殷剑宁
- 作品数：20 被引量：98H指数：7
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人骨肉瘤自发性高肺转移模型的建立及其生物学特性初探被引量：8
- 2000年
- 目的 在裸鼠体内建立人骨肉瘤自发性高肺转移模型 ,为探讨骨肉瘤肺转移机制和抗转移治疗提供尽可能与临床条件相近的实验工具 .方法 将裸小鼠腹腔筛选的人骨肉瘤高转移细胞亚群经裸鼠间传代 ,组织块原位植入胫骨骨髓腔 ,待裸鼠发生转移时 ,皮下扩增肺转移灶 ,再次原位移植 .如此循环 3个周期 .观察各代肿瘤细胞致瘤率、脏器转移及染色体数目变化情况 .结果 各代肿瘤细胞致瘤率均为 10 0 % ,肺转移率稳定在 80 %以上 ,转移途径单一 ;体内增殖能力及染色体数目稳定 .结论 建立了人成骨肉瘤自发性高肺转移模型 。
- 潘朝晖范清宇殷剑宁蒋维中范德刚张殿忠杨彤涛
- 关键词：裸小鼠骨肉瘤生物学特性
- 胞壁酰二肽激活大鼠巨噬细胞抗肿瘤免疫效应的研究被引量：10
- 1999年
- 目的:探讨胞壁酰二肽(MDP)激活大鼠巨噬细胞抗肿瘤效应的途径和机制。方法:以SD大鼠为骨肉瘤动物模型进行肿瘤抑制试验;采用中性红吞饮实验、间接MTT法及硝酸还原酶法,测定大鼠腹腔巨噬细胞的功能。结果:MDP(50μg～100μg/鼠)皮下注射可明显抑制UMR106骨肉瘤细胞在SD大鼠体内的生长,并可显著提高巨噬细胞的吞噬功能、杀伤活性及TNF和NO的分泌水平,且呈现一定的量效关系。结论:MDP激活的巨噬细胞可能是机体非特异性免疫抗瘤效应的主要基础。
- 王晓宁范清宇郝新保殷剑宁张殿忠
- 关键词：胞壁酰二肽巨噬细胞肿瘤坏死因子一氧化氮
- 快速cDNA末端扩增技术在钓取未知基因中的应用被引量：2
- 2002年
- 殷剑宁范清宇郝新保范德刚
- 关键词：成骨肉瘤基因
- 人白细胞介素－2基因在人骨肉瘤细胞系内表达被引量：2
- 1996年
- 从ｐＨＩＧ５３质粒内切下人白细胞介素－２（ＩＬ－２）ｃＤＮＡ基因，并经中间质粒ｐＳＰ７２转换成与ｐＤＯＲ－ｎｅｏ载体相匹配的酶切位点，然后将ＩＬ－２ｃＤＮＡ定向连接入ｐＤＯＲ－ｎｅｏ载体，构建成功人ＩＬ－２逆转录病毒载体，经脂质体导入人骨肉瘤细胞系Ｍａ中，经Ｇ４１８筛选后测转基因肿瘤细胞培养上清中ＩＬ－２表达量，每１×１０５细胞２４ｈＩＬ－２表达量为５０～８００Ｕ，为骨肉瘤的基因治疗创造条件．
- 郑强范清宇殷剑宁惠宏襄
- 关键词：白细胞介素-2基因治疗成骨肉瘤
- 骨肉瘤高转移细胞SOSP-M_1生物学稳定性及组织学起源的鉴定
- 2001年
- 目的 检测人骨肉瘤细胞高转移亚系SOSP M1 在裸小鼠体内传代过程中的生物学稳定性并鉴定其组织学特性。 方法 利用原位移植将细胞系在 33只裸鼠体内连续传代 ,组织块培养收集各代肺转移灶的肿瘤细胞 ,观察各代肿瘤细胞致瘤率、转移率、形态结构、骨形成蛋白、波形蛋白、肌动蛋白、神经元特异性烯醇化酶的表达情况以及遗传学方面的变化。 结果 各代肿瘤细胞致瘤率均为 10 0 % ,体内增殖稳定 ,肺转移率在 80 %以上。其显微及超微结构形态、抗原表达、染色体数目及结构变化均符合人骨肉瘤的特征。 结论 该细胞亚系在裸鼠体内传代生物学特性相对稳定 ,是人骨肉瘤实验研究的良好模型。
- 潘朝晖范清宇王成琪蒋萍萍殷剑宁
- 关键词：骨肉瘤裸小鼠
- 人成骨肉瘤高转移性细胞亚群的筛选及生物学特性的观察被引量：4
- 1999年
- 目的从低转移性人成骨肉瘤细胞系ＳＯＳＰ－９６０７中筛选出高转移亚群，并且建立人成骨肉瘤裸鼠转移模型。方法采用裸鼠腹腔传代的方法，获得腹水型自发性肺转移细胞，经体外培养和体内再次接种后获得高转移亚群。应用细胞计数法、染色体显示法、流式细胞术及裸鼠体内实验法研究细胞的生物学特性。结果筛选出的高转移亚群ＳＯＳＰ－Ｍ在转移分析实验中达到１００％肺转移率，除肺转移外还出现其他器官的转移。其染色体为５０余条，保持人类染色体核型。细胞周期中Ｓ期细胞所占比例为４８．５％。ＳＯＳＰ－Ｍ的细胞形态、染色体数目、体外及体内生长速度均与母系ＳＯＳＰ－９６０７有很大差别。结论ＳＯＳＰ－Ｍ是一个腹水型高转移细胞亚群。
- 殷剑宁范清宇龙华蒋维中裘秀春
- 关键词：骨肉瘤细胞亚群裸鼠
- caspase-6基因诱导成骨肉瘤细胞凋亡被引量：6
- 2002年
- 目的:探讨caspase-6对成骨肉瘤细胞株的凋亡诱导作用。方法:应用RT-PCR方法检测成骨肉瘤细胞株SOSP-9607中caspase-6基因的表达水平。以腺病毒adv5作载体,构建含caspase-6基因的转基因载体,用脂质体包裹法转染SOSP-9607细胞株,用RT-PCR方法检测转染后SOSP-9607细胞中caspase-6基因的表达。用MTF法检测转染caspase-6对SOSP-9607细胞株生长的影响。结果:成骨肉瘤细胞株SOSP-9607中未检出caspase-6表达。RT-PCR法证实转染。caspase-6后SOSP-9607中caspase-6表达显著增强,MTT检测显示对SOSP-9607细胞的生长有抑制作用,形态学观察及DNA电泳证实转染后的细胞株存在细胞凋亡特征。结论:caspase-6对成骨肉瘤细胞的生长有抑制作用,并可诱导成骨肉瘤细胞凋亡。
- 丁勇范清宇崔大祥张殿忠殷剑宁
- 关键词：成骨肉瘤细胞细胞凋亡基因转染
- 裸小鼠原位移植筛选高转移性人骨肉瘤细胞系及其生物学特性分析被引量：2
- 2000年
- 目的 在裸小鼠体内筛选人骨肉瘤高肺转移性细胞亚群 ,为实验研究提供模型。方法 利用原位移植方法 ,将人骨肉瘤细胞系SOSP 96 0 7皮下移植瘤接种于裸鼠胫骨骨髓腔。筛选到第 2代时 ,有 1例发生肺转移 ;以皮下扩增转移灶 ,再次原位移植 ,第 3代肺转移率达 83% ( 5 / 6 )。用组织块法培养收集 ,比较其与母系在形态结构、细胞核型 ,vimentin ,actin ,NSE抗原表达及体积倍增时间等方面的差别。结果 同母系相比较 ,该转移细胞保持了人骨肉瘤细胞的组织学特征 ,生物学特性也有较大差别。
- 潘朝晖范清宇殷剑宁蒋维中张殿中
- 关键词：骨肉瘤裸小鼠原位移植
- 应用抑制性消减杂交技术鉴定肿瘤转移抑制相关基因被引量：7
- 2002年
- 目的 克隆与肿瘤转移抑制相关的基因 ,探讨成骨肉瘤转移的分子机理。方法 采用抑制性消减杂交技术构建了人成骨肉瘤低转移细胞株 SOSP- 96 0 7的消减文库 ,对部分克隆进行了测序和同源性分析 ,用 Northern杂交及反转录 PCR技术证实了克隆的表达情况。结果 在低转移细胞株 SOSP- 96 0 7中高表达的克隆中有 2个克隆与人端粒结合因子 2 (telomeric repeat binding factor2 ,TERF2 )同源。Northern杂交及反转录 PCR证实这个基因只在低转移细胞中表达 ,而在高转移人成骨肉瘤细胞株 SOSP-M和裸鼠肺转移结节中均未表达。结论 TERF2可能在维持肿瘤细胞自身相对稳定、抑制骨肉瘤演进中起重要作用。
- 殷剑宁范清宇郝新宝范德刚
- 关键词：成骨肉瘤抑制性消减杂交技术肿瘤转移
- 高转移性人成骨肉瘤细胞系在裸小鼠体内的筛选和维持被引量：3
- 1999年
- 目的：筛选人成骨肉瘤高转移细胞并探讨维持其高转移性状的方法。方法：采用低转移性成骨肉瘤细胞系在裸小鼠腹腔内连续传代和体外培养肺转移灶筛选高转移亚系，通过体内、外交替传代维持其高转移性状，并用流式细胞仪、染色体分析等方法，研究该高转移亚系的细胞周期、形态、增殖等生物学特性。结果：筛选所得腹水型高转移亚系自发性肺转移率达100％。在细胞形态、增殖速度、染色体数目等方面与母系有较大差别，经体内、外交替传代高转移性状得以维持，且出现较高比例的脑、骨、肌肉转移。结论：腹腔连续传代培养转移灶和体内、外交替传代是筛选和维持高转移细胞的可靠方法。
- 龙华范清宇殷剑宁杨彤涛邱秀春蒋维中
- 关键词：成骨肉瘤细胞系肿瘤转移
