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程国锋: 作品数：36 被引量：43H指数：3; 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>

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干扰日本血吸虫凋亡抑制因子最佳siRNA分子的筛选被引量：1: 2013年; 目的筛选干扰日本血吸虫凋亡抑制因子(Inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum,SjIAP)较好的siRNA分子。方法应用生物信息学设计了针对SjIAP的3对siRNA分子。利用脂质体将每对siRNA分子和表达IAP的重组质粒传染到HEK293T细胞中,利用实时定量RT-PCR和免疫印迹检测IAP的表达。将siRNA分子与日本血吸虫童虫(12d)进行体外共培养,利用实时定量RT-PCR和免疫印迹检测虫体内的IAP表达。结果细胞转染实验的实时定量RTPCR和免疫印迹分析表明本研究获得了2个干扰SjIAP较好的siRNA分子,且其中1对siRNA分子可显著抑制日本血吸虫虫体内IAP蛋白的表达,同时虫体Caspase活性有所上升。结论本研究获得了2个干扰日本血吸虫IAP较好的siRNA分子,为进一步利用RNA干扰研究血吸虫IAP的功能奠定了前期基础。; 罗荣赵江平胡超程国锋; 关键词：日本血吸虫凋亡抑制因子 RNA干扰基因功能

miRNAs在日本血吸虫不同发育时期的表达情况研究被引量：5: 2013年; 本研究基于前期对日本血吸虫体内miRNAs的高通量测序及免疫共沉淀研究结果,利用半定量RT-PCR技术对24个miRNAs在15、20、28 d的日本血吸虫雌雄虫体内的表达情况进行了检测,并进一步利用实时定量RT-PCR验证表达差异明显的miRNAs。结果表明bantam、miR-1989、miR-31这三个miRNAs的表达具有期特异性,且均在雌虫中高表达;miR-219在雄虫体内高表达;其余的miRNAs在各个时期均有表达,但表达情况没有明显差异。研究结果对深入理解这些miRNAs在日本血吸虫性成熟或者生殖产卵方面的功能奠定了基础。; 赵江平刘金明程国锋; 关键词：日本血吸虫 MIRNAS RT-PCR

日本血吸虫Sj Cyclophilin B基因的克隆、表达及免疫保护效果分析: 2010年; 本研究克隆和表达了日本血吸虫Cyclophilin B(Sj CyPB)编码基因的cDNA,分析其在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况,评估该重组抗原在小鼠体内诱导的抗血吸虫免疫保护效果。本研究以日本血吸虫童虫cDNA为模板,RT-PCR扩增其基因全长cDNA,提交序列到NCBI,登录号为GQ403665。荧光实时定量PCR分析该基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况,构建重组表达质粒,表达纯化重组蛋白。利用Western blotting检测重组蛋白的抗原性。以重组抗原免疫小鼠,评估其对小鼠诱导的免疫保护效果。结果表明,RT-PCR获得了Sj CyPB编码基因的全长cDNA,其开放阅读框为672bp。经分析确定其为CyPs家族中的CyPB基因,命名为Sj CyPB。荧光实时定量PCR分析表明,该基因在18d童虫期表达量最高,32d次之。构建了重组表达质粒pGEX-6P-1-SjCyPB,并在大肠杆菌中成功表达,表达产物分子量为49.5kDa。Western blotting试验显示该重组蛋白具有良好的抗原性,在小鼠免疫试验中,与空白对照组比较,免疫组小鼠获得31.5%的减虫率和41.01%的肝脏减卵率。本研究获得了日本血吸虫童虫期高表达的Sj CyPB基因的全长cDNA,成功构建了Sj CyPB原核重组表达质粒,并在大肠杆菌中成功表达,证实该重组抗原在小鼠体内诱导产生了部分免疫保护效果。; 彭金彪韩宏晓洪炀王艳郭凡吉石耀军傅志强刘金明程国锋林矫矫; 关键词：日本血吸虫 CYCLOPHILIN 免疫保护效果

血吸虫基因操作研究进展被引量：3: 2009年; 近年来,血吸虫基因组、转录组、蛋白质组和分泌组研究广泛开展,迫切需要针对单个分子功能深入研究。开展血吸虫基因操作研究不仅可在虫体内深入研究基因功能,对进一步理解血吸虫生长发育机理和寄生生活特征具有重要意义,还可建立抗血吸虫候选疫苗和药物靶标筛选的重要平台。为此,本文总结基因操作技术在血吸虫学中的应用并分析其现状。; 陈晶林矫矫蔡幼民程国锋; 关键词：血吸虫基因操作疫苗药物靶标

2012年家畜血吸虫病流行病学观测点观测情况通报: 2013年; 2012年,在8个家畜血吸虫病观测点共检测了8170头牛、479只羊以及569头(匹)其他家畜,血吸虫病感染率分别为0.92%、1.88%和0%。在75头病牛中,年龄小于3岁的占72%(54头),低感染度(+、++)的占81.3%(61头)。江西省吴城和湖南省南大膳的牛血吸虫感染率在3%以上。阳性野粪(全部为牛粪)和阳性钉螺均只在湖南省和江西省的观测点中发现。观测结果显示湖南省洞庭湖和江西省鄱阳湖地区牛血吸虫病的防控仍是目前农业血防的难点和重点。; 石耀军李浩陆珂贺亮董长华郭成玲朱春霞周煜田慧云曹晋蓉刘一平阳爱国郭莉董国栋马坤王玉龙傅志强朱传刚杨健美金亚美程国锋冯新港苑纯秀洪炀罗荣林矫矫; 关键词：家畜血吸虫病疫情调查

日本血吸虫Ago蛋白、基因、小RNA及其用途: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及日本血吸虫Ago蛋白、基因及小RNA及其用途。本发明首次公开了一种日本血吸虫Ago蛋白，其特征在于其为如下(a)或(b)的蛋白质：(a)其氨基酸序列如SEQ ID NO.1～3所示的蛋...; 程国锋罗荣; 文献传递

两个山丘型疫区牛血吸虫病疫情动态纵向观察被引量：2: 2012年; 目的了解山丘型血吸虫病疫区牛血吸虫病流行动态,为正确评估防治效果、制订防控对策提供参考依据。方法选择两个有代表性的山丘型疫区仁美和大仓作为观察点,采用毛蚴孵化法检查牛血吸虫感染情况,比较不同年龄牛感染率;入户调查家畜放牧行为,每年4、9月调查野粪和钉螺分布及感染率。结果与1993年比较,2007年仁美和大仓观察点牛血吸虫感染率分别下降98.4%和93.8%;感染度亦呈下降态势,至2007年基本以低感染度为主。1995年以后仁美观察点野粪阳性率为0,大仓点至2007年处于较低徘徊状态;活螺密度和阳性螺密度呈下降趋势。结论山丘型血吸虫病流行区由于自然环境特殊,疫区往往呈点状或带状分布,加大查治病和扩大化疗力度可迅速降低血吸虫病疫情。要彻底阻断血吸虫病传播还必须加强钉螺孳生环境改造和家畜血吸虫病传染源管理。; 石耀军李浩陆珂董国栋毛光琼郭莉马坤高建新杨俊凯傅志强朱传刚杨健美金亚美苑纯秀程国锋冯新港林矫矫刘金明; 关键词：血吸虫病

感染日本血吸虫小鼠循环血miRNAs变化分析: 日本血吸虫病人兽共患，危害严重。然而，目前有关血吸虫与宿主互作的机制认识仍非常有限。本研究旨在研究感染血吸虫后宿主循环血miRNAs的表达分化，深入探讨血吸虫与宿主互作的分子机制。; 朱丽慧刀金威杜晓利李浩陆珂刘金明程国锋

编码日本血吸虫Argonaute 3蛋白全长cDNA的获得及初步研究被引量：3: 2010年; 目的获得日本血吸虫Argonaute3(Ago3)蛋白的全长编码cDNA并对其初步分析。方法利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得日本血吸虫Ago3蛋白全长编码cDNA,利用原核表达系统对此蛋白片段进行重组表达,采用亲和层析法纯化重组蛋白,并免疫动物制备多克隆抗体。利用Western blot技术分析该蛋白在日本血吸虫中的表达。结果采用RACE获得了日本血吸虫Ago3蛋白编码全长cDNA,长度为2772bp;利用原核表达系统获得了该蛋白片段的重组融合蛋白,并制备了多克隆抗体;Western blot分析表明,该抗体与日本血吸虫全虫蛋白在分子量约为100kDa处具有特异性反应。结论获得了编码日本血吸虫Ago3蛋白的全长编码cDNA,并制备了多克隆抗体,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。; 陈晶郭素霞杨燕萍刘金明林矫矫李家奎程国锋; 关键词：日本血吸虫 CDNA末端快速扩增技术

日本血吸虫GSK3蛋白编码cDNA的克隆、表达及其重组蛋白的免疫保护研究被引量：2: 2012年; 本研究利用生物信息学分析了日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)Glycogen synthase kinase 3(GSK3)蛋白,并对其中一个GSK3蛋白的编码cDNA进行了克隆和原核表达,制备了特异性的多克隆抗体。同时,还初步评估了重组蛋白的免疫保护效果。生物信息学分析表明在日本血吸虫数据库存在两种GSK3蛋白,且其中一个SjGSK3在日本血吸虫不同发育时期均有转录。Western blot结果表明本研究制备的抗体能特异性识别日本血吸虫SjGSK3重组蛋白,表明该重组蛋白具有良好的免疫原性。动物实验表明免疫SjGSK3重组蛋白的动物与佐剂对照组比较分别获得了平均10.6%减虫率和40.5%肝脏减卵率。; 周春景罗荣石耀军赵江平程国锋; 关键词：日本血吸虫蛋白激酶免疫保护

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