杨志兴
- 作品数：56 被引量：381H指数：11
- 供职机构：黑龙江省科学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划黑龙江省自然科学基金黑龙江省国际合作项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 鲤鱼生长激素基因在鲫鱼中的基因转移及PCR检测被引量：3
- 1996年
- 鲫鱼群体内，个体之间的生长速度差别不大，遗传保守性较强，用常规育种方法很难获得生长速度快、个体差异较大的后代。通过基因转移技术，将外源基因如鱼的生长激素基因导入鱼的受精卵中，而获得转基因鱼是鱼类定向育种的一条有效途径。已有报道，在虹蹲鱼生长激素ｃＤＮＡ上游连结一个病毒启动子构建成表达质粒，由此获得的转基因鲤鱼比对照生长速度快２０％。但是未见有将鲤鱼生长激素基因导入鲫鱼受精卵的报导。我们克隆了鲤鱼生长激素基因，并用它构建了含有病毒启动子（Ｆｉｇ．１，插入片段为０．８Ｋｂ，位于ＸｂａＩ和ＰｓｔＩ之间）的表达质粒（Ｆｉｇ．２，命名为ｐＣＭＶ－ＴＫ－ＣＧＨ）。用该质粒对鲫鱼受精卵进行注射，共注射了１０００粒卵，获得了转基因实验鲫鱼４８０尾，孵化率为４８％。将其中１００尾幼鱼于水簇箱中进行放养。选择其中个体较大的５０尾进行ＰＣＲ（检测。其中８条鱼的基因组ＤＮＡ有０．６Ｋｂ的ＰＣＲ扩增产物（Ｆｉｇ．３），表明其上整合有外源的鲤鱼生长激素基因，其整合率为１６％。其中最大的一条体重４．２ｇ，体长６ｃｍ，比对照（０．７ｇ，４ｃｍ）体重增加５倍，体长增加２ｃｍ（Ｆｉｇ．４）。我们构建的是高效表达质粒，其上含有巨细胞病毒增强子和?
- 赵晓祥张淑梅李晶李荣萍杨志兴
- 关键词：鲤鱼生长激素基因鲫鱼基因转移
- 鲤鱼（Cyprinus carpio）生长激素基因的亚克隆及其序列分析被引量：5
- 1995年
- 本文对ＰＣＲ扩增的６６８ｂｐ的ＤＮＡ片段进行了亚克隆，，然后以Ｓａｎｇｅｒ双脱氧中止法为原理，利用美国ＡＢＩ公司３７０Ａ自动核酸序列分析仪，确定了６６８ｈＰ的核苷酸序列。序列分析表明鲤鱼生长激素基因的开放读框含有６３０ｂｐ，并推测其中包括２２个氨基酸的信号肽和１８８个氨基酸的成熟多肽。鲤鱼生长激素基因的酶切图谱和序列分析的结果都证明我们已获得了全长的鲤鱼生长激素基因。
- 赵晓祥杨学成李晶李莹张淑梅杨志兴
- 关键词：鲤鱼生长激素基因亚克隆DNA
- 蘑菇核糖体失活蛋白的研究进展被引量：1
- 2008年
- 着重对近年蘑菇的核糖体失活蛋白研究的进展予以综述,在叙述每种核糖体失活蛋白的分离、纯化方法的同时,讨论了它们的生理生化性质、作用机制及可能的应用等。
- 张介驰张丕奇陈静宇杨志兴韩增华
- 关键词：蘑菇核糖体失活蛋白抗真菌
- 赤子爱胜蚯蚓纤溶酶的研究Ⅷ纤溶酶活性组分的确证被引量：4
- 1999年
- 本文报告了应用电泳分离纤溶酶组分,电泳洗脱收集每个组分,然后测其活性的方法,证明赤子爱胜蚯蚓纤溶晦具有七个有活性组分,同时测定出在变性与不变性纤维蛋白平板上溶纤行为的差异。
- 阎淑芳张凤琴李晶张云湖杨志兴
- 关键词：蚯蚓纤溶酶活性组分
- 一株具有纤溶活性的枯草杆菌(Bacillus Subtilis)的研究——液体发酵条件的选择被引量：48
- 1997年
- 本文主要报告了，以ＢａｃｉｌｕｓＳｕｂｔｉｌｉｓＨＷ－１２为试验菌株，在液体发酵中，所确定的发酵条件为：碳源是木糖，氮源是大豆胰蛋白胨，发酵液ｐＨ７．０，培养温度３７℃，培养时间９６小时。在这样的发酵条件下。
- 傅俐李荣萍李晶张淑梅张云湖赵晓祥杨志兴
- 关键词：枯草杆菌尿激酶发酵
- 抗冻蛋白及其基因结构被引量：12
- 1992年
- (一)鱼抗冻蛋白的发现简况由于海水的溶质依数性质冰点温度降低到-1.9℃.海洋硬骨鱼类血清中溶质浓度约为海水的1/3,故冰点为-0.8℃.当水温降到-0.8℃时有冻死的危险.有些鱼类则游到较暖和或较深的海水中去,在100米深处海水温度可低于-0.8℃,但由于缺乏冰晶成核作用而处于过冷状态,鱼类可以生存.有些适应于冰层下生活的鱼类如何抗冻呢?1957年有人报导生活在北极的鱼血清冰点为-1.4℃,是什么原因使冰点降低这么多呢?这激发了研究者的兴致.
- 达来祁翠兰杨志兴
- 关键词：抗冻蛋白基因结构
- 鲤鱼生长激素基因的改造及其在大肠杆菌中的表达被引量：6
- 1995年
- 用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）改造了鲤鱼生长激素基因，扩增出编码鲤鱼生长激素成熟肽的序列，并将此序列克隆到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ质粒中，序列分析后，亚克隆到大肠杆菌表达载体ＰＢＶ（２２０）中。经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和薄层扫描，结果表明鲤鱼生长激素基因已在大肠杆菌中获得表达。鲤鱼生长激素成熟肽的分子量为２２０００道尔顿，表达率占细胞总蛋白的１８％以上。
- 赵晓祥张淑梅杨学成李晶李荣萍杨志兴
- 关键词：鲤鱼生长激素基因大肠杆菌基因表达
- 蕈菌核糖核酸酶蛋白和肽的研究进展被引量：2
- 2008年
- 蕈菌核糖核酸酶蛋白和肽是蕈菌中一类重要的功能性成分,其研究结果有助于人们进一步了解蕈菌的生物学功能。文中综述了不同种蕈菌核糖核酸酶蛋白和肽的分离、纯化学方面研究进展,并讨论了它们的生理生化性质、活性、对底物的特异性、作用机制及应用前景等。
- 孔祥辉张介驰马庆芳韩增华张丕奇杨志兴
- 关键词：蕈菌核糖核酸酶水解作用抗肿瘤
- 金针菇免疫调节蛋白的研发与应用被引量：21
- 2006年
- 综述了近年关于金针菇功能性蛋白之一即金针菇免疫调节蛋白的性质、分离纯化及其抗癌、抗过敏、抗增殖、刺激免疫细胞产生多种细胞因子和免疫调节等功能的研究进展,并介绍了金针菇免疫调节蛋白的作用机制、开发应用领域以及前景展望。
- 孔祥辉孙宇峰任永春奚新伟杨志兴
- 关键词：金针菇细胞因子抗过敏抗肿瘤
- 大麻哈鱼基因文库的构建及其生长激素基因的克隆被引量：7
- 1991年
- 本文主要论述了黑龙江省特有鱼种,大麻哈鱼全基因文库的构建方法以及从所构建的1.9×10^(?)噬菌体成斑单位/ugDNA基因文库中克隆出生长激素基因片段的研究结果,作者使用DM-BL3入噬菌为载体,将大麻哈鱼肝总DNA的15-20Kb片段重组到载体中,再包装成新的重组噬菌体,以含虹鳟鱼生长激素DNA部分序列的PAF51为探针,经[^(12)P]dCTP标记后,与噬菌斑杂交,自显影,获得3个阳性斑,复筛获得90％以上阳性斑,酶切回收生长激素基因片段,实验证明,已成功地获得大麻哈鱼生长激素基因片段,可供进一步亚克隆或转移研究使用。
- 杨学成杨志兴刘伟民毕吉威赵晓祥姜凯波张云湖李洪超
- 关键词：大麻哈鱼基因文库基因克隆
