曹智忠 作品数:13 被引量:47 H指数:3 供职机构: 广州市胸科医院 更多>> 发文基金: 广东省医学科学技术研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
结核分枝杆菌候选抗原基因克隆与表达质粒构建 被引量:2 2003年 目的克隆并构建编码结核分枝杆菌(MTB)ESAT6,Ag85B和MPT64分泌蛋白的重组表达质粒。方法采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中分别扩增出ESAT6,Ag85B和MPT64基因(288bp,978bp and 687bp),并克隆到T载体,然后用双内切酶消化后,与同样酶消化的pGEX-4T-2连接,转化大肠杆菌E.coli DH5α,阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定。结果酶切鉴定所切下的片段大小与预计相符,测序结果与文献报道一致,证实符合表达框架。结论成功地克隆并构建了ESAT6,Ag85B和MPT64基因的重组表达质粒pGEX-ESAT6,pGEX-Ag85B和pGEX-MPT64。 陈建波 罗一鲁 谭守勇 冯蝶仪 曹智忠 刘志辉关键词:结核分枝杆菌 抗原 基因克隆 表达质粒 聚合酶链反应 肺结核并呼吸机相关性肺炎病原菌和耐药性分析 被引量:3 2015年 目的了解ICU中肺结核并发呼吸机相关性肺炎(VAP)病原菌的分布特点及其耐药性,为临床治疗提供依据。方法回顾性分析住院的136例肺结核并VAP的患者,使用美国BD公司凤凰100细菌鉴定系统,最低抑菌浓度法(M1C法)、纸片扩散法(KB法)测定下呼吸道标本对抗生素的耐药率、敏感率。结果肺结核并发VAP患者以混合细菌感染为主,约占85.3%,MRSA检出率为67.3%;产ESBLs菌的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率达78.2%。革兰阴性杆菌检出率最高,检出181株,占69.6%,革兰阳性球菌次之,检出50株,占19.2%,真菌检出29株,占11.2%;病原菌药敏检测结果表现出多重耐药现象,主要革兰阴性菌对多种抗菌药物耐药,鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦耐药率32.9%,铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物的耐药率18.2%,肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物耐药率12.5%;其次为头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶,对头孢噻肟、左氧氟沙星、庆大霉素耐药率较高。检出金黄色葡萄球菌对甲氧西林耐药67.3%;检出真菌对氟康唑耐药率52.6%,氟胞嘧啶耐药率73.7%。结论肺结核并发VAP的患者病原菌以混合细菌感染为主,且以多重耐药为主,根据病原菌耐药性的检测,可指导抗生素合理运用。 王娟 李德宪 曹智忠 吴桂峰 梁燕琼关键词:呼吸机相关性肺炎 肺结核 药敏试验 QuantiFERON-TB,Gold,Plus与QuantiFERON-TB,Gold,in,tube在肺结核辅助诊断中的一致性比较 被引量:2 2022年 目的比较QuantiFERON-TB Gold Plus(QFT-Plus)与QuantiFERON-TB Gold in tube(QFT-GIT)在肺结核辅助诊断中的筛查价值。方法筛检试验。前瞻性纳入2020年10—12月在广州市胸科医院住院的并进行QFT-GIT检测的患者作为研究对象,增加QFT-Plus检测,并收集这些患者的基本信息、临床表现、实验室检测结果和影像检查等资料。共纳入207例患者,分为结核组和非结核组。结核组共124例(包括94例确诊患者和30例临床诊断患者),其中男90例,女34例,年龄18~93岁,中位年龄57(36,66)岁。非结核组共83例(包括非结核分枝杆菌患者16例和其他肺部疾病患者67例),其中男49例,女34例,中位年龄60(51,68)岁。将确诊患者再分为低、中、高MTB荷菌量3级,和轻、中、重度肺结核3级。比较QFT-Plus与QFT-GIT检测结果,对比分析不同抗原管内γ-干扰素水平。各组间的差异采用Mann-Whitney U检验和Kruskal-Wallis H检验进行比较。结果QFT-Plus与QFT-GIT检测的结果的一致性较好(κ=0.786,95%CI:0.740~0.832),不一致率仅为8%,不一致的结果主要表现为QFT-GIT阴性/QFT-Plus阳性,占全部不一致的15/17。其中,QFT-GIT检测:敏感度为80.7%(95%CI:0.706~0.880)、特异度为76.3%(95%CI:0.649~0.850)、阳性预测值为79.8%(95%CI:0.697~0.873)、阴性预测值为77.3%(95%CI:0.659~0.859);而QFT-Plus检测:敏感度为84.3%(95%CI:0.743~0.910)、特异度为78.8%(95%CI:0.679~0.868)、阳性预测值为80.5%(95%CI:0.703~0.879)、阴性预测值为82.9%(95%CI:0.721~0.902),均高于QFT-GIT检测结果。不同结核分枝杆菌荷菌量及疾病严重程度患者之间,抗原管检测的γ干扰素水平差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论QFT-Plus检测和QFT-GIT检测之间有着较好的一致性,在肺结核的辅助诊断中有良好的应用价值;因为添加了结核特异性CD8细胞抗原,QFT-Plus检测有着更高的敏感度、更低的不确定性和更好的应用价值。本研究还发现,肺结核患者的荷菌量和疾病严� 王歆雨 苏碧仪 陈志颖 邝浩斌 关平 曹智忠 谭耀驹关键词:Γ-干扰素释放试验 26株鸟-胞内分枝杆菌复合群菌株药物敏感性分析 2008年 目的了解鸟-胞内分枝杆菌复合群对抗分枝杆菌相关药物的敏感性。方法对分枝杆菌菌种鉴定为鸟-胞内分枝杆菌复合群的菌株应用绝对浓度法进行药物敏感性测定,测定药物及其浓度(μg/ml)分别为:异烟肼(1、10)、利福平(50、250)、链霉素(10、100)、乙胺丁醇(5、50)、阿米卡星(10、100)、力克肺疾(1、10)、卷曲霉素(100、1000)、环丙沙星(1、10)、莫西沙星(1、10)、左氧氟沙星(1、10)和克拉霉素(10、100)。结果26株鸟-胞内分枝杆菌复合群的菌株依异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、阿米沙星、力克肺疾、卷曲霉素、环丙沙星、莫西沙星、左氧氟沙星、克拉霉素排序对各种药物低浓度的敏感率分别为:0、0、34.86%、65.38%、69.23%、3.85%、26.92%、7.69%、7.69%、7.69%、96.15%;对各种药物高浓度的敏感率分别为:23.08%、92.31%、76.92%、88.46%、96.15%、11.54%、88.46%、34.62%、84.62%、38.46%、96.15%。未发现对低浓度敏感对高浓度耐药的药物依赖型菌株。结论在测定药物中,鸟-胞内分枝杆菌复合群对乙胺丁醇、阿米卡星和克拉霉素三种药物的高、低浓度和利福平、链霉素、卷曲霉素及莫西沙星四种药物的高浓度均具有较高的敏感性。联合应用这些药物治疗鸟-胞内分枝杆菌复合群感染可望取得较好的临床效果。 黄业伦 刘玉美 罗春明 曹智忠 蔡杏姗 刘志辉关键词:分枝杆菌 绝对浓度法 药物敏感性 BacT/ALERT3D全自动培养仪在细菌鉴定和药敏试验的临床应用 被引量:28 2002年 吴龙章 蔡杏珊 潘美玉 曹务华 曹智忠 黄进晖关键词:BACT/ALERT 细菌鉴定 药敏试验 广州地区结核病患者肠杆菌科细菌碳青酶烯耐药基因的研究 目的 研究本院结核病患者肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶菌株的基因型,确定主要的流行株,为临床实验室常规检测及预防控制肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶菌株的发生及流行提供资料。方法 采用VITEK2 全自动细菌鉴定仪检测其对12种抗菌药... 曹智忠关键词:肠杆菌科细菌 耐药基因 革兰阴性菌产CTX-M-3型超广谱β内酰胺酶分子传播机制的研究 被引量:4 2002年 目的 :了解革兰阴性菌产CTX M 3型超广谱β内酰胺酶 (ESBLs)的分子传播机制 ,为临床防治提供依据。 方法 :收集革兰阴性菌医院感染无重复株共 378株 ,进行药敏试验和ESBLs产酶株的检测 ;肠杆菌科基因组内重复一致序列 聚合酶链反应 (ERIC PCR)进行克隆株的DNA分型 ;质粒转移实验、质粒谱及耐药质粒酶切指纹分析、等电聚焦电泳、PCR扩增TEM、CTX M基因及其克隆测序进行ESBLs基因分型和质粒定位。结果 :ESBLs的检出率为 16 .9% (6 4 / 378) ,其中CTX M 3型产酶株占 2 0 .3% (13/ 6 4 ) ;CTX M 3基因定位在 6 6kb和 75kb 2种接合性质粒上 ,6 6kb的质粒同时携带TEM 1基因 ;从不同来源的CTX M 3产酶株中可以分离到同种耐药质粒 ,染色体DNA同源性分析显示其为不同的克隆株。结论 :CTX M 3型ESBLs产酶株的传播机制以质粒介导为主 ,并可能存在局部携带CTX M 陆坚 唐英春 吴本权 张扣兴 张天托 黄再平 曹智忠 朱家馨 谈淑卿关键词:革兰阴性菌 MB/Bact系统分枝杆菌培养时间的研究 被引量:2 2007年 曹智忠 梁燕琼 张志坚关键词:分枝杆菌 MB BACTEC 罗氏培养基 MB/BacT液体分离系统分离分支杆菌L型的研究(摘要) 目的:研究在液体培养基里分离抗酸菌L型的特性,寻找可行性的分支枝杆菌L型的分离方法。方法:比较分支杆菌L型在改良罗氏培养基、L型琼脂培养基和MB/BacT液体培养基里分离率的差异;并观测其在液体培养基里的稳定性;渗透压环... 曹智忠 陈素颖文献传递 血浆(1,3)-β-D葡聚糖检测对肺结核患者肺部真菌感染诊断价值的初步研究 被引量:7 2017年 目的:探讨血浆(1,3)-β-D葡聚糖检测(G试验)对肺结核肺部真菌感染的诊断价值。方法:以2015年1-12月广州胸科医院收治的40例肺结核肺部真菌感染者为试验组,其中确诊者35例,拟诊5例。另选同期52例肺结核无肺部真菌感染者为对照组。测定两组患者血浆(1,3)-β-D葡聚糖含量,比较G值差异,G试验结果与病原学结果比较,分析G试验性能。结果:试验组真菌分布为白色念珠菌13株、曲霉菌属13株、热带念珠菌2株、光滑念珠菌2株、其他酵母菌6株。对照组病原学鉴定为真菌阴性。试验组与对照组G值分别为126.1和29.56 pg/m L(中位数),两组比较差异有统计学意义(P<0.001)。试验组G试验阳性35例,阴性5例;对照组G试验阴性41例,阳性11例。G试验敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及一致性分别为87.5%、78.85%、76.09%、89.13%、82.6%,约登指数为0.663。结论:肺结核患者肺部真菌感染白色念珠菌和曲霉菌属较常见。G试验诊断肺结核肺部真菌感染结果可靠、快速,敏感性、特异性和准确性较高。 胡族琼 李雪雅 胡琳燕 竺澎波 曹智忠 邹彩容 潘美玉关键词:肺部真菌感染 肺结核