牛萍 作品数:32 被引量:110 H指数:5 供职机构: 武汉大学人民医院 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 湖北省教育厅自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 自动化与计算机技术 更多>>
体外培养成人脂肪干细胞的老化机制 被引量:1 2016年 目的探讨体外培养成人脂肪干细胞的相关老化机制。方法成人脂肪干细胞来源于临床脂肪抽吸者,在干细胞培养液和恒温恒湿培养箱中连续传代培养建立老化模型。定期观察细胞形态变化,并分别进行细胞衰老相关的伊半乳糖苷酶染色、γH2AX染色和实时定量聚合酶链式反应(PCR)检测。结果脂肪干细胞体外连续培养数目倍增(PD)大于35时细胞周期停滞,进入老化期。细胞衰老相关的β-半乳糖苷酶染色和γH2AX染色呈阳性;实时定量PCR结果显示,Nanog基因和Oct4基因的表达在自我更新干细胞(PD〈20)和老化脂肪干细胞(PD〉35)差异有统计学意义(P〈0.05)。结论成人脂肪干细胞体外传代培养,可产生类似其在体内的老化过程,建立脂肪干细胞的老化模型,为抗衰老药物提供新的模型,为抗衰老治疗提供新的靶点,对组织工程及再生医学研究有着重要意义。 赵月强 牛萍 朱占永 余墨声 李爱林关键词:脂肪干细胞 衰老 细胞培养 应用Conners父母问卷对癫痫儿童行为问题的研究及相关分析 被引量:3 2018年 目的:探讨癫痫儿童行为问题状况及不同临床特征对行为问题的影响及相关分析。方法:应用Conners父母问卷对50例癫痫儿童和52例健康对照儿童进行行为问题分析,并根据不同临床特征对癫痫儿童共患行为问题作单因素和多因素分析。结果:癫痫组行为问题检出率34%,癫痫组Conners父母问卷的6个因子得分均高于对照组和中国常模(P〈0.05)。癫痫儿童中,9-11岁组的学习问题得分最高,早产儿的焦虑因子得分高于非早产儿,剖宫产儿的冲动-多动因子得分高于顺产儿,全面性发作组的品行问题因子得分高于局灶性发作组,病程〉2年组的学习问题因子高于病程≤2年组(P均〈0.05)。首次发作年龄与品行问题因子得分呈负相关,发作频率与焦虑、病程与学习问题、用药数量与品行问题的因子得分均呈正相关。多因素Logistic回归分析显示剖宫产、发作频率高、联合用药是影响癫痫患儿行为问题的危险因素,OR(95%CI)分别为7.278(1.159-45.697)、2.427(1.312-4.489)、20.170(1.076-378.003)。结论:癫痫儿童共患行为问题的发生率较高,且不同临床特征的癫痫患儿的行为问题各因子得分差异显著,剖宫产、发作频率越高、联合用药是癫痫患儿共患行为问题的高危因素。 刘芳 姚宝珍 牛萍 王世红 凌伟 王军陵关键词:癫痫 CONNERS量表 共患病 二尖瓣腱索断裂56例临床分析 被引量:3 2004年 目的探讨二尖瓣腱索断裂的临床特征、发病规律及其治疗方法。方法对56例住院患者的临床资料及病理检查结果进行回顾分析。结果前叶腱索断裂24例,后叶腱索断裂31例,前、后叶腱索均断裂1例。腱索部分断裂48例,完全断裂8例。33例为特发性腱索断裂,23例为继发性腱索断裂。特发性腱索断裂多为粘液样变性所致,继发性腱索断裂的病因多为风湿性心脏病(风心病)、感染性心内膜炎(IE)、冠心病(CHD)。结论前叶与后叶腱索断裂的发病率无明显差别,前、后叶腱索均断裂较少见。特发性腱索断裂较继发性腱索断裂多见。特发性腱索断裂的发病年龄高,多为男性,且以后叶居多;继发性腱索断裂的发病年龄较小,性别无差异,多发生在前叶。 牛萍 王芳 王晋明关键词:腱索断裂 二尖瓣反流 充血性心力衰竭 湖北地区汉族人群肾上腺髓质素基因多态性的研究 目的:探讨湖北地区汉族人群肾上腺髓质素基因(ADM)微卫星多态性(CA重复序列) 的分布特点。方法:应用聚合酶链反应技术(PCR),检测196例正常人的ADM基因的微卫星多态性,同时结合文献,比较不同种族间等位基因频率总... 牛萍 王芳 王晋明 胡晓军 王蕊关键词:肾上腺髓质素 基因多态性 聚合酶链反应 文献传递 基于CiteSpace的国内外医学教育混合式教学研究对比分析 2024年 基于CiteSpace知识图谱探讨国内外医学教育混合式教学研究现状、热点及发展趋势,并进行对比分析,为该领域未来研究思路和方向提供参考。以Web of Science核心合集、中国知网和万方数据库作为数据来源,运用CiteSpace软件对国内外2004—2023年所发表的医学教育混合式教学相关文献进行文献计量学分析。该研究最终纳入中文文献863篇,英文文献677篇。研究发现,近二十年来国内外医学教育混合式教学研究的年发文量均总体呈上升趋势,国内年发文量从2015年开始攀升。近二十年该领域的研究热点和前沿主要包括混合式教学在医学教育方面的应用以及多样化教学方法,国内研究侧重于混合式教学方法的多样化,而国外研究侧重于对学生不同方面能力的提升。通过期刊双图叠加分析显示,混合式教学研究在医学教育不同学科领域有交叉趋势。构建和优化多元互融的混合式教学模式,加强交流合作,注意教学方法多样化和学生能力提升并重,深化混合式教学的内涵与外延发展,是推动中国医学教育教学创新改革的未来发展方向。 刘芳 余诗倩 牛萍 魏丽 何晓琴 叶静萍关键词:混合式教学 医学教育 文献计量学 CITESPACE 可视化分析 细胞因子在小儿病毒性心肌炎中的表达和意义及其药物干预 黄星原 江端 王世红 魏丽 邓巍 何兵 牛萍 李小鸥 夏光 ①课题来源与背景:湖北省科技厅(2003AA301C21),病毒性心肌炎(VMC)是由病毒侵犯心脏所引起的疾病,严重者可致猝死。②研究目的与意义:研究细胞因子对VMC的作用,对深入认识VMC的发病机制,探索新的治疗手段具...关键词:关键词:病毒性心肌炎治疗 病理生理学 药物治疗 成人脂肪干细胞老化模型的建立及其老化机制研究 被引量:3 2016年 目的探讨成人脂肪干细胞体外培养老化模型的建立及相关机制。方法成人脂肪干细胞来源于临床脂肪抽吸的患者,采用低速离心、Ⅱ型胶原酶消化、滤网过滤等方法分离出干细胞,在干细胞培养液和恒温恒湿培养箱中连续传代培养。定期观察细胞形态变化,并分别进行细胞衰老相关的β-半乳糖苷酶染色。结果脂肪干细胞数目累积倍增值(PD)〉35时细胞周期停滞,进入老化期。老化脂肪干细胞出现细胞体积膨大、核增大扁平、胞质内容物增多等现象;衰老相关的β-半乳糖苷酶染色显示表达在自我更新和老化脂肪干细胞之间差异有统计学意义(P〈0.01)。实时定量聚合酶链反应结果显示基因Nanog和基因Oct4的表达在自我更新和老化脂肪干细胞之间有显著差异。结论从多层次,多水平证实了成人脂肪干细胞体外传代培养,可复制其在体内的自然老化过程,建立脂肪干细胞的老化模型,为抗衰老药物提供新的模型。 赵月强 牛萍 朱占永 李爱林 余墨声关键词:脂肪干细胞 衰老 体外培养 肾上腺髓质素的基因多态性与原发性高血压的关系 被引量:3 2004年 目的 探讨肾上腺髓质素基因 (ADM)微卫星多态性 (CA重复序列 )与原发性高血压的关系。方法 应用聚合酶链反应技术 (PCR) ,检测 196例正常人和 2 4 5例原发性高血压患者的ADM基因型 ,同时测定生化指标。采用放射免疫法测定 6 2例不同基因型的高血压患者的血清ADM水平。结果 正常对照组与原发性高血压组ADM等位基因型频率分布有显著差异 (χ2 =10 92 ,P <0 0 5 ) ,在 4种等位基因 (11,13,14 ,19)中 ,19值在原发性高血压组中所占比例显著高于正常对照组 (χ2 =7 5 8,P <0 0 5 )。不同基因型 11与 11,11与 13,11与 14 ,11与 19,13与 13,13与 14 ,13与 19,14与 14 ,14与 19的血清ADM水平 ,无明显差异。结论 ADM基因多态性可能与原发性高血压发生的倾向性有关。 牛萍 王晋明 王芳 胡晓军 王磊关键词:肾上腺髓质素 基因多态性 原发性高血压 微卫星多态性 起搏基因体外调控骨髓间充质干细胞分化为类起搏细胞的研究 2010年 目的本研究旨在通过体外构建起搏基因质粒pIRES2-EGFP-HCN2,电穿孔转染骨髓间充质干细胞,检测其在体外的表达情况。方法对含mHCN2 cDNA的PTR载体进行转化和扩增,将所得mHCN2基因定向克隆到含有增强型绿色荧光蛋白的真核表达载体pIRES2-EGFP中,进行双酶切来鉴定克隆的正确性。将重组质粒及空白质粒用电穿孔法转染骨髓间充质干细胞,并在体外与心肌细胞共培养,观察搏动频率变化及mHCN2的表达,并检测其电生理和组织学特征。结果构建了重组质粒pIRES2-EGFP-HCN2。荧光显微镜下可见转染后的骨髓间充质干细胞呈绿色荧光,细胞中mHCN2的阳性表达率为98.2%。免疫荧光显示转染起搏基因的骨髓间充质干细胞mHCN2的表达,而对照组无表达。实验组共培养的心肌细胞搏动频率较对照组干细胞共培养的明显增快(140±11次/分VS 100±13次/分,P<0.05),动作电位显示实验组最大舒张期电位值小于对照组(-62±2mv VS-71±2mv,P>0.05)。免疫荧光显示干细胞与心肌细胞间形成间隙连接。结论成功构建了重组质粒pIRES2-EGFP-HCN2,转染后的骨髓间充质干细胞可在体外成功表达功能性mH-CN2通道,提供起搏电流,具有类起搏细胞的功能,为进一步构建生物起搏器提供依据。 牛萍 张端莲 赵月强 黄星原关键词:起搏 基因转染 间充质干细胞 Notch1调控骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞的研究 牛萍 姚宝珍 张海菊 张婧 张晓