杜珙
- 作品数：11 被引量：45H指数：4
- 供职机构：暨南大学医学院更多>>
- 发文基金：深圳市科技局资助项目国家科技重大专项广东省重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胰激肽释放酶基因的克隆及表达载体的构建被引量：1
- 2002年
- 目的 :克隆中国人胰组织激肽释放酶基因 ,构建原核、真核表达载体 ,为开发生产人源激肽释放酶基因工程产品及人源激肽释放酶基因药物奠定基础。方法 :提取人胰腺组织总RNA ,逆转录后琼脂糖电泳初步鉴定PCR产物。将激肽释放酶cDNA回收、补平后插入克隆质粒KS ,酶切鉴定后 ,对激肽释放酶基因进行序列测定分析。用双酶切法 ,插入原核表达载体PET 2 8b ,真核表达载体pBacPAK9质粒中。酶切鉴定后 ,进行序列测定分析。结果 :本实验克隆的激肽释放酶基因与GenBank报告的激肽释放酶基因相比 ,碱基序列相同。测序分析表明人胰组织激肽释放酶基因经酶切 ,正确插入到原核表达载体PET 2 8b ,真核表达载体pBacPAK9质粒中。结论 :克隆并构建成功中国人组织激肽释放酶基因的原核、真核表达载体 。
- 杜珙李体远黄瑞芳陈德珩戴勇
- 关键词：激肽释放酶基因载体胰腺真核表达载体肾小球肾炎
- 三波长分光光度法测定18-氨基酸注射液中色氨酸和酪氨酸的含量被引量：2
- 2001年
- 目的：研究不经分离直接测定18-氨基酸注射液中色氨酸和酪氨酸的含量。方法：运用三波长分光光度法测定色氨酸和酪氨酸的含量。结果：三波长分光光度法简便，重现性好。结论：本方法可作为该制剂半成品及成品的质量控制。
- 杜珙杨戒骄朱永泉
- 关键词：色氨酸酪氨酸
- 导入人组织激肽释放酶基因治疗肾血管性高血压实验研究被引量：8
- 2005年
- 目的构建重组人组织激肽释放酶基因真核表达载体并研究其骨骼肌注射对高血压大鼠的降压效应。方法以pBluescripeⅡKSKLK(+)为模板用PCR扩增人组织激肽释放酶基因,将其定向克隆至pcDNA3载体上,形成重组质粒pcDNA3/KLK,并经酶切和测序鉴定。给“两肾一夹”肾性高血压大鼠的股四头肌注入1000μgpcDNA3/KLK,,随后给予100V、1Hz、40ms电刺激6次,并用RT PCR、Western杂交检测人KLKcDNA在体内的表达。尾套法测血压每周2次。结果一次肌肉注射人组织激肽释放酶cDNA可明显延缓“两肾一夹”肾性高血压大鼠的血压升高;能降低血压达8～21mmHg。局部肌肉组织的信使核糖核酸(mRNA)和KLK表达阳性。结论成功构建了pcD NA3/KLK真核表达载体,肌肉注射人组织激肽释放酶基因可引起“两肾一夹”肾性高血压大鼠血压的持续性下降,显示了人KLK基因对高血压患者降压治疗的可能性。
- 戴勇彭武建李体远杜珙徐卓佳
- 关键词：肾血管性高血压基因治疗
- 导入人组织激肽释放酶基因治疗肾性高血压的实验研究
- 戴勇李体远彭武建杜珙朱莹黄瑞芳石之磷陈德珩
- 该项目利用基因工程技术，提取正常人胰腺组织RNA，采用oligo（dT）引物进行RT-PCR。回收PCR产物，插入质粒KS。利用高保真pfu Taq酶扩增激肽释放酶基因片段，产物酶切处理后，和不同载体片段用T4连接酶连接...
- 关键词：
- 关键词：组织激肽释放酶基因治疗肾性高血压
- 中国人TFPI-2基因的克隆及测序分析被引量：5
- 2005年
- 目的对中国人的组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因进行克隆并测序。方法从人新鲜肝组织提取总RNA,经逆转录PCR(RT-PCR)扩增出TFPI-2的全长cDNA,经亚克隆、筛选、鉴定后,进行正反测序。结果中国人TFPI-2基因cDNA全长1222bp,除258bp、585bp和884bp处与目前GenBank中收录的国外学者克隆的TFPI-2基因序列不同外,其他完全一致。其序列Gen-Bank登记号TFPI AY691946。结论中国人TFPI-2基因序列与已经报道的西方人的TFPI-2基因序列基本相同,但三处单核苷酸多态性的意义何在,目前尚不清楚。
- 徐勇刘雪燕李体远杜珙
- 关键词：组织因子途径抑制物-2基因分子克隆
- 中国人胰腺组织激肽释放酶的基因克隆、制备及功能研究
- 李体远戴勇杜珙黄瑞芳石之磷陈德珩朱莹彭武建
- 利用基因工程技术，提取正常人胰腺组织mRNA， 采用oligo（dT）引物进行RT-PCR，扩增中国人胰组织激肽释放酶基因，完成系列原核、真核载体的构建，选择最佳的实验条件进行中国人胰激肽释放酶的表达。应用改良电位滴定法...
- 关键词：
- 关键词：高血压生物医药
- 人组织激肽释放酶成熟蛋白在大肠杆菌中的高效表达被引量：8
- 2003年
- 将编码人组织激肽释放酶成熟蛋白的基因片段扩增并分别克隆到原核表达载体pET2 8(b)及分泌型表达载体pET2 0 (b)中 ,使其C端融合 6×HisTag序列 .转化不同受体菌 ,IPTG诱导表达后利用SDS PAGE、免疫印记等方法对重组蛋白进行分析 .在 6株基因工程菌株中 ,均表达出分子量约30kD的激肽释放酶融合蛋白 ,其中激肽释放酶在pET2 8载体中的表达水平高于pET2 0载体 .pET2 8和pET2 0载体表达的重组激肽释放酶蛋白分别占菌体总蛋白约 2 6 %和 10 % .Western印迹分析表明 ,目的蛋白可与抗人血清KK单克隆抗体发生特异性反应 .未经纯化的激肽释放酶融合蛋白具有一定的水解苯甲酰精胺酸乙酯 (BAEE)的能力 .在大肠杆菌中获得了人组织激肽释放酶的高效表达 ,表达产物具有免疫原性和生物活力 。
- 李体远杜珙蔡筱彦石之磷黄瑞芳陈德珩戴勇肖德明
- 关键词：人组织激肽释放酶大肠杆菌基因克隆
- 血浆载脂蛋白B基因3′端可变数目串联重复序列的结构研究被引量：3
- 2006年
- 目的研究载脂蛋白B(apolipoproteinB,apoB)基因apoB3′端可变数目串联重复序列(variable numberoftandemrepeats,VNTR)多态性与序列结构。方法应用聚合酶链反应结合琼脂糖凝胶电泳技术检测了522名随机抽取的体检人员apoB基因3′VNTR多态性,选取26个样本的PCR产物进行DNA序列测定。结果分离出16个等位基因即高变单元(hypervariableelement,HVE),其中杂合子多于纯合子,最大的等位基因是HVE58,最小的是HVE24;HVE34频率最高40.4%,其次是HVE32,占34.7%。对26名60个等位基因进行的DNA核苷酸测序中,发现一个等位基因异构体(Y A=ATAATTAAATATTT),4个结构模式。结论中国人与欧美人群在apoB基因3′VNTR等位基因频率分布上存在明显差异,在等位基因异构体与结构模式上也存在不同。
- 杜珙薛红吴钢曾武威陈保生
- 关键词：基因型等位基因可变数目串联重复序列
- 不同面积脑梗死患者的血清血管内皮生长因子动态观察被引量：1
- 2004年
- 目的 动态观察不同面积脑梗死患者血清血管内皮生长因子 (VEGF)水平 ,探讨急性脑梗死患者血清VEGF的变化规律。方法 根据脑梗死面积分为大、中、小三种类型 ,按入院即时、入院后 1天、3天、7天、14天分别抽取静脉血 2ml,采用双抗体夹心酶联免疫分析法测量VEGF水平。结果 三种面积脑梗死患者血清VEGF升高的程度有显著性差异 (P <0 0 5 )。病程中血清VEGF水平有一个逐渐上升和下降的过程 ,多数患者在第 3天达高峰 ,第 7天开始下降。结论 不同面积脑梗死血清VEGF水平有明显差异 ,其水平随面积增大而增高 ,并随病程变化有一个逐渐上升和下降的过程 ,在发病早期即可检测出来。
- 黄瑞芳杜珙徐宜英李体远
- 关键词：急性脑梗死血管内皮生长因子梗死面积
- 深圳地区乙型肝炎病毒DNA基因分型与临床的关系被引量：17
- 2004年
- 目的 检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA并进行基因分型。方法 采用聚合酶链反应(PCR)扩增HBV DNA后,用不同的探针,利用微板杂交法将其分为6个亚型。结果 150例HBV DNA阳性病人中,B型50例、C型36例、D型13例、F型3例和A型1例,没有发现E型。另有47例为混合型,其中以B、D型(18例)、C、D型(20例)为主,分别占混合型的38.30％与42.6％。受检病人中,B型感染者丙氨酸氨基转移酶水平明显增高;B型感染者比C型感染者抗HBe阳性率高,分别为64.0％和30.5％,而C型感染者比B型感染者乙型肝炎e抗原阳性率高,分别为47.2％和21.0％;年龄、性别与基因型关系不明显。结论 深圳地区BBV基因亚型以B型为主,C型次之,其他较少。基因型与肝炎程度有一定关系。
- 戴建宜石之驎戴勇杜珙陈德珩王沙燕
- 关键词：乙型肝炎病毒基因分型聚合酶链反应
