艾哈迈德
- 作品数：6 被引量：37H指数：4
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株微线蛋白-2基因在大肠杆菌的表达被引量：2
- 2005年
- 根据克隆的毒害艾美耳球虫 (Eimeria necatrix)广东株微线蛋白 - 2基因 (En MIC- 2 (Gd) )的 c DNA序列设计特异性引物 ,用 PCR方法扩增其阅读框架 (ORF)后 ,克隆至质粒表达载体 p ET- 32 a(+) ,成功构建了重组表达质粒 p ET-32 a(+) - En MIC- 2。用 Ca Cl2 法将其转化至宿主细菌 E.coli BL2 1(DE3) ,并用 IPTG成功诱导了 En MIC- 2重组抗原在大肠杆菌表达。表达的重组蛋白约占菌体总蛋白的 10 .8% ,其相对分子质量约为 5 5 0 0 0。重组蛋白经 SDS- PAGE分析后 ,用 E.necatrix(广东株 )感染鸡的高免血清进行 Western Blotting分析 。
- 覃宗华谢明权蔡建平艾哈迈德彭新宇魏文康吴惠贤
- 关键词：大肠杆菌表达MIC基因重组抗原广东株毒害艾美耳球虫
- 堆型艾美耳球虫子孢子表面抗原基因cSZ1的克隆及序列分析被引量：4
- 2004年
- 根据已报道的堆型艾美耳球虫(Eimeriaacervulina)子孢子表面抗原基因cSZ1的cDNA序列设计特异性引物,以孢子化12h的E.acervulina广东株卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法成功克隆了其子孢子表面抗原基因cSZ1(cSZ1(Gd))的cDNA。所克隆cSZ1(Gd)的cDNA全长940bp,其中第3～512位是其阅读框架,共编码170个氨基酸,两端为非编码区。与已报道的cSZ1基因的cDNA序列相比,cSZ1(Gd)有4个位置的核苷酸发生了变异,即原序列中第294、443、569、586位的G、G、G、A在cSZ1(Gd)分别为A、A、A、G,二者核苷酸序列的同源性为99.57%(936/940),其中阅读框架的核苷酸同源性为99.61%(508/510)。比较根据核苷酸序列推导的氨基酸序列,第294位的变异导致了所编码氨基酸由缬氨酸(V)变为异亮氨酸(I),而第443位的变异则为无义突变,氨基酸序列的同源性为99.41%(169/170)。
- 覃宗华蔡建平谢明权艾哈迈德彭新宇魏文康吴惠贤
- 关键词：堆型艾美耳球虫子孢子表面抗原基因克隆球虫病
- 减毒鼠伤寒沙门氏菌对鸡的致病力及免疫保护效果研究被引量：3
- 2003年
- 初步研究了cya/crp双基因突变的减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium X4550)对鸡的致病力及免疫保护效果。给1日龄岭南黄肉鸡口服感染不同剂量(10~7、10~8、10~9、10^(10)、10^(11)CFU/只)的S.typhimuriumX4550,所有试验鸡均未出现死亡,仅在最高剂量(10^(11)CFU/只)组试验鸡出现食欲减退和轻微下痢等症状。1、4或7日龄岭南黄肉鸡分别经口免疫接种10~8或10~9CFU减毒S.typhimurium X4550,28日龄每只鸡口服攻击10^(10)CFU强毒S.typhimurium 50333,结果不免疫对照组死亡率55％(11/20),免疫组保护率为100％(20/20),但1日龄高剂量免疫导致试验鸡的生长抑制。同时,免疫鸡还能全部或部分阻止沙门氏菌在肝脏和脾脏的繁殖。
- 覃宗华蔡建平谢明权艾哈迈德吴惠贤彭新宇魏文康
- 关键词：减毒鼠伤寒沙门氏菌致病力免疫保护效果弱毒苗免疫接种
- 堆型艾美耳球虫cSZ1基因在减毒沙门氏菌的表达及免疫保护效果研究被引量：18
- 2005年
- 用PCR方法扩增堆型艾美耳球虫广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的阅读框架 (ORF) ,与质粒表达载体pYA3342连接后转化大肠杆菌E-coliX6 2 12 ,获得阳性重组质粒后将其电转化至减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)X4 5 5 0。经IPTG诱导获得了cSZ1基因在减毒S typhimurium的高效表达 ,表达产物占菌体总蛋白的 9 2 % ,重组蛋白分子量约为 19kDa。将重组减毒S typhimurium分别以 10 8或 10 9CFU 鸡经口免疫 4日龄岭南黄肉鸡 ,免疫后两周血清中可检测到抗cSZ1的特异性IgG ,3周时抗体水平达到峰值 ;2 5日龄时可在肠道检测到特异性IgA的分泌。免疫后 3周 ,试验鸡分别经口攻击感染 5 0 0个E acervulina孢子化卵囊 ,结果显示免疫组与非免疫组有相似的排卵囊曲线 ;计数攻虫感染后第 3 5～ 9 5天卵囊总产量 ,2个免疫组分别能降低 2 5 . 1%和 4 6 . 4 %的卵囊产生。
- 覃宗华谢明权蔡建平艾哈迈德叶秀华
- 关键词：堆型艾美耳球虫减毒沙门氏菌免疫保护孢子化卵囊IPTG广东株
- 鸡体内减毒鼠伤寒沙门氏菌的繁殖和免疫反应被引量：11
- 2003年
- 初步研究了cya和crp双基因突变减毒鼠伤寒沙门氏菌 (Salmonellatyphimurium )在鸡体内的繁殖和免疫反应。 1、4或 7日龄肉鸡分别经口感染 10 8或 10 9CFU减毒S .typhimuriumX4 5 5 0 ,接种后 3～ 4周鸡体内特异性细胞和体液免疫达到最高峰。 4日龄口服 10 9CFU组免疫效果最佳 ,但 1日龄高剂量组表现增重降低及免疫抑制。 2 8日龄每鸡口服攻击 10 10 CFU强毒S .typhimurium 5 0 333,各免疫组保护率为 10 0 %。同时免疫鸡还能全部或部分阻止沙门氏菌在肝脏和脾脏的繁殖。接种后减毒S .typhimurium在泄殖腔的检出时间为 4周左右。
- 覃宗华艾哈迈德谢明权蔡建平吴惠贤彭新宇魏文康
- 关键词：减毒鼠伤寒沙门氏菌免疫繁殖
- 柔嫩艾美耳球虫广东株微线蛋白-2基因的克隆与序列分析被引量：7
- 2003年
- 根据柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)微线蛋白-2基因的cDNA序列设计-对特异性引物,以E.tenella广东株(EtGD)子孢子总RNA为模板,用RT—PCR方法成功扩增出EtGD微线蛋白-2(EtMic-2,GD)的cDNA序列。PCR产物连接到质粒pGEM—T—easy后,转化大肠杆菌DH5α。重组质粒经测序并与E.tenella北京株和豪顿株的MIC-2比较,开放阅读框架(ORF)核苷酸序列的同源性分别为99.70％(1023/1026)和99.61％(1022/1026),推导的氨基酸序列间分别有两个氨基酸不同,同源性为99.41％(340/342),经DNA sisst 1.02分析,这种差异可影响EtMic-2的抗原性。
- 艾哈迈德李国清蔡建平覃宗华谢明权吴惠贤彭新宇魏文康
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫广东株基因克隆球虫病
