熊怡淞
- 作品数:51 被引量:90H指数:6
- 供职机构:成都军区总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 唾液酸黏附素在相关疾病中的表达及意义被引量:1
- 2012年
- 唾液酸黏附素(Siglec-1或称CD169)是Siglecs家族的成员之一,属于免疫球蛋白超家族类黏附分子,其主要表达于组织的巨噬细胞上,是巨噬细胞激活的重要标志。近年来,不断有研究表明Siglec-1可表达在激活的外周血单核细胞上,如在系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)、冠心病、系统性硬化(SSc)、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染等疾病患者的外周血中其表达均增高.基参与了激活T淋巴细胞等过程.并可作为反映疾病严重程度和活动度的指标,并可用于病情评估和治疗监测。
- 仲人前熊怡淞
- 关键词:SIGLEC-1自身免疫性疾病炎症
- 自身免疫性疾病噬菌体抗体库的构建和初步鉴定被引量:1
- 2009年
- 目的构建系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)、强直性脊柱炎、干燥综合症(SS)、原发性胆汁性肝硬化(PBC)等自身免疫性疾病的噬菌体抗体库。方法从多例确诊的高滴度自身免疫病患者外周血淋巴细胞中抽提总RNA,用RT—PCR方法分别扩增免疫球蛋白分子轻链κ、λ基因及重链Fd基因。经SacI和XbaI限制性双酶切后,在T4连接酶的作用下,将轻链基因片段克隆入同样双酶切的pComb3Hss载体中以构建轻链文库,随后将重链Fd段PCR产物经XhoI和SpeI双酶切后载入同样处理的κ/λpComb3Hss载体,然后将重组质粒κ/λ—Fd-pComb3Hss转化大肠杆菌XL1-Blue。用辅助噬菌体M13K07感染XL1-Blue,则可在噬菌体表面表达出随机的重组抗体库。结果提取的淋巴细胞总RNA及合成的cDNA质量好,PCR扩增了长度为660bp的轻链κ、λ基因及重链Fd基因,成功构建了库容为4×10^4的轻链抗体库和库容为6×10^4的Fab片段噬菌体抗体库,酶切及PCR鉴定均正确无误。结论成功构建了自身免疫性疾病的噬菌体抗体库,为进-步筛选出高亲和力抗体打下了基础。
- 吴炜霖夏维陆慧琦熊怡淞杨再兴周琳韩焕兴仲人前
- 关键词:自身免疫疾病细菌噬菌体抗体
- 热休克蛋白70基因rs1008438多态性与高原肺水肿的相关性被引量:2
- 2015年
- 目的探讨热休克蛋白(HSP)70基因启动子区rs1008438位点单核苷酸多态性(SNP)与高原肺水肿(HAPE)之间的关系。方法采用PCR-DNA直接测序法检测100例HAPE组、200例健康对照组个体基因组rs1008438位点的基因分布,分析不同基因型与HAPE的关系;运用ELISA法检测不同基因型HAPE组和健康对照组白细胞细胞质和细胞核HSP70蛋白含量变化;应用蛋白质芯片技术和EVIDENCE180全自动芯片仪分析TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平。结果HAPE组,健康对照组rs1008438的TT、GT、GG的基因型频率分别是76.0%、20.0%、4.0%,93.0%、6.5%、0.5%。统计处理显示,HAPE组TT基因型频率明显低于健康对照组(P<0.05);GT、GG基因型患HAPE的危险性是TT基因型的4.195倍,G等位基因相对T等位基因也能明显增加HAPE的发病风险(OR=4.178);ELISA检测结果显示,不同基因型HAPE组HSP70含量均高于健康对照组,且HSP70细胞核/细胞质比值TT基因型高于GT/GG基因型;蛋白质芯片检测表明,HAPE组血清中的TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平均明显高于健康对照组。结论 rs1008438位点多态性与HAPE易感性相关,这种相关性可能是由于突变型在基因转录水平通过影响启动子活性而增强HSP70表达,从而导致HAPE的发生。
- 吴艾霖熊怡淞王艳艳曲远青吴丽娟
- 关键词:高原肺水肿热休克蛋白70启动子
- 急性白血病患者化疗前后外周血淋巴细胞CR1的表达
- 2012年
- 目的观察急性白血病患者化疗前、后外周血淋巴细胞(PBL)CR1表达的改变情况,探讨CR1测定在化疗疗效监测中的意义。方法采用免疫黏附法和ELISA法检测56例健康体检者和临床确诊的48例急性白血病患者的PBLCR1活性及含量,并对急性白血病患者化疗前、后的结果进行分析比较。结果 48例急性白血病患者PBLCR1活性为36.8±11.6;PBLCR1含量为0.73±0.18,均低于健康对照组(65.1±16.8)和(1.16±0.22),差异显著(P<0.05)。化疗后39例完全缓解者PBLCR1活性及含量水平回升(53.6±13.2)及(0.98±0.16),接近健康对照组(P>0.05),与化疗前比较差异也均有统计学意义(P<0.05),11例未缓解者PBLCR1活性和PBLCR1含量分别为(41.2±12.7)和(0.80±0.19),与化疗前比较略有升高,但无统计学意义(P>0.05)。结论急性白血病患者PBLCR1表达明显受到抑制,化疗缓解后PBLCR1活性及含量均有回升。检测外周血淋巴细胞CR1活性及含量可为临床急性白血病患者的免疫监测以及疗效评估、预后判断提供有价值的参考指标。
- 陈莉吴丽娟胡宗海熊怡淞彭燕李继红栗群英
- 关键词:急性白血病外周血淋巴细胞
- 定量RT-PCR测定冠心病患者外周血Siglec-1(CD169)的基因表达水平被引量:2
- 2008年
- 目的:建立检测人Siglec-1(sialic acid-binding immunoglobulin-like lectins,唾液酸结合的免疫球蛋白样凝集素1,CD169)mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并用来测定冠心病患者外周血单个核细胞(PBMCs)中Siglec-1的基因表达水平,探讨Siglec-1基因表达水平与冠状动脉粥样硬化发生发展的关系。方法:基于SYBR Green荧光标记技术,建立实时荧光相对定量RT-PCR方法,在ABI PRISM 7000荧光定量PCR仪上测定了57例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者和38例健康对照者外周血中Siglec-1 mRNA的含量。生化常规测定所有入选者血脂水平。结果:冠心病组Siglec-1 mR-NA的平均拷贝数显著高于健康对照组,为健康对照组的3.23(1.28~8.11)倍(P<0.01);其中急性心肌梗死组(AMI)、稳定型心绞痛组(SA)和不稳定型心绞痛组(UA)分别为对照组的3.32(1.38~7.97)、2.56(0.88~7.42)、3.35(1.25~8.96)倍,而三组之间差异无统计学意义;冠心病血脂正常组和血脂异常组的Siglec-1 mRNA平均拷贝数无显著差异。结论:成功建立了人Siglec-1基因表达含量的实时荧光定量RT-PCR检测方法;冠心病患者Siglec-1 mRNA的含量显著高于健康对照组,且其含量高低与血脂无关;Siglec-1mRNA含量在冠心病患者外周血单核细胞上表达显著升高,说明冠心病患者外周血单核细胞已经发生巨噬细胞化,单核巨噬细胞介导的免疫炎症反应在冠心病发生发展过程中起重要作用。
- 熊怡淞王皓吴炜霖周运恒梁艳杨再兴荣光华仲人前
- 关键词:冠状动脉硬化SIGLEC-1逆转录聚合酶链反应
- 载脂蛋白C3促进THP-1细胞向小鼠主动脉黏附
- 2013年
- 目的探讨载脂蛋白C3(APOC3)对THP-1细胞与小鼠主动脉黏附效应的影响。方法在无菌环境下应用外科显微技术分离C57BL/6小鼠主动脉,在体外给予APOC3刺激16h后与标记有CFSE荧光的单核细胞来源THP-1细胞黏附1h,观察黏附效应的变化,同时应用免疫组化方法检测血管黏附分子1(VCAM-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达。结果给予APOC3刺激的主动脉与对照主动脉相比,与THP-1细胞的黏附效应增加,VCAM-1和ICAM-1表达上调,且前者比后者上调显著。结论载脂蛋白c3促进THP-1细胞向小鼠主动脉黏附。
- 徐耀忠俞娟熊怡淞褚少朋王惠民仲人前
- 关键词:主动脉
- 原发性胆汁性肝硬化伴高脂血症患者低动脉粥样硬化危险性的原因分析被引量:4
- 2010年
- 原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)是一种原因不明的自身免疫性肝病,多伴有血脂代谢异常,以低密度脂蛋白胆固醇增高为主要特点。大量的临床观察和前期实验研究发现PBC患者发生动脉粥样事件的危险性和病死率并未增加,本文复习相关文献,就此现象的可能原因及潜在机制进行分析。
- 熊怡淞仲人前
- 关键词:原发性胆汁性肝硬化高脂血症动脉粥样硬化
- 载脂蛋白C3促进THP-1细胞向小鼠主动脉粘附
- 目的:探讨载脂蛋白C3(APOC3)对THP-1细胞与小鼠主动脉粘附效应的影响。方法:在无菌环境下应用外科显微技术分离C57BL/6小鼠主动脉,在体外给予APOC3刺激16小时后与标记有CFSE荧光的单核细胞来源THP-...
- 俞娟熊怡淞杨曙梅王惠民褚少朋仲人前
- 载脂蛋白C3促进THP-1细胞向小鼠主动脉粘附
- 目的:探讨载脂蛋白C3(APOC3)对THP-1细胞与小鼠主动脉粘附效应的影响.方法:在无菌环境下应用外科显微技术分离C57BL/6小鼠主动脉,在体外给予APOC3刺激16小时后与标记有CFSE荧光的单核细胞来源THP-...
- 俞娟熊怡淞陈燕王惠民仲人前
- 关键词:免疫学检验单核细胞基因表达
- 文献传递
- CFSE标记结合流式细胞术检测单核细胞Siglec-1刺激CD4^+/CD8^+T细胞增殖
- 2011年
- 目的建立CFSE标记结合流式细胞术检测T淋巴细胞增殖的方法,并探讨其在研究单核细胞唾液酸黏附素(Si-glec-1)对CD4+/CD8+T细胞增殖中的应用。方法免疫磁珠分离冠状动脉综合征(ACS)患者和健康对照者外周血CD14+单核细胞,与经CFSE标记的第三方健康献血者CD4+/CD8+T细胞共培养5 d,流式细胞术检测T淋巴细胞增殖情况。结果 ACS患者CD14+单核细胞具有比健康人单核细胞更强的刺激CD4+/CD8+T淋巴细胞增殖能力;当用干扰素-α(INF-α)刺激增强正常单核细胞Siglec-1表达后,其刺激T细胞增殖能力增强;用单抗阻断单核细胞Siglec-1后,其刺激T细胞增殖能力减弱。结论 ACS患者增强的CD4+/CD8+T淋巴细胞增殖能力部分是由于激活的单核细胞高表达Siglec-1引起。
- 熊怡淞俞娟孙懿李畅仲人前
- 关键词:流式细胞术细胞增殖