李丽梅
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
- 供职机构：内蒙古医学院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 磷酸化蛋白质组学研究技术进展被引量：2
- 2006年
- 翻译后蛋白质的修饰是目前蛋白质组学研究中的一个重要课题,蛋白质磷酸化是最常见、最重要的一种蛋白质翻译后修饰方式,蛋白质磷酸化和去磷酸化几乎调节着生命活动的整个过程。近年来蛋白质组学技术的发展和应用为磷酸化蛋白质的定性、定量和功能研究提供了必要的技术,使大规模和系统性进行磷酸化蛋白质研究成为可能。本文综述了检测和鉴定磷酸化蛋白质的蛋白质组学方法。
- 李丽梅王文礼
- 关键词：磷酸化蛋白质组
- 蛋白质组学技术对肝癌细胞株HepG2的G_2/M期细胞的热激蛋白的鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的:采用蛋白质组学技术鉴定肝癌细胞株HepG2的G2/M期细胞内的热激蛋白。方法:提取肝癌细胞株HepG2的G2/M期细胞的蛋白质,采用双向电泳的方法分离蛋白质,应用图像扫描仪及质谱(MALDI-TOF-MS)分析鉴定HepG2的G2/M期细胞表达的蛋白质。结果:采用双向电泳技术分离,并用质谱成功鉴定出HepG2的G2/M期细胞的热激蛋白。结论:肝癌细胞株HepG2的G2/M期细胞内的热激蛋白的成功鉴定,为探讨HSP在细胞生长和增殖中的作用奠定了基础,并为临床上肿瘤的治疗提供参考依据。
- 白瑞霞王文礼李丽梅刘婷
- 关键词：肝癌细胞株HEPG2蛋白质组学热激蛋白
- 稳定转染CDK2干扰RNA的人肝癌HepG2细胞系的建立
- 2008年
- 目的建立稳定转染CDK2干扰RNA的人肝癌HepG2细胞系。方法用Lipofectamine^TM 2000法将已构建好的特异性的携带绿色荧光蛋白的CDK2干扰RNA的重组质粒P^Genesil-1-CDK2转染入HepG2细胞，经G418筛选后获得稳定转染细胞株，并用倒置荧光显微镜观察转染细胞的绿色荧光蛋白，利用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测转染后的HepG2细胞CDK2 mRNA的表达。结果倒置荧光显微镜观察与KT-PCR检测，结果显示获得重组质粒P^Genesil-1-CDK2稳定转染的细胞克隆。结论建立了可稳定转染CDK2干扰RNA的人肝癌HepG2细胞系，为进一步研究细胞周期调控蛋白激酶对肝细胞癌的治疗与开发新的特异性药物提供了实验依据。
- 王震宇白瑞霞商进李丽梅姜丽丽王文礼
- 关键词：CDK2RNA干扰HEPG2细胞肿瘤
- CDK2干扰RNA对人肝癌细胞HepG_2细胞周期和增殖的影响被引量：6
- 2008年
- 目的:探讨CDK2 siRNA对人肝癌细胞株HepG2细胞CDK2 mRNA表达及其对HepG2细胞周期和增殖的影响。方法:利用脂质体转染法将特异性的携带绿色荧光蛋白的CDK2干扰RNA的重组质粒PGenesil-1-CDK2导入HepG2细胞,同时设立阴性对照空载体转染组PGenesil-1-HK。G418筛选稳定表达细胞株扩增培养。并用倒置荧光显微镜观察转染细胞的绿色荧光蛋白。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术(FCM),分别检测转染后的HepG2细胞CDK2 mRNA和细胞周期的变化,噻唑蓝(MTT)法检测癌细胞生长增殖率。结果:经1mo的G418筛选得到稳定表达细胞株,与阴性对照组及空白对照组相比,转染组CDK2 mRNA水平明显下降,细胞周期明显改变,细胞从G1期到S期发生阻滞。结论:RNA干扰技术可明显抑制CDK2基因的表达,引起HepG2细胞周期阻滞及肿瘤细胞生长抑制作用,为CDK2介导的肿瘤基因沉默疗法提供实验依据。
- 王文礼李丽梅关则红王震宇郝兴霞姜丽丽
- 关键词：CDK2HEPG2细胞RNA干扰细胞周期
- 肝癌细胞株HepG2的G1期细胞蛋白质组双向电泳图谱的建立被引量：1
- 2008年
- 采用双向电泳分离肝癌细胞株HepG2的G1期细胞的蛋白质,经考马斯亮蓝染色及图像扫描与分析显示:在pH3—10,13cm的IPG胶条上,可分离到227个重复性及分辨率均较好的蛋白斑点,蛋白斑点的匹配率为84%。建立了HepG2的G1期细胞蛋白质组双向电泳图谱,为其蛋白质组学的进一步研究奠定了基础。
- 白瑞霞王文礼李丽梅刘婷叶纪诚
- 关键词：双向电泳HEPG2细胞蛋白质组
- TdR诱导肝癌细胞株HepG2细胞周期同步化的效果被引量：2
- 2008年
- 取对数生长期的HepG2细胞,加入含TdR的培养基28h后,收集细胞,用PBS洗2次,加完全培养基,分别于12h和24h收集各组细胞。用流式细胞术分析细胞周期各时相细胞百分数。探讨TdR(胸腺嘧啶核苷)诱导人肝癌细胞株HepG2同步化后的细胞周期时相的变化。结果是TdR能较好地使肝癌细胞株HepG2同步化于G1期和G2期。TdR诱导细胞后,分别于12中h获得(63.62±2.82)%的G2/M期同步化细胞,24h后获得(75.24±0.17)%的G1期同步化细胞。
- 白瑞霞王文礼李丽梅
- 关键词：肝癌流式细胞术
