彭国瑞
- 作品数：58 被引量：75H指数：5
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家大学生创新性实验计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 鸡白痢沙门氏菌阳性血清国家标准品制备用菌株的筛选被引量：1
- 2018年
- 为了制备鸡白痢沙门氏菌阳性血清标准型国家标准品及鸡白痢沙门氏菌阳性血清变异型国家标准品,对中国兽医微生物菌种保藏管理中心保藏的10株来源背景清晰的鸡白痢沙门氏菌菌株的形态、生化特性、培养特性、血清学特性、抗原性进行了鉴定,并进行了变异检查及沙门氏菌基于inv A基因的PCR检测。结果表明,CVCC79201株及CVCC79207株分别符合鸡白痢沙门氏菌标准型菌株及变异型菌株的特性,CVCC79201株菌制备的抗原与WHO标准实验室提供的AntiS.Pullorum Serum(S)及Anti-S.Pullorum Serum(V)国际标准品的强阳性血清和弱阳性血清均能发生100%凝集,CVCC79207株菌制备的抗原与Anti-S.Pullorum Serum(S)国际标准品的弱阳性血清发生75%凝集,与Anti-S.Pullorum Serum(S)国际标准品的强阳性血清及Anti-S.Pullorum Serum(V)国际标准品的强阳性血清和弱阳性血清均能发生100%凝集。用其制备免疫抗原免疫家兔后获得的阳性血清效价较高于鸡白痢沙门氏菌阳性血清国际标准品。结果证明,CVCC79201株及CVCC79207株可分别用于制备鸡白痢沙门氏菌阳性血清标准型国家标准品及鸡白痢沙门氏菌阳性血清变异型国家标准品。
- 张媛魏财文李建王秀丽彭国瑞张一帜辛凌翔蒋玉文
- 关键词：鸡白痢沙门氏菌阳性血清国家标准品
- 应用高效体积排阻色谱偶联多角度激光散射鉴定猪圆环病毒2型灭活疫苗及病毒样颗粒疫苗抗原被引量：3
- 2022年
- 本文旨在建立基于高效体积排阻色谱(high-performance size-exclusion chromatography,HPSEC)偶联多角度激光散射仪(multi-angle laser light scattering,MALLS)的猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)疫苗抗原检测方法。以纯化的PCV2灭活病毒及病毒样颗粒(virus-like particles,VLP)为参照,对4家生产企业的2种PCV2灭活病毒疫苗(a、b)及VLP疫苗(c、d)破乳后进行HPSEC-MALLS检测及分子量分析;结合PCV2抗原检测卡、Western blotting和透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM),鉴定了特征色谱峰;考察了方法的重复性和检测线性。结果表明,两家企业生产的PCV2灭活病毒疫苗破乳液水相经HPSEC分离,在保留时间约13.3 min处出现抗原特征峰;MALLS计算该色谱峰分子量分别为2.61×10^(6)(±4.34%)Da和2.40×10^(6)(±2.51%)Da。两种VLP疫苗也在13.3 min处出现抗原特征峰,分子量分别为2.09×10^(6)(±2.94%)Da和2.88×10^(6)(±11.85%)Da,接近PCV2的理论分子量;同时在保留时间约11.4 min处也出现色谱峰,经检测分子量为4.37×10^(6)(±0.42%)Da,TEM表征显示为VLP二聚体。取疫苗d和PCV2 VLP纯品进行重复检测,抗原色谱峰面积的RSD(n=3)均小于1.5%,重复性好;将PCV2 VLP纯品梯度稀释检测,VLP及其多聚体的色谱峰面积与浓度均呈良好的线性关系,R2分别为0.999及0.997,能够满足定量及多聚体含量分析。该方法有望成为一种准确、高效的PCV2疫苗的体外评价方法,用于质量评价与提升。
- 徐嫄杨延丽邹兴启李翠朱元源秦义娴李琰盛亚男刘业兵彭国瑞徐小艾张松平赵启祖
- 关键词：猪圆环病毒2型CAP蛋白病毒样颗粒疫苗
- 大肠杆菌O抗原定型血清标定用抗原的制备被引量：3
- 2016年
- 为研制用于标定大肠杆菌菌体抗原(O抗原)单因子定型血清效价的抗原,以大肠杆菌参考菌株CVCC1345(O2)、CVCC1350(O7)、CVCC1414(O74)为菌种,经条件优化确定了抗原制备的工艺。检测结果表明,当菌液调整至OD_(600 nm)值为0.147±0.026时,各型抗原的浓度为1×10~9CFU/m L,将其热处理后制备成反应抗原。按此吸光值各自制备3批抗原,3批抗原与血清的凝集价均分别一致,分别达到2^(11)(O2)、2^(12)(O7)及2~9(O74)。用180种大肠杆菌O抗原单因子定型血清对制备的抗原进行检测,制备的抗原仅与其对应型的血清发生特异性反应,与其余179种血清均不发生反应。研究结果显示,制备的抗原具有较好的稳定性及特异性,可以用于大肠杆菌菌体单因子定型血清效价的标定。
- 张媛王秀丽刘博张磊李建彭国瑞辛凌翔蒋玉文
- 关键词：大肠杆菌
- 猪圆环病毒2型疫苗及其效力评价方法比较研究
- 2024年
- 为探索对不同猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV2)疫苗产品进行统一质量评价的可行性,对国内该类疫苗产品及其现有效力评价方法进行了归纳和比较研究。结果发现,目前猪圆环病毒2型疫苗类产品种类有25个,且疫苗毒株数量多达10余个,效力检验方法包括传统的免疫攻毒法、血清学方法和多种不同的替代方法,但尚没有统一的效力评价体系。本研究可为进一步完善PCV2疫苗效力评价方法、统一评价疫苗效力、提高产品质量提供参考。
- 徐嫄彭国瑞徐小艾吴睿智赵启祖朱元源李翠王团结邹兴启李琰刘业兵
- 关键词：猪圆环病毒2型疫苗
- OEPR法构建mETX-mCPA表达质粒及其重组蛋白的免疫效果评价被引量：1
- 2019年
- 为了确定产气荚膜梭菌ε毒素(ETX)和α毒素(CPA)无毒突变体作为亚单位疫苗同时预防D型和A型产气荚膜梭菌病的免疫效果,试验用点突变结合OEPR法构建重组质粒pET32a-mETX-mCPA。将阳性重组质粒转入E.coli BL21(DE3)中,以预先添加乳糖的自诱导培养基表达目的蛋白。经SDS-PAGE分析,其表达的蛋白相对分子质量约为92 000,与预期值一致。Western blot检测结果表明,重组蛋白可被A型产气荚膜梭菌阳性血清所识别。致死性试验结果表明,重组蛋白不致死小鼠。以铝胶为佐剂将重组蛋白免疫家兔,二免血清0.1 mL可分别中和3个小鼠MLD的A型毒素和100个小鼠MLD的D型毒素。本研究用OEPR法成功构建了无毒突变体pET32a-mETX-mCPA质粒,获得的重组蛋白在家兔上显示出良好的免疫效果,为研发A、D型产气荚膜梭菌二价亚单位疫苗奠定理论基础。
- 彭小兵彭国瑞李旭妮董令赢冯丽芳蒋玉文
- 关键词：ETXCPA产气荚膜梭菌免疫效果
- 猪丹毒杆菌SpaA优势表位的串联表达及其免疫效果分析
- 2024年
- 构建串联SpaA优势表位的猪丹毒亚单位疫苗,对其免疫原性进行研究。将猪丹毒杆菌表面保护抗原A优势表位串联表达,提取并经亲和层析纯化获得重组蛋白,制备亚单位疫苗,分别免疫小鼠和猪,21日后攻毒。成功制备串联SpaA优势表位的猪丹毒亚单位疫苗,2μg重组蛋白可为小鼠抵抗1000MLD强毒攻击提供100%保护,100μg重组蛋白可为猪抵抗1MLD强毒攻击提供100%保护,可为猪抵抗2MLD强毒攻击提供67%保护。串联SpaA优势表位的猪丹毒亚单位疫苗具有良好的免疫原性。
- 李建张一帜李俊平王秀丽刘元杰李旭妮王甲彭国瑞张媛刘燕
- 关键词：优势表位猪丹毒免疫原性攻毒保护
- 猪霍乱沙门氏菌C79102株的制备与检定被引量：1
- 2017年
- 为研究猪霍乱沙门氏菌C79102株的菌种特性,制备了一批猪霍乱沙门氏菌C79102株,并对菌种的真空度、纯粹、剩余水分、培养特性、形态及生化特性、血清学特性、特异性、毒力等进行检定,重点对菌种的毒力进行研究。试验结果表明,该冻干菌种的真空度、纯粹、剩余水分、培养特性、形态及生化特性、血清学特性均符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》二〇〇〇版质量标准的规定,特异性检验结果显示C79102在含1%醋酸铊的普通肉汤中不生长,毒力试验结果显示,不同制备方法获得的肉肝胃消化汤培养的菌液毒力差异明显。本研究可以为猪霍乱沙门氏菌的制备和检定提供参考依据。
- 王秀丽张媛李建彭国瑞刘博辛凌翔蒋玉文
- 关键词：特异性毒力
- 大肠杆菌表达腐败梭菌α毒素及其产物的生物学特性鉴定
- 2018年
- 为了制备大肠杆菌源的重组腐败梭菌α毒素并对其生物学特性鉴定。利用PCR扩增α毒素基因,构建重组表达质粒pET32a-csa,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,对产物的反应原性、溶血活性、细胞毒性、小鼠致死毒性、毒力和毒性中和等生物学特性鉴定。结果显示,重组α毒素主要表达形式为包涵体,产物能够与腐败梭菌抗毒素血清反应,不能使绵羊红细胞发生溶血,具有细胞毒性和小鼠致死毒性,毒力超过300 MLD/mL,而且这种毒性可以被抗毒素中和。结果表明,通过大肠杆菌原核表达可以制备具有一定生物活性的重组腐败梭菌α毒素。
- 彭国瑞彭小兵李旭妮董令赢蒋玉文
- 关键词：大肠杆菌腐败梭菌Α毒素生物活性
- 引起猪排红色尿液的常见病因分析被引量：1
- 2009年
- 生产中随着猪饲养密度的提高和应激因素的增加,猪病种类明显多,病性也日趋复杂,病害成为养猪业最大的威胁。红尿是许多猪病的常见伴发症状,引起猪排红尿的原因很多。着重从各种红尿的成份出发,对能引起这一病症的传染性因素、营养性因素、中毒病、遗传因素、药物性因素等常见病因进行了分析,为猪病确诊提供了依据。
- 彭国瑞谈晨
- 关键词：症状病因
- 一种兽用A型产气荚膜梭菌类毒素的制备方法及其应用
- 本发明公开了一种兽用A型产气荚膜梭菌类毒素的制备方法及其应用。所述类毒素制备方法如下：将A型产气荚膜梭菌生产菌株接种于培养基中发酵培养，得到发酵产物，然后将发酵产物在L‑赖氨酸、甲醛水溶液和pH6.8下灭活脱毒，灭活脱毒...
- 彭小兵彭国瑞李旭妮蒋玉文
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