王亮
- 作品数：12 被引量：29H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院卫生装备研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金广西高等学校科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胶原多糖基纳米羟基磷灰石仿生骨支架材料的研制
- 2011年
- 目的依据仿生原理制备新型的胶原多糖基纳米羟基磷灰石（HA）复合骨支架材料，并与成骨细胞复合培养，检测其细胞相容性。方法以胶原分子与透明质酸钠的交联产物为模板，调制钙磷盐在液相中沉积其上，得到矿化胶原多糖基复合材料；采用液相分离法与少量聚乳酸复合进一步制备成为三维多孔支架，使用成骨细胞（Mc3T3-E1）接种于该支架上培养。用X—ray衍射、扫描电镜、万能材料测试机等对材料进行观察和测试分析；并用倒置相差显微镜、荧光显微镜、扫描电镜、CCK-8细胞计数试剂盒、碱性磷酸酶（ALP）活性测定等观察和分析细胞在支架材料中的生长、分化情况。结果胶原多糖基纳米HA仿生复合材料的晶粒度较低，晶体极为细小，与天然骨中羟基磷灰石的组装结构类似；该复合支架为多孔状，孔隙率约82％，孔径大小为200～650μm；抗压性能好，成骨细胞可在其上贴附、生长和繁殖，并表现出较高的成骨活性。结论所制备的胶原多糖基纳米HA仿生骨支架材料，无论从组分和结构上均与天然松质骨类似，与成骨细胞相容性好，可望成为较理想的骨组织工程支架材料。
- 陈学忠李志宏李瑞欣郭勇刘璐王亮张西正
- 关键词：纳米羟基磷灰石骨组织工程交联
- 长时间力学载荷抑制体外培养成骨细胞的增殖和分化被引量：2
- 2015年
- 目的：观测长时间生理强度力学载荷对体外培养小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1增殖和成骨分化的影响,探讨长时间生理载荷影响骨组织的细胞生物学机理。方法：采用四点弯曲加载装置,向成骨前体细胞MC3T3-E1施加2000微应变（με）、0.5 Hz的周期性张应变,持续时间为0-24 h。然后采用MTT法检测细胞增殖活性;Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡;比色法检测碱性磷酸酶（ALP）和乳酸脱氢酶（LDH）活性;RT-PCR检测ALP、骨钙蛋白（OCN）、I型胶原（Col I）的m RNA表达;免疫印迹法检测OCN和Col I蛋白,以及骨形成蛋白表达。结果：短时间的力学载荷（12 h以内）对成骨前体细胞的增殖无影响,24 h的力学载荷抑制成骨细胞增殖活性,但效果不显著;0-24 h的力学载荷均对成骨细胞的凋亡率无明显影响。短时间力学载荷可提高ALP活性和ALP m RNA表达,12 h后开始下降;短时间的力学载荷可提高OCN和Col I的m RNA和蛋白水平,但载荷作用24 h后,OCN和Col I的蛋白表达开始降低。0-8 h的载荷促进骨形成蛋白2和4的表达,12 h载荷后,蛋白表达降低。另外,长时间载荷可提高细胞培养上清的LDH活性。结论：长时间的生理力学载荷对细胞增殖的抑制作用不显著,对细胞凋亡也没有明显影响,但可显著促进细胞坏死,并抑制细胞成骨分化。
- 郭勇王亮汪洋赵玉敏张新昌张西正贝朝涌
- 关键词：成骨细胞分化凋亡坏死
- 短期动态力学加载对老年去势大鼠尺骨性能的影响
- 绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,POP)是妇女自然绝经或手术、放化疗等因素导致的人工绝经引起的骨骼退行性改变。绝经后,雌激素迅速减少,骨量丢失加快,形成高转换型病理特点的骨质疏松...
- 李瑞欣王亮郭勇闫玉仙宁波关静武继民李志宏黄姝杰张西正
- 文献传递
- BMP-2-Smad信号通路在成骨细胞力学响应过程中作用的初步研究
- 王亮张西正陈学忠张燕郭勇李瑞欣
- 透明质酸改性壳聚糖-胶原-羟基磷灰石复合支架力学特性及成骨细胞的增殖(英文)被引量：7
- 2011年
- 背景:组织工程中,种子细胞需依赖于细胞外基质的存在才能发挥功能。因此支架材料的选择具有重大意义。目的:制备一种新型改性壳聚糖-胶原-羟基磷灰石复合支架,优化易于细胞黏附的组织工程支架材料工艺。方法:壳聚糖与透明质酸进行交联,红外和差示扫描量热图谱检测其结构;改性壳聚糖与胶原按1:2,1:1和2:1制备3种改性壳聚糖-胶原-羟基磷灰石复合支架,将复合支架与成骨细胞MC3T3-E1联合培养,CCK-8法检测增殖,绘制生长曲线。结果与结论:透明质酸和壳聚糖以酰胺键形成交联的新化合物,孔径在50～250μm之间,孔隙率随着胶原水平、弹性模量的增加而增加,而密度则减少;增加胶原的含量在细胞联合培养初期有利于细胞对支架的黏附和增殖,但从第10天开始,3种样品中细胞数量相差不大,均出现平台期;苏木精-伊红染色发现成骨细胞在培养初期沿着支架材料内部空隙贴壁生长,随着培养天数的增加,贴壁细胞呈集落样生长,可明显看到细胞间连接。说明透明质酸改性壳聚糖/胶原/纳米羟基磷灰石复合材料可以作为骨支架材料供成骨细胞黏附、增殖,其中胶原与壳聚糖的体积比为1:1为较优配比。
- 刘璐李瑞欣张莉郭勇陈学忠王亮董丽芝张西正
- 关键词：成骨细胞骨组织工程
- 力学拉伸强度对小鼠单核细胞RAW264.7诱导分化为破骨细胞的影响被引量：9
- 2009年
- 背景：生物力学已被证实对骨组织细胞的形成、增殖和成熟起重要作用。目的：观察力学拉伸强度对小鼠单核细胞RAW264.7诱导分化成破骨细胞的影响。设计、时间及地点：随机对照体外细胞观察实验，于2008-07/2009-01在解放军军事医学科学院卫生装备研究所完成。材料：小鼠单核/巨噬细胞系RAW264.7由中国协和医科大学基础医学细胞中心提供。方法：对小鼠单核细胞RAW264.7采用巨噬细胞集落刺激因子和破骨细胞分化因子诱导4 d后，分别施加0，1 000，1 500，2 000，2 500，5 000 με的基底拉伸应变3 d，1 h/次，1次/d，以静态诱导为对照。主要观察指标：拉伸3 d后，镜下观察各组破骨细胞形态，MTT法检测细胞增殖,半定量RT-PCR检测破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶、基质金属蛋白酶9、核因子kB受体活化因子、组织蛋白酶K和碳酸酐酶Ⅱ型基因表达及变化。结果：拉伸3 d后，镜下观察可见1 000，1 500 με诱导组的破骨细胞数量较静态组减少，破骨细胞形态小,胞核数目较少；2 000，2 500，5 000 με诱导组的破骨细胞数量随力学强度增加而增加，伴破骨细胞形态增大,胞核数目增多。与静态诱导组相比，5 000 με诱导组细胞增殖明显降低，而1 000~2 500 με诱导组细胞增殖差异无显著性意义，表明5 000 με诱导组促进破骨细胞形成和融合。2 000，2 500 με诱导组上调破骨细胞表型基因抗酒石酸酸性磷酸酶、核因子κB受体活化因子、 基质金属蛋白酶9的mRNA表达，5 000 με诱导组下调破骨细胞表型基因表达，1 000，1 500 με诱导组对破骨细胞表型基因表达无明显影响。所有应变诱导组骨吸收功能相关基因组织蛋白酶K、碳酸酐酶Ⅱ型表达未见显著影响。结论：力学因素可直接影响破骨细胞的分化，低强度载荷抑制破骨细胞分化，较高强度的生理载荷促进破骨细胞分化和功能，病理
- 郭春闫玉仙张西正郭勇宋梅王亮
- 关键词：RAW264.7细胞破骨细胞分化
- 细胞外基质对小鼠骨髓干细胞生长和分化的影响
- 郭勇刘璐李瑞欣曾强成张西正郝庆新王亮
- 关键词：细胞外基质骨髓干细胞成骨细胞分化
- 力学拉伸强度对小鼠单核细胞RAW264.7诱导分化成破骨细胞的影响
- 目的生物力学已被证实对骨组织细胞的形成、增殖和成熟起重要作用。笔者实验探讨力学拉伸强度对小鼠单核细胞RAW264.7诱导分化成破骨细胞的影响。
- 郭春闫玉仙张西正郭勇李瑞欣王亮宋梅
- 文献传递
- BMP-2-Smad信号通路在成骨细胞力学响应过程中作用的初步研究
- ＜正＞目的 BMP-2-Smad信号通路是骨形成过程中发挥重要作用的信号通路,许多研究表明力学刺激后BMP-2表达升高,但其介导的Smad信号通路是否参与成骨细胞的力学响应过程还未曾报道。笔者拟探讨BMP-2-Smad信...
- 王亮张西正陈学忠张燕郭勇李瑞欣
- 文献传递
- 力学拉伸强度对破骨细胞形成和分化的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探讨早期力学拉伸强度对破骨细胞形成和分化的影响。方法对采用巨噬细胞集落刺激因子和破骨细胞分化因子诱导的RAW 264．7细胞分别施加0，1000，1 500，2000，2500和5000με的力学拉伸3d。于培养第7天观察各组破骨细胞形态、计数及检测前体细胞增殖，并于培养第4，7天检测各组细胞培养液中抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）活性。结果2500με组的破骨细胞形成数量明显减少，5000με组的破骨细胞数量显著增加；2000，2500με组前体细胞增殖明显，5000με组前体细胞增殖显著降低；1000，1500με组与静态组在破骨细胞形成数量和前体细胞增殖方面差异无统计学意义。与静态组相比，应变组第4，7天培养液的破骨细胞TRAP活性均降低。结论早期力学因素可直接影响破骨细胞的形成和分化，较高强度的生理载荷可抑制破骨细胞形成，病理过载促进破骨细胞的形成，而低强度载荷几乎不影响破骨细胞形成；早期力学载荷可抑制破骨细胞分化。
- 郭春张西正闫玉仙郭勇李瑞欣王亮
- 关键词：骨质疏松破骨细胞
