李琦
- 作品数：31 被引量：35H指数：3
- 供职机构：南京林业大学更多>>
- 发文基金：江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏省高校自然科学研究项目江苏高校优势学科建设工程项目更多>>
- 相关领域：生物学化学工程文化科学医药卫生更多>>
- 一种α-鼠李糖苷酶及其制备方法和应用
- 一种α-鼠李糖苷酶及其制备方法和应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；该重组酶最适反应温度高、热稳定性好，在优选条件下可高效表达目的蛋白，因此可在选择性水解芦丁、橘皮苷、柚皮苷、樱桃苷、柴胡皂苷及其它连接α-鼠李...
- 赵林果解静聪李琦裴建军葛林
- 微课在生物制药综合实验教学中的应用探索
- 2018年
- 为了探讨微课结合传统教学方式在生物制药综合实验教学中的应用及效果,以南京林业大学2012和2013级生物制药专业学生作为研究对象,分别接受传统实验教学方式和微课辅助传统教学的授课方式。引入微课教学组的成绩(均分和高分段学生)明显优于传统教学组,学生对微课辅助的教学方式比较欢迎。实践证明,微课在实验教学中的应用可以提高学生的学习兴趣,培养自主学习能力,减轻教师在实验课堂上的教学压力,实现更好的教学效果,值得推广应用。
- 房仙颖赵林果裴建军李琦
- 关键词：生物制药教学改革
- 木聚糖酶XynB分子Ser/Thr平面导入精氨酸对酶热稳定性的影响被引量：1
- 2014年
- 为提高木聚糖酶的热稳定性,通过定点突变的方法,在来源于黑曲霉Aspergillus niger nl-1的木聚糖酶XynB分子Ser/Thr平面上引入5个精氨酸,实现了突变酶在毕赤酵母中的表达。通过酶学性质的研究表明,突变酶XynB-104和XynB-77的最适反应温度为50℃,且与原酶相比相对酶活力得到显著提高。在存在底物的情况下,50℃热处理2 h,突变酶XynB-104和XynB-77残余酶活力较原酶的相对转化效率由26%提高到80%左右。突变酶XynB-104的最适反应pH与原酶一致,而突变酶XynB-77最适pH由5.0提高到5.5。结果表明,在木聚糖酶分子Ser/Thr平面不同折叠片引入精氨酸可以增强酶结构的稳定性,特别是能显著提高热稳定性。
- 李飞解静聪李琦张雪松赵林果
- 关键词：定点突变木聚糖酶精氨酸热稳定性
- 不同来源重组漆酶的酶学特性被引量：3
- 2014年
- 以来源于变色栓菌的同工酶LacA、LacB、LacC，杂色云芝的同工酶Lcc1、Lcc2，以及细菌ARA等6种重组漆酶为研究对象，比较了它们的最适反应温度、最适反应pH、温度稳定性、pH稳定性、动力学常数Km ，以及Cu2＋对漆酶酶活的影响等酶学特性。结果表明：以邻联甲苯胺为底物时，LacA、LacB、LacC、Lcc1、Lcc2、ARA的最适反应温度分别为60、60、70、60、55和75℃；以愈创木酚为底物时，6种漆酶的最适反应pH分别为5．0、5．0、4．5、5．0、4？5、7．0。 LacA在催化ABTS、愈创木酚、邻联甲苯胺、丁香醛连氮以及2，6-二甲基苯酚时，其最适反应温度分别为55、70、60、20、65℃。此外，真菌漆酶在30～60℃，pH为2？5～7？0范围内都有较好的稳定性，细菌来源的漆酶在80℃下保持60 min，在pH＝7？0时保持6 h仍具有较高的酶活力。 Cu2＋对细菌漆酶的激活作用要明显高于真菌漆酶。同时，以ABTS为底物时，Km值最小，且不同来源漆酶的Km值相差不大。因此，6种不同来源的重组漆酶在催化同一种底物时，酶学特性存在着差异性，同一种重组漆酶在催化不同底物时，其酶学特性也有较大差异。
- 李琦赵东霞刘世萍柴常升赵林果
- 关键词：酶学性质
- Thermoanaerobacterium saccharolyticum JW/SL-YS485来源的GH11家族木聚糖酶的克隆表达及其应用被引量：2
- 2018年
- 对Thermoanaerobacterium saccharolyticum JW/SL-YS485来源的GH11家族木聚糖酶基因xyn11进行了克隆表达研究。xyn11基因全长636bp,编码211氨基酸。通过构建重组质粒,使其在大肠杆菌中实现了活性表达,酶活达到13.8U/mL。重组酶通过热处理和Ni亲和层析达到电泳纯,SDS-PAGE显示其分子量为20000,与理论分子量吻合。重组酶的最适反应温度为65℃,最适反应pH为4.5,在pH 3.5~6.0范围内保持较高的稳定性,60℃保温1h,酶活还残存60%,Cu^(2+)对该酶有激活作用。重组酶底物特异性强,且不能降解木二糖和木三糖。重组酶以榉木木聚糖为底物,其V_(max)和K_m分别为9809U/mg和5.9mg/mL。榉木木聚糖质量浓度为25g/L,重组木聚糖酶用量为20U/g,在50℃、pH 4.5条件下水解12h低聚木糖的得率为27.8%,水解产物主要由木二糖和木三糖组成,且不产生任何木糖。结果表明,该木聚糖酶催化特性优异,可用于低聚木糖的制备。
- 裴建军李杰李琦李琦
- 关键词：木聚糖酶低聚木糖
- 耐热木聚糖酶基因的克隆表达及其在酶解玉米芯木聚糖中的应用被引量：7
- 2017年
- 为寻求具有耐热性能的木聚糖酶,笔者以嗜热网球菌(Dictyoglomus thermophilum)DSM3960的基因组为模板,克隆得到木聚糖酶基因xyn B-DT,该基因全长1 083 bp,共编码361个氨基酸,蛋白的理论分子量约为40ku。通过NCBI数据库比对发现该基因编码的蛋白质属于糖苷水解酶G11家族。实现大肠杆菌异源表达重组木聚糖酶Xyn B-DT,通过IPTG诱导,酶活达到30.6 U/mL。该重组木聚糖酶的最适温度为85℃,在60~80℃范围内均有较好温度稳定性,在60℃条件下保温2 h,酶活维持在90%以上,在90℃下保温2 h,酶活尚残余约50%;最适pH为6.5,在pH为5.0~7.5范围内保温24 h仍可保留约90%剩余酶活力。该酶以Beechwood木聚糖为底物,米氏常数(K_m)和最大反应速率(V_(max))值分别为5.63 mg/mL和1.572 mmol/(L·min^(-1))。以玉米芯木聚糖为底物,研究XynB-DT水解玉米芯木聚糖的条件及产物,结果显示在温度70℃、pH 6.0条件下酶解12 h,加酶量为400 U/g,最终酶解得率为44.3%,玉米芯木聚糖的水解产物主要以木二糖和木三糖为主,表明该木聚糖酶在低聚木糖制备方面具有较大应用潜能。
- 李琦陈明真赵林果
- 关键词：木聚糖酶克隆
- 一种α‑鼠李糖苷酶及其制备方法和应用
- 一种α‑鼠李糖苷酶及其制备方法和应用，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；该重组酶最适反应温度高、热稳定性好，在优选条件下可高效表达目的蛋白，因此可在选择性水解芦丁、橘皮苷、柚皮苷、樱桃苷、柴胡皂苷及其它连接α‑鼠李...
- 赵林果解静聪李琦裴建军葛林
- 文献传递
- 嗜热木糖苷酶的氨基酸突变体及其应用
- 嗜热木糖苷酶的氨基酸突变体及其应用。本发明突变了来源于嗜热网球菌（<I>Dictyoglomus </I><I>thermophilum</I>）DSM 3960 GH 39家族的β‑木糖苷酶，并利用β‑木糖苷酶多位点突...
- 赵林果李琦李冬冬童欣怡蒋玉洁
- 文献传递
- 一种耐高温复合酶及其应用
- 一种耐高温复合酶及其应用，由β‑葡萄糖苷酶与β‑木糖苷酶组成。本发明提供的复合酶专一性强，且能够完全转化黄芪甲苷，使得环黄芪醇的转化回收率提高。本发明整个工艺完成时间不超过3 h，大大缩短了环黄芪醇的制备工艺，提高了生产...
- 赵林果李琦裴建军王佳宏苏二正吴涛
- 来源于黑曲霉NL-1木聚糖酶的多位点突变体及其应用
- 来源于黑曲霉NL‑1木聚糖酶的多位点突变体及其应用，所述多位点突变体含有如下8个突变位点中的至少6个，其中N28突变为H，N29突变为D，Y45突变为M，N47突变为L，S58突变为H，D76突变为R，G116突变为C，...
- 赵林果李琦裴建军吴涛翟华敏曹云峰
- 文献传递
