曾国华
- 作品数：15 被引量：25H指数：4
- 供职机构：长春生物制品研究所更多>>
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- 人α_1型基因工程干扰素单克隆抗体及亲和层析柱的研制被引量：4
- 1992年
- 应用杂交瘤技术建立了稳定分泌抗rHu-IFN-α1的单克隆抗体细胞系,体外连续传代8个月以上,在BALB/c鼠体内连续传代6个月以上,分泌抗体能力不变,特异性专一。11D2单抗为IgG2b,17D9单抗为IgG1。采用不同方法提纯抗体均得到90％纯度。11D2单抗中和效价为1024,17D9单抗为65534。制备亲和层析柱的最佳抗体浓度为5mg/ml,凝胶与抗体体积比为1:2,偶联率均达到95％～98％。11D2单抗亲和层析柱提纯粗制rHu-IFN-α1干扰素不易被洗脱,不适宜制备亲和层析柱。17D9单抗亲和层析柱提纯粗制rHu-IFN-α1结合的抗原容易被洗脱,适宜制备亲和层析柱。粗制rHu-IFN-α1经17D9单抗层析柱后,获得了电泳纯级制品,比原纯度增加15倍,平均收率93％,比活性平均值为6.5×106IU/mg。残余鼠IgG量符合规程要求。
- 曾国华韩亮赵丽欣崔云泽
- 抗人红细胞M型抗原单克隆抗体的研制及初步应用被引量：1
- 1992年
- 应用杂交瘤枝术,用人M型RBC免疫的BALB/c小鼠脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞系NS-1融合,筛选出抗M血型抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株13H_2;经过8个多月连续传代培养增殖良好,仍能稳定分泌效价高、特异性强的单克隆抗体。细胞培养上清效价1∶512,亲和力11s。通过将此株单抗用于血型检测、标准红细胞谱细胞的鉴定和在法医上检测血痕,均证明此株单抗识别的只是红细胞上的M血型抗原,与其它血型抗原无关。较多克隆抗M型抗原血清特异性强,效价高,亲和力好,是检测MN血型的良好诊断试剂。
- 杨桂云刘淑玲曾国华朱建春张志李勇刘玉华李军
- 关键词：杂交瘤细胞单克隆抗体
- 应用CelliGen细胞罐高密度培养抗人B血型杂交瘤细胞条件的研究被引量：1
- 1991年
- 应用CelliGen细胞培养罐,培养抗人B血型杂交瘤细胞,获得了细胞密度超过10~7/ml,产物IgM 2g/L以上,特异性血凝效价达到2^(13)～2^(15)。培养条件50～80r/min、pH7.2、溶解氧(DO)30％～50％,高密度时维持DO2％～10％是必要的,4种气体混合流量为0.2LPM,高密度时要增加氧气供应,细胞密度达到1.6×10~6/ml时开始灌注,随细胞密度增加,灌注量亦增加,每天补充新培养液由800ml逐渐增加到3000ml。13B1杂交瘤细胞生长代谢与葡萄糖、乳酸有关,与氨代谢无关。
- 曾国华陈贻锴J.shevitz
- 关键词：单克隆抗体
- 用同系抗独特型单克隆抗体亲和层析法提纯小鼠单克隆抗体
- 1993年
- 1C_6McAb_2是抗7A_4McAb_1独特型的同系小鼠单克隆抗体。应用硫酸铵盐析,1C_6McAb_2—Sepharose 4B柱亲和层析法提纯了小鼠腹水7A_4McAb_1。获得的样品经二巯基乙醇还原,在SDS—PAGE上为两条带,分别是IgG的重链和轻链,免疫双扩散检查只与兔抗鼠IgG_1血清有沉淀反应,免疫电泳检查与兔抗鼠全血清反应只形成一条沉淀弧,纯化的McAb的PHA效价达125000/mg。本法提纯的McAb具有产量高,纯度好,特异性强等优点。
- 郭立君曾国华
- 关键词：抗独特型抗体单克隆抗体
- Hela细胞高密度悬浮培养的研究
- 1993年
- 应用1.5L Celligen细胞培养罐,通过加大培养基的更换量,实现了Hela细胞高密度悬浮培养,细胞浓度达1.1×10~7/ml,每周可收获10^(10)以上的活细胞。
- 陈贻锴曾国华
- 关键词：HELA细胞
- 抗基因工程干扰素单克隆抗体的纯化被引量：6
- 1993年
- 为获得纯化的单抗以制备高效的单抗亲和层析柱,采用盐析、DEAE-Sephacel离子交换层析和Sephacryl S-_(300)凝胶过滤层析方法,对IgG亚类不同的抗人α-1和α-2a型基因工程干扰素(rHu-IFN-α)单抗进行纯化。结果,11D_2(IgG_(20))的纯度为81.5％,活性回收率为58.3％;17D_9(IgG_1)的纯度为91.1％,活性回收率为73.1％;1A_5(IgG_1)的纯度为93.7％,活性回收率为96.0％;1B_5(IgG_1)的纯度为97.0％,活性回收率为73.7％;27A_7(IgG_(2a))的纯度为93.4％,活性回收率为79.0％。
- 韩亮刘淑玲赵丽欣张秀霞杨桂云张志曾国华
- 关键词：单克隆抗体层析干扰素提纯
- 应用McAb分析rHu-IFN-α_(2a)抗原表位与抗病毒作用的关系被引量：2
- 1996年
- 用自制的三系抗重组人α_(2a)型干扰素（rHu－IFN－α_(2a)）单克隆抗体，经中和试验，ELISA竞争试验和ELISA夹心试验，对α_(2a)型干扰素抗原表位与抗病毒作用之间的关系，以及干扰素激活靶细胞时与受体作用的方式等进行了研究，并提出了以下设想：（1）α_(2a)型干扰素分子只有一种抗病毒活性区。（2）活性区内至少有2个抗原表位。（3）干扰素抗病毒活性是其整个活性区与靶细胞上受体作用的结果，活性区内任何一个表位都不能单独完成抗病毒的作用。（4）活性区内每个表位对整个活性区的活性都非常重要，缺一不可。
- 韩亮曾国华赵丽欣杨桂云刘淑玲张秀霞张志
- 关键词：单克隆抗体干扰素抗原表位抗病毒活性
- 抗人A血型杂交瘤细胞高密度培养条件的研究被引量：1
- 1991年
- 抗人 A 血型杂交瘤15B_4细胞在 CelliGen 细胞培养罐中进行连续灌注培养,细胞密度达1.6×10~7/ml。每天灌注新培养液量由1000ml 增到2300ml,第14天后又逐日减少至1000ml,死细胞数随着转速的增加和灌注量的减少而增多。血凝效价呈梯度上升,滴度达到2^(14),相当于腹水效价。培养6天 IgM 产量为0.2克/升/天,10～18天波动在1.45～1.8克/升/天。15B_4细胞代谢与葡萄糖、乳酸有关,与氨无关。CelliGen 自控效果较好,适用于杂交瘤细胞的高密度培养。搅拌速度在120～150r/min 对细胞产生的剪切力有明显地破坏作用。溶氧控制系统有待改进。
- 曾国华陈贻锴J.shevitz
- 关键词：生物反应器
- 人MNS_s血型系统抗N单克隆抗体的研制被引量：1
- 1992年
- 应用杂交瘤技术,将 NS-1细胞与完整的红细胞免疫的 BALB/c 鼠脾细胞融合,获得MNS_s 血型系统分泌 IgG 抗 N 抗原的杂交瘤细胞株——10D_6。细胞培养上清效价1∶1024,亲和力7秒,经过8个月以上的连续传代培养,细胞增殖良好,性状稳定,持续分泌高效价,高亲和力,抗N 抗原的单克隆抗体。可作为血型检测的又一标准试剂。
- 杨桂云刘淑玲朱建春张志李勇曾国华
- 关键词：单克隆抗体
- 人类ABO血型系统-A抗原单克隆抗体的研制被引量：5
- 1989年
- 人类ABO血型的鉴捌，在临床医学、法医学、考古学及人类遗传学等工作中都是常规。传统的抗A、抗B标准血清均来自人血，全国每年用于制备ABO血型试剂所需血清量是十分可观的。应用杂交瘤技术制备血型单克隆抗体，为血型鉴别提供了新的有用工具，将为社会节省大批人血。本文报道的A抗原单克隆抗体，其生物活性稳定，可以取代传统抗A血清，作为新的血型检测试剂。
- 曾国华刘淑玲赵丽欣张秀霞王颖
