朱振军
- 作品数:4 被引量:4H指数:1
- 供职机构:湖南工程学院更多>>
- 发文基金:湖南省教育厅优秀青年基金湖南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 集成微流体驱动泵的微流控微珠阵列芯片用于基因突变检测的研究被引量:4
- 2013年
- 建立了一种基于微泵集成微流控微珠阵列芯片及三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)介导的等位基因特异性延伸的基因突变检测方法。将微流控芯片、引物修饰微珠阵列及基于毛细和蒸发作用的微流体驱动泵集成构建检测芯片,待测目标序列流过装配的微球阵列并与微球表面延伸引物杂交,在Apyrase和去除外切酶活性的Klenow DNA聚合酶协同作用下,引物3'末端碱基与目标序列包含的基因突变检测位点匹配则能够发生延伸,并将生物素化的dCTP掺入到引物的延伸序列中并固定在微球表面,链霉亲和素修饰量子点能与微球表面引物延伸序列中的生物素结合并提供荧光信号,而引物3'末端与目标序列存在单碱基不匹配则不能发生延伸。结果表明:采用这种单碱基识别技术,微泵驱动的芯片内可以检测0.2 pmol/L目标序列(信背比>3),液压驱动的芯片内能识别0.5 pmol/L目标序列,而芯片外检测只能识别0.1 nmol/L目标序列,微泵集成芯片在检测基因突变时其灵敏度较芯片外基因突变分析提高了500倍,并在0.5~30 pmol/L目标序列浓度范围内待测序列浓度与检测信号呈良好的线性关系。测定了一个人基因组样本中多药耐药蛋白基因1(MDR1)的两个多态性位点C3435T及G2677T,结果显示该样本具有3435CT及2677TT的基因型组合,此结果与DNA测序结果一致。本方法用于基因突变分析,具有良好的特异性、灵敏性及稳定性。
- 张何傅昕朱振军
- 关键词:微泵基因突变量子点
- 基于微流控微珠阵列芯片和DNA聚合酶介导引物延伸技术的微小核糖核酸检测方法
- 本发明公开了基于微流控微珠阵列芯片和DNA聚合酶介导引物延伸技术的微小核糖核酸检测方法。本发明是将生物素修饰的微小核糖核酸捕获探针通过生物素-亲合素结合方法固定于亲合素修饰微球的表面形成功能化微球,该微球固定在微流控芯片...
- 张何傅昕刘媛朱振军
- 文献传递
- 一种基于微流控微珠阵列芯片的核酸检测方法
- 本发明公开了一种基于微流控微珠阵列芯片的核酸检测方法。本发明主要是:将特异性捕获探针和电子富集蛋白固定于微球表面形成功能化微球,并将该微球固定在微流控芯片检测区中;将辣根过氧化物酶和检测探针修饰到纳米颗粒上作为信号标记;...
- 张何傅昕刘涟朱振军
- 文献传递
- 一种基于微流控微珠阵列芯片的核酸检测方法
- 本发明公开了一种基于微流控微珠阵列芯片的核酸检测方法。本发明主要是:将特异性捕获探针和电子富集蛋白固定于微球表面形成功能化微球,并将该微球固定在微流控芯片检测区中;将辣根过氧化物酶和检测探针修饰到纳米颗粒上作为信号标记;...
- 张何傅昕刘涟朱振军
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