王一成
- 作品数：125 被引量：365H指数：11
- 供职机构：浙江省农业科学院更多>>
- 发文基金：浙江省科技计划项目浙江省重大科技专项基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 浙江省副猪嗜血杆菌流行株分离鉴定及药敏试验被引量：2
- 2011年
- 为了研究浙江省副猪嗜血杆菌流行菌株耐药性,试验从浙江省杭州、嘉兴、湖州、绍兴和金华等地区8个不同规模猪场典型病例中分离鉴定出了13株副猪嗜血杆菌临床分离株,采用纸片法检测了其对21种临床常用药物的耐药性。结果表明:浙江省副猪嗜血杆菌分离株对大多数常用抗生素敏感,如多西环素、氟苯尼考、阿奇霉素等,对氨苄西林、复方新诺明、头孢类抗生素有较强的耐药性;不同分离株的耐药性有较大的地域、猪场甚至是猪只或分离部位差异。
- 李军星王一成袁秀芳徐丽华路斌王朝文
- 关键词：副猪嗜血杆菌药物敏感性
- 纳米金增强PRRSV GP5蛋白在小鼠体内的免疫效果研究
- 为了研究纳米金的免疫增强效果，以PRRSV GP5重组表达蛋白为目标蛋白，将纳米金包被GP5重组表达蛋白，免疫小鼠，同时设弗氏佐剂对照以及纳米金对照组。ELISA试验结果表明：纳米全能够显著提高GP5重组表达蛋白的抗体水...
- 牛登元王一成袁秀芳徐丽华张存李军星
- 关键词：纳米金MTT
- 文献传递
- 鸭疫里氏杆菌及其赘生物的形态特征
- 鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)是鸭传染性浆膜炎的病原,目前已成为危害养鸭业最为严重的细菌性传染病。但该菌由里默氏(Riemer,1904)发现至今,其分类地位属于哪一科尚未完全明确...
- 韦强鲍国连季权安王一成徐丽华
- 文献传递
- 绍兴鸭α-干扰素基因克隆、表达及活性测定被引量：6
- 2005年
- 采用PCR法从绍兴鸭的肝组织基因组DNA中扩增出α干扰素基因,插入pUC18载体,进行序列测定及分析;将成熟α干扰素基因亚克隆到表达载体pET 28α(+)中,并转化入大肠杆菌BL21进行表达;表达产物经复性后,进行抗病毒活性的测定。测序结果表明,该基因(sxDuIFN α)由576个核苷酸组成,共编码191个氨基酸。该基因与GenBank公布的鸭α干扰素基因(X84764,AB128861)的核苷酸序列同源性分别为99.3%和99.1%,氨基酸序列同源性均为97.9%。表达载体经IPTG诱导表达出相对分子量为20.7kD的DuIFN α。该产物经细胞病变抑制法测定,显示出具有明显的抗猪水泡性口炎病毒(VSV)及鸭瘟弱毒疫苗毒的活性。
- 叶伟成张存王一成刘蔓雯徐丽华袁秀芳张燕
- 关键词：Α-干扰素基因克隆原核表达
- 猪繁殖与呼吸综合征和猪流感混合感染的诊断被引量：11
- 2002年
- 通过流行病学调查、临床症状观察和病理剖检 ,结合血清学调查和病原学检测 ,对浙江省部分地区流行的“猪高热症”病因进行了探讨 ,初步认为这种疫情是由猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS)和猪流感并发造成的 ,继发感染则加重了本次疫情所造成的损失。
- 顾小根俞国乔朱家新赵灵燕方兰勇陆国林赵国源王勇蔡雪晖李海燕谷根林王一成
- 关键词：流感繁殖呼吸综合征症状病理剖检
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)核衣壳蛋白的克隆、表达与免疫印迹被引量：2
- 2005年
- 将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的核衣壳蛋白(N蛋白)基因克隆到原核表达载体pET 28α(+)中,得到重组质粒pET PRRSV/N,并转化入受体菌BL21中。转化子经IPTG诱导表达4h后,表达蛋白量达到高峰。经15%SDS PAGE电泳检测和经Westernblotting分析,表达蛋白大小约为17kD,符合预期结果,并能与PRRSV阳性血清发生特异性反应,而不与阴性血清反应。这说明表达蛋白具有高度免疫反应特异性。
- 徐丽华王一成逄春泰周永学袁秀芳张存叶伟成
- 关键词：核衣壳蛋白BLOTTING
- 重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位在鸭体内的吸收代谢及组织分布
- 2014年
- 研究重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(rLTB)在鸭体内的吸收代谢及组织分布,为rLTB的临床应用安全性提供依据。试验鸭分别肌注1,50,100 mg/kg rLTB后,以神经节苷脂GM1酶联免疫吸附法(GM1-ELISA)测定注射后不同时间点鸭血清中的rLTB含量;连续3次肌注rLTB后,观察临床症状和剖检病理变化,并采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和大脑制备组织切片,HE染色观察组织病理学变化,免疫酶组织化学染色观察rLTB在各脏器内的分布及含量变化。结果表明:鸭血清中的rLTB含量变化及维持时间与rLTB注射剂量呈正相关。1 mg/kg注射组2 h达到峰值,维持至6 h开始下降,24 h后基本检测不到;50,100 mg/kg注射组分别于2 h和1 h达到峰值,并均维持至12 h才开始下降,48 h后基本检测不到。HE染色切片显示50 mg/kg注射组肝细胞轻度浊肿变性,肺脏轻微炎症;100mg/kg注射组肝细胞浊肿变性明显、肺脏重度炎症、脑组织出现局灶性坏死。免疫组化染色结果显示,在被检脏器中均检出rLTB,以大脑含量最高,脾脏和肝脏次之,心脏和肺脏检出量低。rLTB大剂量肌肉注射可引起鸭一定的组织学病变,对鸭的安全使用剂量应不超过50 mg/kg。
- 周晓丽王一成姜平袁秀芳李军星杜晓莉
- 关键词：吸收代谢
- ETEC粘附素蛋白亚基Fae G在乳酸乳球菌中的表达及免疫反应性分析被引量：3
- 2009年
- 为探索研制预防仔猪腹泻口服基因工程疫苗,本研究根据GenBank中登录的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)Fae G基因序列设计一对引物,以ETEC C83907菌株为模板,通过PCR方法扩增出K88菌毛粘附素主要蛋白亚基Fae G的基因,将其定向克隆到乳酸乳球菌(L.lactis)分泌表达载体pNZ8112中,构建了分泌表达载体pNZ8112-fae G,并转化到L.lactis NZ9000中。重组菌株经5ng/mL nisin诱导3h后,仅在L.lactis菌体内检测到Fae G的表达,上清液中未检测到Fae G蛋白。SDS-PAGE电泳检测结果显示,表达的目的蛋白分子量大小约为27ku,表达产物的量达到了菌体总蛋白的13.56%。Western blot分析结果表明,表达蛋白具有免疫反应性。本实验为进一步研究FaeG在L.lactis中分泌表达的影响因素奠定了基础。
- 刘淑杰李永明徐子伟王一成
- 关键词：产肠毒素大肠杆菌FAE乳酸乳球菌
- 猪主要DNA病毒病多重二温式PCR检测方法的建立及初步应用
- 引言通过对Genbank发布的PPV、PRV和PCV2的核苷酸序列进行比对分析,利用Primer Premier 5.0软件设计出高溶解温度引物,经过PCR反应条件优化,将传统三温式PCR过程中的退火与延伸并为一步,建立...
- 申世川王一成姜平袁秀芳徐丽华李军星
- 家畜血吸虫、肝片吸虫和锥虫病三联诊断液研究初报被引量：2
- 1992年
- 血吸虫、肝片吸虫和锥虫(简称三种虫)能侵害马、牛、羊、猪、兔等动物。家畜感染后会引起极度消瘦而死亡。血吸虫和肝片吸虫是人畜共患病,不仅危害家畜,污染环境,而且严重威胁人类健康,影响农牧业生产。在不少疫区中,家畜往往同时感染三种寄生虫。为控制其危害,常采用血吸虫病单项诊断液及锥虫病和肝片及虫病双联诊断液分别进行多次普查,费工费时,开支大。迄今,国内外研制三种虫的三联诊断液未见报道。我们于1990年进行了该三种虫的三联诊断液的研制。
- 张雪娟王一成黄熙照杨继宗金美玲方士龙
- 关键词：血吸虫病吸虫病锥虫病
