王林坪
- 作品数：9 被引量：14H指数：3
- 供职机构：云南省第一人民医院更多>>
- 发文基金：云南省社会发展科技计划云南省教育厅科学研究基金云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脐带Wharton’s jelly间充质干细胞生物学特性的研究被引量：5
- 2014年
- 目的探讨人脐带Wharton’s jelly间充质干细胞的培养方法及生物学特性。方法将脐带Wharton’s jelly剪成约0.5 mm3种植到培养瓶,3 h后添加培养液。细胞达90%融合时用胰酶消化传代。用免疫组化检测波形蛋白的表达;用流式检测细胞膜表型;用诱导液检测其分化为脂肪样细胞和神经样细胞的潜能。结果培养6 d左右,细胞从组织块游出,为长梭形的成纤维样细胞,传代后细胞增殖加快,呈放射状分布。间充质干细胞标记物CD90等为阳性,而CD34等为阴性;波形蛋白呈强阳性。成脂诱导后,细胞质出现脂滴,油红O染色为阳性。经黄芪诱导24 h,细胞表达Nestin和NF,而NSE和GFAP为阴性。结论人脐带Wharton’s jelly中有间充质干细胞,且有多向分化潜能。
- 李士欣华映坤王林坪杨慧鲁俊吕超绍董旭东撒亚莲
- 关键词：间充质干细胞脐带
- 应用蛋白芯片检测CIK细胞与其培养上清蛋白谱的改变被引量：1
- 2013年
- 目的应用蛋白芯片技术检测不同患者来源的细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)细胞裂解液和培养上清的蛋白谱改变。方法将3例不同患者来源的人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)在体外经细胞因子诱导成CIK细胞,经流式细胞术测定细胞表型后,分别收集培养第20天的CIK细胞和细胞培养上清,应用AAH-BLM-1蛋白芯片分别获得CIK细胞裂解液和细胞培养上清中507个蛋白的改变。结果 CIK细胞在培养第20天,CD3+和CD3+CD56+的T细胞分别为(86.43±10.65)%和(38.58±3.94)%。CIK细胞培养上清液中共有6个蛋白明显升高(Signal≥700,FC≥1.8):MIP-1β(FC=21.28)、GzmA(FC=5.54)、IFN-(FC=2.78)、MCP-1(FC=2.22)、TMPO(FC=2.05)、IL-13(FC=1.81);细胞裂解液共有8个蛋白明显升高(Signal≥700):GzmA(Signal=1 968.77)、ET(Signal=1,398.60)、IL-13(Signal=1 333.47)、TFPI(Signal=959.76)、NRG3(Signal=9 4 4.0 9)、I L-7(Signal=8 6 7.1 2)、MIP-1α(Signal=833.43)、MIP-1β(Signal=704.88)。将上述两组结果对比分析后发现GzmA、IL-13和MIP-1β这3个蛋白在两组中均明显升高。结论 CIK细胞在活化过程中合成并分泌如GzmA、IFN-γ、IL-8和IL-13等多种蛋白产物,这些蛋白产物通过直/间接杀伤肿瘤细胞并促进T细胞增殖活化在抗肿瘤治疗中发挥重要作用。
- 唐慧董虹李丽王金丽王林坪左荣霞高建梅华映坤严新民
- 关键词：培养上清液蛋白芯片
- ANXA1及KIF2A的表达与纤毛相关疾病相关性研究及应用
- 沈涛寿涛董云华李红玲严新民李丽张进萍左荣霞王林坪
- 项目主要技术内容：选择纤毛相关疾病（不育、非小细胞肺癌及肥胖）为研究对象：采用RT-PCR法，发现肥胖组ANXA1 mRNA表达水平较对照组显著降低，且表达量与体重指数呈负相关。首次报道不育组ANXA1 mRNA表达水平...
- 关键词：
- 关键词：肺癌
- RTP801基因在结直肠癌和结直肠腺瘤中的表达及其临床意义
- 2011年
- RTP801（hypoxia—inducible factor 1-responsive gene，RTP801）最初是作为低氧诱导因子一l（hypoxia—inducible fac-tor-1，HIF-1）的应答基因被发现的，缺氧可诱导其表达急剧升高。最近我们通过研究发现，
- 唐慧郭强李丽王林坪左容霞严新民
- 关键词：应答基因结直肠腺瘤结直肠癌低氧诱导因子GENE
- DCIK细胞特异性抗肿瘤生物学活性研究被引量：3
- 2010年
- 目的研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)分别与两种冻融抗原致敏DC细胞共培养后获得的DC细胞诱导的特异性肿瘤杀伤细胞(dendritic cell induced killer.DCIK)的增殖活性及其对K562、Namalwa细胞株的杀伤活性。方法采集健康供者的外周血单个核细胞(PMNC),先诱导培养CIK细胞及两组DC细胞(K562-DC和Namalwa-DC),然后将两组DC细胞分别和CIK细胞按1∶10的比例分别混合培养,并以CIK细胞单独培养组为对照。计数细胞扩增倍数,并于共培养6d MTT法测定各组细胞对K562、Namalwa细胞杀伤活性。结果两组DCIK细胞增殖速度明显快于单纯CIK细胞组(P<0.05);共培养6d,相同的效靶比情况下,两组DCIK细胞对两种肿瘤细胞的杀伤活性都比单纯CIK细胞明显增强,而用相应肿瘤抗原致敏得到的DCIK细胞对该种肿瘤细胞的杀伤活性最强。结论 DCIK细胞的增殖能力、抗肿瘤活性均高于CIK细胞,致敏的DCIK细胞对相同肿瘤靶细胞有杀伤特异性。
- 徐艳刘丽娟高建梅王林坪董虹严新民
- 关键词：DC细胞CIK细胞DCIK细胞生物学活性特异性
- 干扰素诱导蛋白16在结直肠癌中的表达及其与K-ras基因突变的相关性研究被引量：4
- 2010年
- 背景与目的:结直肠腺瘤-癌序列是目前公认的结直肠癌演变过程,该过程伴随一系列基因突变及蛋白的异常表达和积累。本研究旨在探讨结直肠癌发生、发展过程中干扰素诱导蛋白16(interferon induced 16,IFI16)表达及其与K-ras基因突变之间的相关性。方法:收集云南省第一人民医院病理科2008—2009年门诊及手术的结直肠正常黏膜组织、腺瘤和腺癌各发展阶段标本,应用免疫组化SP法检测IFI16表达情况;应用PCR-RFLP法对结直肠癌标本K-ras基因12密码子进行检测,并与IFI16进行相关性分析。结果:IFI16在结直肠腺癌与腺瘤、腺瘤与正常结直肠黏膜组织中蛋白表达差异均有统计学意义(49.2%vs 25%,P<0.05;25%vs 0%,P<0.05)。结直肠癌患者K-ras基因突变率为38.3%;K-ras基因变异与IFI16表达无相关性(55.2%vs 44.4%,P>0.05),但与IFI16异位表达差异有统计学意义(13.8%vs 72.2%,P<0.05),两者之间呈显著相关(r=0.635,P<0.01)。结论:IFI16参与了结直肠癌的发生、发展过程,K-ras基因突变与IFI16异位在结直肠癌的发生、发展过程中起重要作用。
- 邹云莲唐慧撒亚莲杨慧王林坪郭强严新民
- 关键词：结直肠癌免疫组化K-RAS基因
- 一种测量脐带长度的无菌活动卡尺
- 本发明涉及一种测量工具，具体涉及一种测量脐带长度的活动卡尺，包括放置槽，安装在放置槽内一端的第一脐带固定器，安装于放置槽槽口上方的尺杆，以及滑动安装于尺杆上的第二脐带固定器；放置槽通过顶部开口能够摆放脐带实体组织；脐带实...
- 刘劼孙水芬唐其省易家莲王林坪
- 云南苗族Bardet-Biedl综合征家系外周血B淋巴母细胞系的建立被引量：2
- 2011年
- 目的建立云南苗族巴德一毕氏综合征（Bardet-Biedlsyndrome，BBS）家系外周血B淋巴母细胞系，为研究BBS的发病机制、诊断和治疗提供长期的标本来源。方法取1个BBS核心家系成员新鲜肝素抗凝全血，采用EB病毒转化技术，并加入环孢霉素A（cyclosporineA，CyA）抑制T淋巴细胞，将B淋巴细胞转化成永生化淋巴母细胞系。结果成功建立了苗族BBS核心家系中12个个体的永生细胞株。结论EB病毒转化技术可有效保存原来个体完整的基因组，为以后的相关研究提供了长期的DNA资源。
- 沈涛寿涛林克勤易文华映坤董虹高建梅张进萍王林坪王金丽李丽严新民
- 关键词：家系EB病毒B淋巴细胞
- HBV感染与僾尼人、傣族和基诺族人群的基因相关性研究及应用
- 高建梅严新民邹云莲董虹沈涛唐慧王金丽左荣霞张进萍王林坪
- 项目技术内容：宿主的遗传异质性是造成HBV感染差异的重要原因，迄今为止尚未见云南边疆地区少数民族HBV易感性的报道。为认识HBV感染差异与人群基因结构的相关性，研究以HBV感染具有显著性差异的云南边疆西双版纳地区三个原生...
- 关键词：
- 关键词：HBV感染疾病预防分子流行病学
