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禽传染性支气管炎脂质体、壳聚糖/DNA疫苗免疫效果比较研究被引量：8: 2006年; 将制备的禽传染性支气管炎脂质体／DNA疫苗和壳聚糖／DNA疫苗，分别以肌肉注射（i．m）和滴鼻、点眼（i．n）两种途径免疫健康雏鸡，以裸DNA疫苗为对照，采用流式细胞仪（FACS）及间接ELISA分别对免疫鸡外周血中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数及特异性IBV血清抗体IgG的动态变化进行检测，并于免疫后35d进行攻毒，结果显示：（1）CD4^＋T淋巴细胞数，所有试验组在免疫后1～3周左右均高于对照组（P〈0．01或P〈0．05），各试验组间，脂质体／DNA疫苗肌肉注射途径在免疫后10d后高于壳聚糖／DNA疫苗，但仅在第15天差异显著（P〈0．05），而滴鼻、点眼途径则相反；（2）所有试验组CD8^＋T淋巴细胞数仅在免疫后第15天与对照组差异显著（P〈0．05），各试验组间无显著差异；（3）所有组间特异性IBV血清抗体IgG动态变化差异不显著；攻毒后脂质体／DNA疫苗肌肉注射组无鸡只死亡，其他试验组有4％或8％死亡率，均显著低于对照组（12％）。由此可见，脂质体和壳聚糖均为DNA疫苗良好的佐剂或载体，且脂质体／DNA疫苗肌肉注射的免疫效果优于壳聚糖／DNA疫苗。; 李晓英王红宁黄勇柳萍胡慧琼白天; 关键词：DNA疫苗脂质体壳聚糖体液免疫

禽传染性支气管炎病毒S1、M、N基因真核表达质粒的构建: 本研究根据国内外及本课题组前期工作已在GenBank中登录的IBV S1、M、N的基因序列设计用于扩增IBV S1、M、N基因的三对引物,上游引物加上HindⅢ酶切位点,下游引物加上XhoI酶切位点,以本研究已克隆的S1...; 王红宁周生胡慧琼黄勇李春杨帆柳萍; 关键词：鸡传染性支气管炎病毒 S1基因 M基因 N基因真核表达质粒; 文献传递

仔猪腹泻的病因及综合防治进展被引量：53: 2002年; 在规模化养猪生产中 ,仔猪腹泻十分普遍 ,导致仔猪成活率下降、生长发育受阻、饲料报酬率降低 ,严重威胁着养猪业的健康发展。引起仔猪腹泻的病因十分复杂 ,主要包括病毒、细菌、日粮抗原过敏、营养因子缺乏、断奶应激等。; 王红宁代敏吴祥辉张之文李春柳萍; 关键词：仔猪腹泻病因

禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB<,K>株全基因组的克隆与序列测定: 根据国际基因库(GenBank)上公布的3株IBV全基因组序列,经多重比较后设计20对引物,用RT-PCR方法对禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB<,K>株全基因组进行了分段扩增,并将扩增产物分别插入到pMD18-T载体...; 周生王红宁胡慧琼黄勇柳萍; 关键词：禽传染性支气管炎病毒全基因组分离株基因克隆冠状病毒; 文献传递

四川规模化猪场仔猪黄、白痢的分子流行病学研究被引量：2: 2001年; 在系统鉴定、药敏试验和血清型鉴定的基础上 ,对 5 2株致病性大肠杆菌和 4株标准血清型大肠杆菌进行了质粒DNA分析。结果表明 ,菌株的质粒得率为 10 0 % ,来源相同的菌株具有相同或相似的质粒图谱 ,来源不同的菌株具有不同的质粒图谱 ,质粒DNA分析为四川规模化猪场致病性E .coli的分子流行病学调查提供了科学依据。; 刘书亮王红宁陶勇黄勇吴琦柳萍; 关键词：致病性大肠杆菌 DNA分析分子流行病学仔猪黄白痢

规模化猪场繁殖障碍性疾病的血清学调查被引量：5: 2006年; 此试验用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对规模化猪场的1498份猪血清进行了猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪伪狂犬病(PR)、猪细小病毒病(PP)、猪日本乙型脑炎(JE)、猪瘟(HC)以及猪圆环病毒2型(PCV2)感染的抗体检测。检测结果表明,猪瘟免疫抗体的阳性率为69.0%(156/226);猪细小病毒病、猪日本乙型脑炎和猪伪狂犬病免疫抗体的阳性率分别为79.9%(175/219)、87.2%(191/219)和74.8%(217/290);猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体的阳性率为58.8%(67/114),未免疫抗体的阳性率达61.5%(150/244);猪圆环病毒2型感染未免疫抗体的阳性率为66.7%(98/147)。结果表明,引起繁殖障碍的疾病中,猪细小病毒病、猪日本乙型脑炎和猪伪狂犬病的免疫效果较好;而猪繁殖与呼吸综合征的免疫效果较差,并与猪圆环病毒病困扰某些猪场。根据检测结果,提出了相应的防制措施。; 罗宗刚王红宁黄勇柳萍田国宝杨鑫罗昊张安云; 关键词：规模化猪场繁殖障碍性疾病抗体检测

四川草科鸡IL-15 cDNA的克隆与序列分析被引量：1: 2008年; 根据GenBank上登录的鸡IL-15基因序列,设计合成了一对特异性引物,以ConA诱导的鸡脾淋巴细胞提取的总RNA为模板进行RT-PCR技术扩增,并克隆到pMD18-T载体测序。测序结果表明,四川草科鸡IL-15开放阅读框(ORF)由564个核苷酸组成,编码187个氨基酸,与GenBank中公布的ChIL-15基因进行比较,核苷酸和氨基酸同源性为98.6%～99.5%。生物信息学分析表明,该基因编码的蛋白具有亲水性,有很强的抗原性,共有3个潜在的N-糖基化位点,可能存在3个蛋白激酶C磷酸化位点,存在2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点。; 黄勇刘蕊娜邹年莉王红宁柳萍; 关键词：白细胞介素-15 基因克隆

新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞中免疫相关细胞因子表达的检测被引量：4: 2009年; 分别采用新城疫强毒株F48E9与新城疫弱毒株LaSota感染10日龄鸡胚制作的鸡胚成纤维细胞,感染后24h提取鸡胚成纤维细胞的总RNA,通过RT-PCR技术结合凝胶成像系统扫描检测21种免疫相关细胞因子在鸡胚成纤维细胞中的表达量。实验结果表明,在鸡胚成纤维细胞中,无论是否感染新城疫病毒,IL-2、IL-3、IL-4、IL-21不能检测到其相应条带。通过统计学分析,IFN-β、IFN-γ、IL-9、IL-12-P35、IL-12-P40在病毒感染组与对照组间呈现出显著的差异,而强毒感染组与弱毒感染组的比较中,仅IFNγ、IL-9表现出显著差异。; 刘温泉王远萍邹年莉柳萍黄勇; 关键词：鸡胚成纤维细胞 LA

禽传染性支气管炎病毒基因重组大肠杆菌工程菌发酵研究: 在成功构建禽传染性支气管炎冠状病毒的真核表达质粒基础上,对含有pcDNA3-S1、pcDNA3-M、pcDNA3-N真核表达质粒的重组大肠杆菌工程菌JM109,通过单因素碳、氮源、无机盐、接种量、装液量及发酵温度试验,并...; 汪洋王红宁周生黄勇柳萍胡慧琼; 关键词：发酵; 文献传递

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柳萍