具有促增殖、分化作用。
- 原江水冯永堂王菲宫伟雁邸大琳任杰苗乃法
- 关键词：OX40增殖
- mOX40-hIgG1Fc的构建、表达及其生物学活性的初步研究
- 目的:构建mOX40-hIsG1Fc融合蛋白真核表达载体,转染COS-7细胞进行表达获得mOX40-hIgG1Fc融合蛋白,并通过体外实验初步研究其生物学效应,为OX40分子的进一步研究奠定良好的基础。方法:①Trizo...
- 刘艳菲冯永堂牟东珍苗乃法梁淑娟王丽娜邸大琳吴国庆魏兵孙萍
- 关键词：OX40COS-7细胞
- 文献传递
- 乳腺癌c-erbB-2、nm23基因扩增及产物表达被引量：3
- 1997年
- 目的：探讨乳腺癌癌基因和抑癌基因表达与预后的关系。方法：应用组织原位杂交及免疫组化技术对２５例新鲜乳腺癌标本的ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｎｍ２３基因扩增及产物表达进行了检测。结果：ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｍＲＮＡ杂交信号主要位于癌细胞胞浆中，杂交颗粒的多少不均，阳性细胞呈异质性分布，ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白在该组表达率为４０％（１０／２５），ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白阳性颗粒分布于癌细胞膜上，随着肿瘤恶性程度的增加，ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增及蛋白表达都增加（Ｐ＜０．０５）。ｎｍ２３基因扩增及产物表达却随肿瘤恶性程度的增加而减少（Ｐ＜０．０５），ｎｍ２３ｍＲＮＡ杂交颗粒位于胞浆中，蛋白的表达可见于胞浆中，少数见核中阳性，该组ｎｍ２３蛋白表达率为４４％（１１／２５）。结论：ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｎｍ２３基因扩增及产物表达呈负相关关系（Ｐ＜０．０５）。
- 王艳华张式暖苗乃法郭爱华鞠吉雨
- 关键词：乳腺癌NM23基因C-ERBB-2基因
