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通过整体消化法分离具有集落形成能力的胰腺上皮样细胞: 2014年; 目的:胰腺上皮细胞能诱导成表达胰岛素的细胞,成为细胞替代疗法治疗糖尿病的重要来源。胰腺细胞的分离多采用机械剪切后胶原酶消化,本文在以往研究基础上,探索一种能分离得到更纯净的胰腺上皮样细胞的新方法。方法:本研究采用胰腺整体消化的方法,将成体小鼠整个胰腺取下,摘除系膜及大的血管,置于胶原酶中消化20min,用PBS吹打胰腺组织,得到的细胞悬液,离心后去除上清与细胞碎片,用培养基重悬实质细胞,接种于6 cm培养皿中,培养7-10天后得到单细胞集落。结果:整体消化法不剪碎胰腺组织,从而避免多种胰腺细胞的参与,得到较为纯净的胰腺上皮细胞悬液,细胞总体数量小于部分消化法,但是单细胞比率远远高于部分消化法,得到的细胞集落更纯净,不需要去除成纤维细胞,方便筛选及进一步扩大培养。结论:整体消化法能够分离纯化出一群在离体条件下具有强增殖能力、形成大的上皮样集落的细胞。该分离方法方便、快捷,为今后进一步研究成体胰腺干细胞增殖与分化调控机制等问题奠定基础。; 梁杰孔德麟梁洋李丹冯锐成滕春波; 关键词：成纤维细胞

CRISPR/Cas9系统作用机制及研究进展被引量：4: 2017年; CRISPR/Cas9技术(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR/CRISPR-associated,Cas9)是进行基因编辑的新方法,通过设计特异性靶点RNA,将Cas9核酸内切酶带到基因组上的具体靶点,通过对特定基因位点切割,从而达到基因编辑目的。该技术自发明以来,迅速应用于人类多种细胞系、小鼠、大鼠、斑马鱼、猪、羊、水稻、小麦、拟南芥、果蝇、细菌等动植物和微生物的研究中,成为当今生命科学技术研究的新热点。文章对CRISPR/Cas9系统的基因座结构、作用机制和研究进展进行综述,旨在为生命科学领域研究人员提供参考。; 艾元立陈康轩胡菲阳闫学春梁洋; 关键词：基因座

富含鸟嘌呤序列的RNA结合因子(GRSF1)研究进展: 2021年; 富含鸟嘌呤序列的RNA结合因子1(GRSF1)是RNA结合蛋白,属于异质核核糖核酸蛋白(hnRNP)F/H家族,该蛋白家族成员均含有两个以上类RNA识别基序(qRRMs)和至少一个辅助结构域。qRRM(类RNA识别基序)与RRM(RNA识别基序)相似但作用方式不同。在发育、衰老、肿瘤等领域,GRSF1发挥着重要作用。随着生物信息学和测序技术的发展,GRSF1的功能和作用机制被逐渐揭示,但并未得到充分解析。该文对GRSF1结构特点、表达调控和作用机制进行了概述,并总结了其在发育、细胞衰老、肿瘤发生等领域的研究进展,为深入探究GRSF1的作用机制及挖掘其生物功能奠定基础。; 孔丽君曹思邈刘姝晗刘梦轻梁洋

通过CRISPR/Cas系统构建miR-17-92基因簇双切载体: 2017年; 通过CRISPR/Cas系统来构建miR-17-92基因簇的双切载体,研究结果表明:在miR-17-92基因簇的序列上找到了2个PAM(TGG和GGG)位点,从而得到了2个原间隔序列,设计合成基因簇双链crRNA;合成该片段并将其插入到p X260载体,使得在同一个载体上虽然只有一个g-RNA,但能够同时切割两个不同的靶位点;将该载体转染NIH3T3细胞验证切割效率,PCR结果和测序结果显示,所构建的CRISPR系统可以对基因片段进行有效切割。; 金姝含杜丽萍邹肖肖于泽梁洋

一种用于挑取小鼠干细胞单克隆的口吸器: 一种用于挑取小鼠干细胞单克隆的口吸器，涉及一种用于挑取干细胞单克隆的口吸器，解决了在独立制备ES细胞的过程中难以完成挑取ES细胞单克隆的问题。它的一号橡胶导管的一端是口吸端，一号橡胶导管的另一端与塑料导管的一端连通，所述...; 梁洋; 文献传递

一株可还原制备纳米银的钩状木霉: 一株可还原制备纳米银的钩状木霉，涉及一株钩状木霉。本发明提供一株钩状木霉，可以还原制备纳米银，为还原制备纳米银提供了新的菌源。该钩状木霉为钩状木霉Trichoderma hamatum NYNJ03，保藏在中国微生物菌种...; 张杰熊文王滨松包怡红刘雪峰张国财梁洋盖玉杰张映王娇张丽丽魏东; 文献传递

斑马鱼和鲤miR-1-2/133a-1基因间序列活性和调控研究: 2021年; 分别以斑马鱼(Danio rerio)和鲤(Cyprinus carpio L.)为研究材料,通过克隆斑马鱼和鲤miR-1-2和133a-1的基因间增强子序列,利用活体和离体实验探讨其是否具有肌肉特异性;并通过荧光素酶报告系统等研究转录因子MyoD是否调控该序列。研究结果显示:在活体实验中,无论斑马鱼还是鲤, miR-1-2/133a-1基因间序列均有肌肉特异性,且保留有保守区域(cr,含有E-box)的序列,注射72h后GFP表达量明显高于其他突变体。体外细胞实验也显示,转染含有cr序列的实验组,分化后的荧光素酶活性明显高于分化前。进一步探讨MyoD对miR-1-2/133a-1基因间序列的调控作用结果显示:无论是斑马鱼还是鲤, miR-1-2/133a-1基因间序列活性均受MyoD调控。结果为完善鱼类肌肉发育机理,及未来的鱼类分子育种奠定基础。; 龚葭薇何梅闫学春孔德麟梁洋; 关键词：斑马鱼肌肉发育 MYOD 基因间序列

动物发育生物学实验教学改革探索被引量：2: 2013年; 发育生物学是研究生物有机体发育过程与机理的一门学科,现已成为国内外各科研院所和高校生物类专业的一门重要专业课。东北林业大学生命科学院为"国家生物科学与基础研究人才培养基地"和"国家生命科学与技术人才培养基地"班学生开设动物发育生物学理论及实验教学课程,通过近7年的教学实践,在动物发育生物学实验课程教学理念、实验方法和教学内容方面进行了一系列改革,构建并实施了动物发育生物学实验教学体系,加强了对学生创新能力的培养。; 朴善花王春生梁洋安铁洙滕春波; 关键词：实验教学教学体系改革

哺乳动物腔前卵泡体外培养及研究进展被引量：2: 2005年; 哺乳动物卵巢内的原始卵泡库是雌性生殖资源的储存库,但大部分卵泡在腔前阶段已退化闭锁了,这无疑是对这一资源的巨大浪费。因此,越来越多的学者致力于腔前卵泡的开发和利用,建立了一系列的培养体系,尤其在小鼠上做的比较成功,已经得到了少量后代。文章主要就卵泡的发生发育过程,腔前卵泡的分离方法,培养基的选择,不同直径腔前卵泡培养体系的建立,影响腔前卵泡发育的因素及研究进展进行了阐述,为进一步完善腔前卵泡培养体系,揭示其发育机理提供参考。; 梁洋刘娣孙兴参岳顺利周佳勃; 关键词：哺乳动物腔前卵泡

拟蜘蛛拖丝蛋白基因人工合成及其真核表达载体的构建: 根据GenBank上蜘蛛拖丝蛋白基因序列(AY55585和AH015065)、拖丝蛋白基因的结构特点和密码子的简并性，设计378bp的拖丝蛋白基因单体，并对其人工聚合成四聚体。Primer5.0分析结果表明，决定拖丝弹性...; 王春生刘欣梁洋安铁洙; 关键词：四聚体真核表达载体绵羊

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梁洋