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张维: 作品数：16 被引量：60H指数：5; 供职机构：西北工业大学生命学院空间生物实验模拟技术国防重点学科实验室更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划西北工业大学基础研究基金更多>>; 相关领域：生物学医药卫生更多>>

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PGE2抑制肿瘤坏死因子诱导的成骨细胞凋亡被引量：3: 2011年; 前列腺素E2(PGE2)通过自分泌或旁分泌方式调节成骨细胞的增殖和分化。本文以小鼠原代成骨细胞和成骨样细胞MC3T3-E1为实验材料,研究了PGE2对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的成骨细胞凋亡的调节作用。检测发现,振荡型流体剪切力(OFSS)刺激可诱导成骨细胞内环氧合酶2(COX-2)表达升高,进而促进PGE2合成,并抑制TNF-α诱导的成骨细胞凋亡。COX-2选择性活性抑制剂NS-398显著促进TNF-α诱导的成骨细胞内半胱天冬酶3(caspase-3)的激活,且呈时间依赖性。Hoechst 33258/PI染色检测发现,NS-398促使TNF-α诱导的成骨细胞膜通透性进一步增强,核染色质浓缩加剧,而PGE2可显著抑制这一效应。Caspase-3活性检测证实,NS-398显著促进TNF-α诱导的成骨细胞内caspase-3活性增强,外源性PGE2可有效对抗该效应。这些结果表明,内源性和外源性PGE2可抑制TNF-α诱导的成骨细胞凋亡发生。; 杨周岐孟芮王哲张维商澎; 关键词：前列腺素E2 成骨细胞凋亡

细胞骨架染色中不同固定方法的探讨被引量：9: 2010年; 探讨不同细胞固定方法对细胞骨架染色的影响,以期发现适合于微丝与微管细胞骨架染色的固定方法。本文分别采用0.5%戊二醛、95%乙醇、4%甲醛及无水冷丙酮等四种固定液对人骨肉瘤细胞MG-63进行固定,然后分别对微丝和微管进行染色、封片,采用激光共聚焦扫描显微镜观察细胞微丝及微管骨架的形态。同时采用图像分析方法对细胞骨架微丝、微管荧光图像进行定量分析。结果表明,0.5%戊二醛固定的细胞,微丝呈清晰的束状纤维,微管呈有规律的束状纤维;95%乙醇固定的细胞,微丝纤维连贯性差,微管纤维非常清晰;4%甲醛固定的细胞,微丝纤维之间比较模糊,微管纤维呈圆弧状,联贯性较差;无水冷丙酮固定的细胞,微丝明显皱缩,呈模糊状,微管清晰可见,连贯性较好。因此,不同固定液固定的原理不同,要根据实验目的,选择合适的固定方法。; 张维骞爱荣高翔胡丽芳瓮媛媛韩晶商澎; 关键词：细胞骨架人骨肉瘤细胞

强磁重力环境对人成骨细胞发动蛋白-2表达和定位的影响被引量：4: 2008年; 研究强磁重力环境对人成骨细胞MG-63中发动蛋白-2表达和分布的影响。采用大梯度超导磁体模拟空间重力环境,该超导磁体可以提供3种不同的强磁重力环境(high magnetic gravitational environment,HMGE),即0g(12T),1g(16T)和2g(12T)。将MG-63细胞分别在0g(12T)、1g(16T)、2g(12T)及对照环境(1g,地磁)中培养24h后,采用Real Time PCR、Western印迹以及激光扫描共聚焦显微术等方法检测HMGE对发动蛋白-2的表达及定位的影响。结果显示,与对照组相比,0g(12T)、1g(16T)、2g(12T)环境处理组MG-63细胞中发动蛋白-2在mRNA上的表达量分别上调6.43、15.57、1.29倍;在蛋白质水平上,0g(12T)、1g(16T)环境处理组细胞发动蛋白-2分别上调89%和7%,而2g(12T)环境处理组则下调41%;在对照组中发动蛋白-2弥散分布于细胞质中,而0g(12T)处理组发动蛋白-2则有从细胞边缘向核周集中的趋势。上述结果说明强磁重力环境影响了发动蛋白-2在MG-63细胞中的表达和定位。; 狄升蒙骞爱荣田宗成张维胡丽芳尹大川续惠云瓮媛媛商澎; 关键词：模拟失重成骨细胞

人骨肉瘤MG-63细胞自分泌可溶性纤连蛋白参与细胞形态维持被引量：1: 2010年; 目的:探讨MG-63细胞自分泌可溶性纤连蛋白(FN)在细胞形态维持中的作用。方法:将培养24 h MG-63细胞随机分成对照组、更换新鲜培养基组(不含自分泌可溶性FN)、更换培养MG-63细胞24 h的条件培养基组(含自分泌可溶性FN)和更换添加FN的新鲜培养基组(添加FN),在0.5 h、1 h和2 h观察细胞形态;采用ELISA法检测新鲜和条件培养基中可溶性FN含量;采用免疫荧光方法观察细胞微丝骨架和不溶性FN的分布变化。结果:检测新鲜和条件培养基可溶性FN浓度结果表明,条件培养基中可溶性FN含量明显高于新鲜培养基(P<0.01);与对照组相比,不含自分泌可溶性FN组细胞0.5 h时回缩明显,由梭形变成圆形,1 h时开始重新铺展,2 h时形态恢复明显;含自分泌可溶性FN组和添加FN组细胞形态没有明显变化;观察细胞微丝骨架和不溶性FN分布发现,与对照组相比,不含自分泌可溶性FN组细胞0.5 h时应力纤维解聚,细胞外纤丝状FN明显减少。结论:细胞自分泌可溶性FN可能通过参与调节不溶性FN和微丝骨架的重构,参与细胞形态调节。; 罗明志李京宝李胜胜曹建平孟芮张维商澎; 关键词：MG-63细胞微丝

0.2-0.4T静磁场对肿瘤细胞生长和黏附功能的影响被引量：9: 2010年; 目的:研究0.2-0.4T中强静磁场对肿瘤细胞生长和黏附的影响.方法:用0.2-0.4T静磁场对SMMC-7721、HepG2和MCF-7细胞曝磁处理后,用噻唑蓝(MTT)法检测中强磁场对SMMC-7721、HepG2和MCF-7细胞生长增殖的影响.通过结晶紫染色检测细胞对FN黏附能力的变化,并应用流式细胞技术检测中强磁场对肿瘤细胞周期的影响.结果:中强磁场影响SMMC-7721、HepG2和MCF-7细胞的生长和黏附功能.中强磁场对不同的肿瘤细胞有不同的效应,对SMMC-7721的生长没有明显的影响,但降低SMMC-7721黏附能力(1.847±0.342vs1.094±0.33,P=0.012),与对照组相比SMMC-7721细胞周期的G2/M的百分比降低(12.05%±1.14%vs3.74%±0.87%,P=0.018).而对于MCF-7细胞,中强磁场促进细胞的增殖,增强细胞对FN的黏附能力(1.094±0.076vs2.177±0.474,P=0.017),使其G2/M的百分比降低(4.42%±1.23%vs12.04%±1.65%,P=0.004).HepG2细胞在中强磁场中,细胞的增殖受到抑制,对FN的黏附能力没有明显的变化(0.305±0.076vs0.394±0.089,P=0.467),但G2/M的百分比有所升高(1.90%±0.79%vs0.24%±0.15%,P=0.046).结论:0.2-0.4T中强静磁场对不同的肿瘤细胞有不同的影响.; 曹建平骞爱荣张维商澎; 关键词：肿瘤细胞增殖细胞周期

In-Cell Western检测细胞纤连蛋白: 2009年; 目的:利用In-Cell Western技术建立检测细胞纤连白(cFN)的方法.方法:对微孔培养的成骨样细胞进行固定封闭后,使用单克隆抗体对FN进行标记,经红外荧光二抗育后使用Odysssey系统对细胞进行扫描成像和数据分析.在此基础之上优化了固定剂、通透化、封闭剂和一抗浓度.果:免疫印迹法证实了In-Cell Western方法检测的特异性,当MG-63细胞密度低于90%汇合度(细胞数约1.6×104/孔)时,信号与细胞密度呈现较好的线性关系,最低每孔4×103个MG-63细胞的cFN可被检出.结论:成功地建立了一种快速、经济且高通量的cFN检测方法并将其应用于细胞外基质研究.; 李京宝胡丽芳张维骞爱荣商澎; 关键词：WESTERN 纤连蛋白细胞外基质

家蚕胚胎期重力相关基因的抑制消减杂交分析被引量：4: 2008年; 目的:筛选家蚕胚胎期重力相关基因。方法:对模拟失重与正常重力条件下的家蚕胚胎cDNA进行抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH),并对模拟失重过程中家蚕胚胎期表达发生变化的基因进行克隆、测序及同源性分析。结果:获得了34个与重力有关的序列标签。在模拟失重条件下有16个基因表达上调,其中15个为未知基因,1个为已知基因,其作用是维持mRNA的稳定性。在模拟失重条件下有18个基因表达下调,其中4个为未知基因,6个为蛋白合成相关基因,3个为基因组contig基因,5个为家蚕est库中功能未知基因。结论:模拟失重环境影响了家蚕胚胎发育期与mRNA稳定性和蛋白质合成相关基因的表达。; 田宗成周博骞爱荣续惠云刘佳狄升蒙张维瓮媛媛黄勇平商澎; 关键词：家蚕 SSH 模拟失重

^(12)C^(6+)离子辐射对细胞存活增殖及模拟失重和辐射对家蚕卵发育的影响被引量：5: 2008年; 目的:观察重离子辐射后人骨肉瘤细胞MG-63、人胚胎皮肤成纤维细胞ESF-1和人胚胎肝正常细胞HEL-1的生存和增殖情况,及重离子辐射和模拟失重环境处理后家蚕卵的孵化和发育情况,初步探讨重离子辐射对细胞及复合环境对家蚕卵的一些生物学效应.方法:利用超导磁体模拟失重环境,利用重离子加速器产生12C6+离子,用不同剂量辐射细胞和家蚕卵,检测在重离子辐射后细胞的存活和克隆形成能力及复合条件下家蚕卵的发育情况.结果:HEL-1细胞在0.1Gy时存活率已经开始降低,且随辐射剂量的增大这种影响也增加,到1.5Gy时存活率降低50%.ESF-1细胞在1.5Gy时存活率下降约20%,但辐射对骨肉瘤MG-63细胞的存活率影响不大.HEL-1和ESF-1细胞受到0.1Gy的辐射后克隆形成能力就明显降低90.2%和79.1%,而MG-63细胞一直保持较高的克隆形成率,直到1.5Gy时迅速降低75%.家蚕的出蚁率随辐射剂量的增大而降低,到30Gy时出蚁率降到2.22%.当辐射剂量为0～10Gy时,家蚕卵在两种不同重力条件下的孵化率没有明显差异.但当辐射剂量增加到15,20和30Gy时,失重环境明显促进了家蚕卵的孵化.另外,失重环境下家蚕卵的孵化时间比正常条件下缩短约3d左右.同时,高剂量的辐射处理会延迟家蚕幼虫的生长.结论:重离子辐射降低了细胞的存活和增殖能力,同时影响了家蚕从受精卵到幼虫的发育,降低了出蚁率.失重环境可以缩短家蚕卵的孵化时间.; 续惠云罗明志孟芮张维高翔李文建商澎; 关键词：重离子辐射家蚕卵

MACF1的生物信息学分析及细胞定位被引量：3: 2009年; 目的:了解微管微丝交联因子1(MACF1)的结构与功能.方法:采用生物信息学软件对MACF1结构、功能及亚细胞定位进行分析,并利用分子模拟软件对MACF1空间结构进行了模拟,同时采用免疫荧光显微术及共聚焦激光扫描显微术(CLSM)对生物信息学分析的部分结果进行了验证.结果:MACF1由5430氨基酸组成,Mr约为620×103,主要定位于胞质及细胞骨架.MACF1结构中包含1个ABD、37个血影蛋白重复单元、1个SH3结构域、2个EF手臂钙结合位点结构域、1个生长捕获特异蛋白2结构域等基序,并包含4个序列谱及5个序列模式.MACF1的德温特入藏号为Q9UPN3,MACF1包括4个亚型即MACF1/2/3/5,主要功能可能是将微丝、微管与其它骨架蛋白交联.同源模建结果表明,MACF1与α-辅肌动蛋白的ABD结构域一级序列的同源性为50.2%.免疫荧光显微术及CLSM结果表明,MACF1主要分布与细胞质,且与微丝、微管骨架部分共定位.结论:MACF1是一种大分子量的骨架交联蛋白,主要定位于细胞质,且与微丝、微管骨架部分共定位,MACF1结构功能可能与α辅肌动蛋白有一定的相似性.; 骞爱荣张博胡丽芳张维瓮媛媛高翔商澎; 关键词：生物信息学同源模建

模拟失重骨细胞条件培养基对成骨细胞活性的影响被引量：10: 2009年; 目的探讨三维随机回转模拟失重培养后的骨细胞条件培养基(RCM)对成骨细胞活性的调节作用。方法采用三维随机回转模拟失重培养小鼠骨细胞系MLO-Y448h后,收集回转条件培养基(RCM)和未回转对照组的条件培养基(CCM),用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法、对硝基苯磷酸(pNPP)法和流式细胞术(FCM)检测RCM对小鼠成骨样细胞系MC3T3-E1增殖、周期及细胞分泌碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。结果三维随机回转48h后的MLO-Y4RCM可促进MC3T3-E1增殖,用100%的MLO-Y4RCM和CCM培养MC3T3-E148h和72h后,RCM组比CCM组分别增加了1.21和1.27倍,差异性极显著(P<0.001);周期检测结果表明,RCM可以使MC3T3-E1越过周期阻滞点(S期);MC3T3-E1的ALP活性在RCM组和CCM组之间无差异。结论三维随机回转模拟失重培养骨细胞48h后的条件培养基促进了成骨细胞的增殖;并使成骨细胞的周期越过阻滞点,对成骨细胞的ALP活性无影响。; 孟芮续惠云王哲张维商澎; 关键词：失重模拟条件培养基骨细胞成骨细胞 ALP活性

张维

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