王伟锋
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
- 供职机构：武汉大学中南医院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金武汉市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人端粒酶逆转录酶启动子在裸鼠中增强人喉癌对基因放射治疗的敏感性被引量：1
- 2008年
- 目的探索人端粒酶逆转录酶启动子（hTERTp）介导自杀基因辣根过氧化酶（HRP）-吲哚乙酸（IAA）系统联合射线，对相同来源而放射敏感性不同的人喉癌移植瘤模型的治疗作用。方法建奇相同来源而放射敏感性不同的人喉癌（Hep-2和Hep-2R细胞）移植瘤模型，并分为联合治疗组（A组和AR组）、基因治疗组（B组和BR组）、单纯放射组（C组和CR组）和对照组（D组和DR组）。瘤内注射脂质体包裹的质粒phTERTp—HRP，腹腔内注射IAA并联合放疗30Gy，观察对移植瘤生长的抑制作用。应用原位末端转移酶标记技术（TUNEL）检测肿瘤细胞的凋亡情况；应用AP法检测瘤内HRP蛋白的表达。结果裸鼠移植瘤生长以联合治疗组最慢，以对照组最快。A组的肿瘤抑制率为54．8％，B组为10．0％，C组为31．9％，AR组为52．7％，BR组为24．8％，CR组为17．0％。A组和AR组可见大量肿瘤细胞坏死和凋亡，凋亡指数分别为16．6％±1．3％和17．6％±1．3％，高于其他组（P〈0．05）。B组的HRP蛋白表达率（21．9％±5．7％）低于BR组和（33．3％±8．9％），辐射诱导后，A组和AR组的HRP蛋白表达率分别增加2．1和1．6倍（P〈0．05）。结论在不同放射敏感性的喉癌移植瘤模型中，hTERTp能被射线诱导，并根据瘤内端粒酶活性增强HRP基因的表达。hTERTp—HRP—IAA系统通过诱导肿瘤细胞凋亡和引起细胞坏死，抑制裸鼠移植瘤生长，并与射线协同作用，起到放射增敏作用。
- 黄成虎廖正凯周福祥王伟锋谢丛华张红艳孙文洁周云峰
- 关键词：人端粒酶逆转录酶启动子喉肿瘤裸鼠
- 建立人喉鳞癌裸鼠移植模型两种方法的比较被引量：1
- 2009年
- 目的:建立人喉鳞癌(Hep-2)裸鼠移植模型,比较两种建模方法成瘤效果。方法:将裸鼠随机分成两组,每组8只,两组分别于皮下接种人喉鳞癌细胞悬液和改良法皮下接种瘤块建立动物模型,观察接种成瘤率、肿块大小、生长速度;免疫组化检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白表达。结果:接种3d后,改良瘤块接种法组裸鼠可见皮下隆起瘤体,接种1周后,皮下接种瘤细胞法和改良瘤块接种法成瘤率分别为75%、87.5%,比较第1周瘤体体积,P<0.05,但成瘤后肿瘤生长方面无明显的差别(比较第3周瘤体体积,P>0.05),两种方法成瘤后的瘤块hTERT蛋白表达阳性率相同。结论:采用改良瘤块接种法成瘤率高,生长速度快,且裸鼠皮下肿瘤较好的继承了人喉鳞癌细胞的重要生物学特点,该法能较好建立了人喉鳞癌裸鼠移植模型,为后续以端粒酶为靶点的体内抗肿瘤研究奠定良好基础。
- 王伟锋周福祥於海军黄成虎谢丛华周云峰
- 关键词：人喉鳞癌裸鼠移植瘤人端粒酶逆转录酶
- 放射诱导辣根过氧化物酶/吲哚乙酸自杀基因表达对肺癌细胞系的生物效应研究被引量：1
- 2010年
- 目的 检测放射诱导的肿瘤特异性嵌合启动子介导的辣根过氧化物酶/吲哚乙酸自杀基因系统对肺癌细胞A549、SPC-A1的生物效应.方法 构建含有6个CArG元件的人端粒酶逆转录酶基因嵌合启动子调控的辣根过氧化物酶表达的质粒载体,及单个端粒酶逆转录酶启动子质粒和对照质粒,分别为pE6-hTERT-HRP、phTERT-HRP、pControl-HRP、pControl-luc.分别用细胞计数法、Annexin V-FITC染色检测此嵌合启动子质粒系统对肺癌细胞A549、SPC-A1和正常人胚肺细胞（hEL）的生长抑制及凋亡效应.利用成克隆分析法检测此系统对肺癌细胞A549、SPC-A1放射敏感性的影响.结果 在6 Gy放射线诱导下质粒pE6-hTERT-HRP、phTERT-HRP、pControl-HRP、pControl-luc介导的自杀基因系统对A549细胞的平均生长抑制率分别为72.92%、40.60%、51.00%、25.19%（F=67.31,P〈0.01）,对SPC-A1细胞的平均抑制率分别为64.63%、30.02%、48.23%、23.16%（F=64.94,P〈0.01）,而对正常hEL细胞则分别为20.81%、18.05%、44.20%、18.32%（F=52.19,P〈0.01）.同样四种质粒对A549细胞的平均早期凋亡率分别为36.63%、22.30%、24.33%、12.53%（F=50.99,P〈0.01）,对SPC-A1细胞的平均早期凋亡率分别为33.73%、17.37%、22.43%、11.20%（F=20.76,P〈0.01）,而对正常hEL细胞则分别为13.53%、12.5%、21.93%、12.16%（F=15.08,P〈0.01）.同样四种质粒对A549细胞放射增敏比分别为3.45、2.29、3.05、1.21,对SPC-A1细胞的放射增敏比则分别为2.68、2.15、2.28、1.15.结论 放射诱导的肿瘤特异性嵌合启动子介导的辣根过氧化物酶/吲哚乙酸自杀基因系统对肺癌细胞A549、SPC-A1具有特异杀伤作用,具有很好的应用前景.
- 熊杰周云峰王伟锋孙文洁廖正凯周福祥谢丛华
- 关键词：细胞系肺肿瘤自杀基因系统放射生物效应
- 射线联合嵌合启动子介导的自杀基因对肿瘤细胞的靶向杀伤作用被引量：4
- 2011年
- 目的探讨放射线联合新型嵌合启动子介导辣根过氧化物酶／吲哚乙酸（HRP／IAA）自杀基因系统特异高效的抗肿瘤作用。方法构建含有4个串联放射反应元件CArG、含或不含巨细胞病毒（CMV）启动子的人端粒酶逆转录酶嵌合启动子，筛选肿瘤特异性及放射诱导性强的嵌合启动子，下游连接自杀基因辣根过氧化物酶（HRP），检测放射线联合基因治疗对肿瘤细胞HeLa、A549和MHCC97增殖及凋亡的影响。结果人胚肺成纤维细胞MRC-5中C4-hTC嵌合启动子的活性（0．1±0．0）明显低于肿瘤细胞株HeLa、A549和MHCC97（0．6±0．0、1．1±0．1和1．0±0．1，P〈0．01），经过6Gy射线诱导后，这种差异更加显著（活性分别为0．2±0．1、1．7±0．2、2．3±0．2和2．3±0．1，P〈0．01）。在肿瘤细胞株HeLa、A549和MHCC97中，嵌合启动子C4-hTC-HRP携带的自杀基因系统SER值分别为2．64、2．75和2．82，显著高于单纯hTERT启动子。在肿瘤细胞中，除阴性对照质粒pGL3-contr01．Luc外，自杀基因与放射治疗相联合对肿瘤细胞的生长抑制明显高于单一治疗方法，而联合组中pC4-hTC．HRP／IAA系统与放射联合的生长抑制作用最显著，对HeLa、A549和MHCC97细胞的生长抑制率分别为67．3％、69．0％和64．6％。在肿瘤细胞中，除阴性对照质粒pGL3-control-Luc外，联合组诱导的早期凋亡率明显高于单一治疗方法组，其中pC4-hTC-HRP／IAA系统与放射联合诱导的凋亡率最高，HeLa、A549和MHCC97细胞凋亡率分别为39．6％、33．0％和33．2％。结论新型嵌合启动子C4-hTC具有良好的肿瘤特异性及放射诱导性，放射线联合基因治疗对肿瘤细胞具有特异高效的杀伤作用，在肿瘤的基因放疗中具有较强的应用潜力。
- 孙文洁熊杰王伟锋廖正凯周福祥周云峰
- 关键词：人端粒酶逆转录酶人巨细胞病毒吲哚乙酸肿瘤细胞系
